ROCKⅠ／Ⅱ基因下调对血管平滑肌细胞迁移及增殖的影响

目的：探讨ROCK亚型ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞（A7r5）迁移及增殖的影响。方法：利用Western blot技术检测ROCKⅠ和ROCKⅡ蛋白在A7r5细胞中的表达水平;利用siRNA技术使ROCKⅠ和ROCKⅡ基因表达分别下调,并检测基因下调后蛋白表达水平;利用Boyden小室法,观察ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后及ROCK特异抑制剂Y-27632对PDGF诱导的A7r5细胞迁移的影响;使用MTT法检测ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响。结果：ROCKⅠ和ROCKⅡ在A7r5细胞中的蛋白表达水平不同,ROCKⅡ较ROCKⅠ的表达水平高4倍;通过对A7r5细胞进行ROCKⅠ和ROCKⅡsiRNA转染,使二者蛋白表达水平分别下调83.4％和94.7％;基因表达下调后,ROCKⅠ明显抑制了PDGF诱导的A7r5细胞的迁移,而ROCKⅡ无明显影响,Y-27632也抑制了A7r5细胞的迁移;ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响无明显差别。结论：ROCKⅠ在血管平滑肌细胞迁移过程中起主导作用,ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞的增殖作用无明显差异。     

武夷山不同海拔黄山松细根碳、氮、磷化学计量特征对土壤养分的适应

细根的生态化学计量特征承载着植物生存环境的变化信息,从而为探索全球变化对植物内在机制的影响提供理论依据。以江西武夷山国家级自然保护区内五个不同海拔梯度(1200、1400、1600、1800、2000 m)的黄山松为对象,运用挖掘法采样后测定细根C、N、P含量及化学计量比特征,研究不同的海拔下细根对土壤养分变化的适应规律。结果表明:(1)黄山松细根C含量年平均值为(486.27±64.32)mg/g,海拔对其没有显著的影响,与土壤养分之间不存在显著的相关关系。(2)细根N含量年平均值为(9.26±2.09)mg/g,海拔对其没有显著的影响,但与土壤C含量存在显著的正相关关系。(3)细根P含量年平均值为(0.39±0.13)mg/g,与海拔梯度及土壤P含量均存在极显著正相关关系,而与土壤碳氮比呈显著负相关关系。(4)细根氮磷比为26.94±12.51,与海拔梯度、土壤P含量及土壤碳氮比均显著负相关。因此,黄山松细根吸收N是以消耗C为代价;细根P主要受土壤P供应量的限制;武夷山地区N沉降将进一步增加植物的氮磷比,加剧黄山松生长的P限制。     

ROCK Ⅰ/Ⅱ基因下调对血管平滑肌细胞迁移及增殖的影响

目的:探讨ROCK亚型ROCK Ⅰ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞(A7r5)迁移及增殖的影响.方法:利用Western blot技术检测ROCK Ⅰ和ROCKⅡ蛋白在A7r5细胞中的表达水平;利用siRNA技术使ROCK Ⅰ和ROCKⅡ基因表达分别下调,并检测基因下调后蛋白表达水平;利用Boyden小室法,观察ROCK Ⅰ和ROCKⅡ基因下调后及RocK特异抑制剂Y-27632对PDGF诱导的A7r5细胞迁移的影响:使用MTT法检测ROCK Ⅰ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响.结果:ROCK Ⅰ和ROCKⅡ在A7r5细胞中的蛋白表达水平不同,ROCKⅡ较ROCK Ⅰ的表达水平高4倍;通过对A7r5细胞进行ROCK Ⅰ和ROCKⅡ siRNA转染,使二者蛋白表达水平分别下调83.4%和94.7%;基因表达下调后,ROCK Ⅰ明显抑制了PDGF诱导的A7r5细胞的迁移,而ROCKⅡ无明显影响,Y-27632也抑制了A7r5细胞的迁移;ROCK Ⅰ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响无明显差别.结论:ROCK Ⅰ在血管平滑肌细胞迁移过程中起主导作用,ROCK Ⅰ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞的增殖作用无明显差异.