检测马铃薯S、X和Y病毒的灵敏度及其改进技术

用5.3M的NaOH:乙醇(EtOH)予处理新的聚苯乙烯微皿,以酶联免疫吸附法在病毒的特异吸光率(A405)处测定马铃薯S、X及Y病毒,其平均数增加14.8%,与对照PBS—T相比,在磷酸盐缓冲液中(PBS—T)加入0.01M二乙基二硫代氨基甲酸酯钠则增加了对PVY的特异吸光率37.3%。用0.2M二乙醇胺pH10.5和6～12%亚硫酸钠对PVX进行碱性降解后,比单用PBS—T增加了特异的对PVX的吸光率约2.06%。从logA405和log汁液的稀度之间的相关回归分析得出进一步增强灵敏度的特性。由回归方程来予测病毒的稀释限点,用未稀释的被侵染汁液测定相应增加的病毒特异光吸收值。一个改进的双抗体夹心酶联免疫吸附测定法,提高检测PVS稀释终点约达30～32%,这一数值比曾在其它植物病毒上报道过的要少。血清学测定在植物病理学上的一个主要应用方面,是对马铃薯病毒的大量测定。即检疫证明和抗病育种的鉴定两个方面。酶联免疫吸附测定(ELISA)是测定病毒最灵敏有效的方法之一,它可能对某些植物病毒的检测效率达1μg/ml。本研究的目的是测定和评价改进马铃薯S、X及Y病毒的ELISA灵敏性方法的效果。这些改进方法包括,用於清洗聚苯乙烯微皿以便用作ELISA的洗剂,病毒提取缓冲液的添加剂,以及一个双抗体夹心ELISA(DASELISA)的改进方法。     

小麦长蠕孢菌毒素

小麦长蠕孢菌(Helminthosporium sativum)在21—25℃的Fries溶液中振荡培养时产生的毒素,易引起与病原菌感染小麦类似的特征性病状。培养滤液的浓缩物,经丙酮沉淀,正丁醇-氯仿萃取,二次硅胶柱层析等程序,将毒素部分纯化,毒素的硅胶TLC层析表明,毒素层离组分至少为6种,在紫外灯下和碘蒸气中观察,显蓝紫色光斑和棕黄色斑,它们的Rf值依次为0.12,0.16,0.25,0.36,0.43,0.54,并具有倍半萜类化合物特有的紫外吸收带,它们的最大吸收值(max)分别为270,285,287,290,287,287nm,与国外报道乙醚提取物的紫外吸收特性相近(sommereyns & Closset,1978)。生物检测结果表明,上述组分均为毒素活性部分,它除能溶于ε为10以上的溶剂外,对热和光稳定,最适pH 4—7,极端pH下,毒素活性被钝化,回调最适pH后,活性仍可恢复,即令高温蒸煮也不丧失活性。毒素对小麦叶组织伤害能力及其活性与温度,毒素浓度和剂量,作用时间的变化呈正相关。     

一种植物叶片电阻测定法——ZD型植物电阻测定夹

植物组织电阻的变化是当前生物膜研究中的一项重要指标,这是由于目前已把生物膜结构的变化和破坏看成是逆境伤害首先的和共同的基础。正常细胞膜的膜系统,具有很高的电阻值,其比电阻可高达10~3～10~4Ωcm,和5nm厚的油层相近似,对于叶组织来说,比这个值还要高,一般实测值可达10~5～10~6Ωcm。植物在受到逆境伤害时,组织电阻变化的总趋势是降低,而外渗电导值是升高。但在逆境伤害的初期或轻度伤害时(亚致害剂量下),普遍有一个组