双歧杆菌粘附对肠上皮癌细胞酶的影响

目的 研究双歧杆菌粘附对肠道细胞生理功能和能理代谢的影响。方法 以婴儿型双直菌ＤＮＭ９２２７菌株粘附大肠癌ＣＣＬ－１８７细胞为实验模型。结果 婴儿以歧杆菌ＤＭ９２２７菌株在适宜的条件下与培养的大肠癌ＣＣＬ－１８７细胞共同培养１ｈ后,ＣＣＬ０１８６细胞的碱性磷酸酶以及琥珀脱氢酶的以反应均有所增强。结论 双歧杆菌对被粘附的大肠癌细胞的生理功能和能量代谢具有正向影响。     

珍奥酵母核酸对环磷酰胺致小鼠免疫功能低下的影响

目的 通过环磷酰胺致小鼠免疫功能低下,建立BALB/C小鼠免疫功能低下模型,评价珍奥酵母核酸对小鼠免疫功能低下的作用.方法 选用BALB/C小鼠,随机分组,分别给予相应的处理,选择T淋巴细胞亚群CD69+/CD3+比值、NK细胞亚群CD69+/NKG2D+比值、淋巴细胞转化率及血清IL-2含量作为细胞免疫的指标.结果 核酸各剂量组和添加剂组均可使免疫低下小鼠外周血和脾的T淋巴细胞亚群CD69+/CD3+比值、NK细胞亚群CD69+/NKG2D+比值提高,同时可提高免疫低下小鼠淋巴细胞转化率及IL-2水平,尤以高、中剂量核酸组和添加剂组明显(P＜0.05).结论 珍奥酵母核酸可以提高免疫低下小鼠的免疫功能,以其为珍奥酵母核酸的临床应用及提高机体免疫力提供了实验依据.     

诱导耐药K562/ADM和转基因耐药K562/MDR细胞株的生物学行为和耐药机制的比较研究

目的探讨转多药耐药基因mdr1的K562/MDR细胞株作为单机制耐药模型的可行性,为进一步研究肿瘤耐药及其逆转奠定基础。方法实验分为3部分:(1)在电子显微镜下观察慢性髓细胞白血病急性红白变敏感细胞系K562,阿霉素(adriamycin,ADM)诱导耐药细胞株K562/ADM和K562/MDR耐药细胞株的生物学行为;同时测定3种细胞系的群体倍增时间;以观察药物诱导和基因转移是否对细胞的生物学行为造成影响。(2)以K562细胞为对照,用MTT法分别测定阿霉素、柔红霉素(daunorubicin,DNR)、长春新碱(vincristine,VCR)对3种细胞的半数致死量(IC50)。(3)多药耐药相关基因与蛋白的检测。免疫细胞化学法观察mdr1基因编码的P-糖蛋白(P-gp)的表达;流式细胞术检测P-gp、bcl-2的表达百分率;生化法测定细胞内谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性;RT-PCR法检测拓扑异构酶(to-poisomeraseⅡ,topoⅡ)mRNA的表达变化。结果(1)在超微结构上,K562/ADM的细胞器—线粒体出现水肿,K562和K562/MDR未见明显异常;K562的群体倍增时间为19.67±3.10d;K562/MDR为20.40±1.80d;K562/ADM为28.47±1.75d;(2)K562/ADM和K562/MDR细胞对ADM的耐药倍数分别为23.1和1.2倍;对DNR为84.9和14.4倍;对VCR为298.3和10.1倍。(3)与K562比较,K562/ADM细胞的P-gp和Bcl-2蛋白表达率高且topoⅡcDNA片段大小发生变化;K562/MDR仅P-gp表达率高。结论K562/MDR的生物学行为与亲本细胞K562相似,耐药机制单一,可作为单机制耐药模型,对某一耐药基因进行更为深入精确的研究,也可针对该耐药基因准确地筛选相应的逆转剂。     

营养组合物对再障大鼠干细胞增殖的影响

目的：观察营养组合物对再生障碍性贫血大鼠干细胞增殖的影响,探讨其治疗再障的可能机制。 方法：SD大鼠100只,随机分为正常对照组、再障模型组（AA）及不同剂量的营养组合物组。构建再障模型的同时,第5天开始,分别对大鼠给予高剂量营养组合物2 26695 mg/（kg·d）、中剂量高剂量营养组合物1 5113 mg/（kg·d）、低剂量高剂量营养组合物1 05791 mg/（kg·d）,每天灌胃,直至实验结束（60d）,采用颈椎脱臼法处死大鼠,采用免疫组化法检测再障大鼠的肝、肾、胃、肠、脑干细胞标志物的表达情况。 结果：大鼠肝脏、肾脏及胃的干细胞标志物的含量增加,且随着营养组合物剂量增加而增加;营养组合物处理再障大鼠后,大鼠肠粘膜、神经干细胞的标志物表达量在各组中无显著变化。 结论：营养组合物对再障大鼠肝脏、肾脏及胃的干细胞增殖具有一定的促进作用;而对再障大鼠肠粘膜、神经的干细胞增殖无显著影响。营养组合物一定程度上可以促进再障大鼠的干细胞增殖,此可能为其治疗再生障碍性贫血的作用机制之一。     

川芎嗪与β-榄香烯联合应用对K562/ADM细胞的生长抑制作用

目的：探讨川芎嗪与β－榄香烯联合应用对K562/ADM的生长抑制作用。方法：以耐阿霉素细胞株K562／ADM为实验模型。结果：1．两者对K562／ADM及K562细胞的IC50接近,即耐药细胞K562／ADM对两种中药制剂不具有耐药性。2．非细胞毒性剂量的川芎嗪（TMP350μg/ml)及β－榄香精（β－elemene 4.0μg/ml)可显著降低ADM对K562／ADM细胞的IC50（P＜0．01）,提高细胞对ADM的敏感性,抗药性逆转分别为2．03倍及2．18倍。3．进一步将上述两种药物联合应用,发现其对ADM的抗药性逆转为4．65倍,明显高于二者单独应用,而且也高于两者单独应用之和,并且其对升高该细胞内ADM的浓度也具有协同作用。结论：川芭嗪与β－榄香烯联合应用能够抑制K562／ADM的的生长,并且具有协同性。     

β-榄香烯乳剂逆转多药耐药细胞株MCF-7/ADM对阿霉素耐药性研究

目的：测定中药β-榄香烯乳剂对MCF-7/ADM细胞的无毒剂量,并检测此无毒剂量是否有逆转MCF-7/ADM细胞对化疗药物阿霉素（ADM）的多药耐药（multidrug resistance,MDR）性。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定药物的细胞毒性及耐药细胞逆转倍数;荧光分光光度法测定细胞内药物浓度。结果：无毒剂量的β-榄香烯乳剂(6μg/ml）能显著降低化疗药物ADM对乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM细胞的IC50,明显增加耐药细胞内药物浓度。结论：初步研究表明β-榄香烯乳剂具有逆转MCF-7/ADM细胞MDR的作用。     

川芎嗪逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性

目的 探讨川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素（ADM）的耐药性.方法 MTT法测定细胞的药敏性,荧光分光光度法检测细胞内阿霉素浓度的变化,流式细胞术检测耐药细胞凋亡百分率的变化.结果 非细胞毒性剂量（320 mg/L）及低毒剂量（1250 mg/L）川芎嗪均能显著降低MCF-7/ADM的IC50（P＜0.01）,逆转倍数分别为2.13倍和2.82倍;均能显著增加耐药细胞内ADM的浓度（P＜0.01）.320 mg/L川芎嗪能显著增加耐药细胞的凋亡百分率（P＜0.01）.结论 川芎嗪具有部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性,其逆转机制与增加细胞内ADM浓度有关.     

PIC-BE对K_(562)/ADM多药耐药细胞mdr-1和bcl-2基因表达的影响

本文以多药耐药(MDR)细胞株K_(562)/ADM作为实验模型,研究了β-榄香烯吗素(PIC-BE)对该细胞中mdr-1、bcl-2和bax基因及其编码蛋白(P-gp、Bcl-2和Bax)表达的影响。结果显示,PIC-BE可显著抑制K_(562)/ADM细胞中mdr-1、bcl-2及P-gp和Bcl-2的表达,并在一定的范围内呈现对浓度和时间的依赖性。相同条件下,PIC-BE对该细胞中Bax的表达虽有所促进,但统计学上无显著差异,提示PIC-BE对K_(562)/ADM细胞MDR的逆转作用可能是通过其直接或间接地影响到该细胞mdr-1、bcl-2及P-gp和Bcl-2的表达或功能而实现。     

PIC-BE诱导K562/ADM细胞凋亡及逆转其MDR的研究

β榄香烯吗素（ＰＩＣ－ＢＥ）是抗癌新药β榄香烯的水溶性衍生物．采用人红白血病的多药耐药性（ＭＤＲ）细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ作为实验模型,观察ＰＩＣ－ＢＥ对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,并进而研究其对该细胞ＭＤＲ的可能影响．结果显示：（１）Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对ＡＤＭ具有明显的抗性,与Ｋ５６２细胞相比,抗性倍数约为４０倍,而两者对ＰＩＣ－ＢＥ的ＩＣ５０接近,无显著差异;（２）ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０～３０．０μｇ／ｍｌ）对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞具有明显的生长抑制和凋亡诱导作用,两种作用的强度在一定的范围内均具药物浓度和作用时间依赖性;（３）低毒剂量ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０μｇ／ｍｌ）与ＡＤＭ（４．０μｇ／ｍｌ）联合应用,可显著增强ＡＤＭ对该细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,升高细胞内ＡＤＭ的浓度,降低该细胞对ＡＤＭ的ＩＣ５０,使该细胞对ＡＤＭ的抗性有数倍逆转．上述结果提示,ＰＩＣ－ＢＥ不仅是一种有效的广谱抗肿瘤剂,而且也是一种有效的ＭＤＲ逆转剂     

mdr-1和bcl-2基因在K562/ADM多药耐药细胞中的共表达

为探讨肿瘤细胞多药耐药(MDR)形成的分子机理,本文观察了mdr-1、bcl-2和bax基因及其编码蛋白在人红白血病细胞株K562/ADM中的可能共表达。结果显示,在K562/ADM细胞中,在以mdr-1及P-gp过度表达为 特征的MDR形成时,其bcl-2及产物Bcl-2也过度表达,其中Bcl-2的表达阳性率约为相应敏感株K562的11倍;而Bax在二种细胞中均呈阳性表达,但无显著差异(P>0.05),提示bcl-2基因在mRNA和蛋白水平上的过度表达可能是K562/ADM细胞MDR形成时细胞凋亡耐受的分子基础。