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在磷酸化蛋白质组学研究中,根据是否需要对待富集样品进行甲酯化处理,可将固化金属离子亲和层析(IMAC)方法分为两类,即需要甲酯化处理的IMAC方法(ME—IMAC)和不需要甲酯化处理的IMAC方法(Non—ME—IMAC)。要实现对磷酸化多肽的有效富集和鉴定,就必须对富集方法进行选择和优化。利用基质辅助激光解析离子化串联飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)对两种方法富集的磷酸化多肽进行了比较研究。结果表明,ME—IMAC方法容易发生样品丢失,质谱结果的分析也比较复杂,而Non—ME—IMAC方法则不仅操作简单而且富集效果理想。另外,优化了Non—ME—IMAC方法的实验条件,指出最佳的结合溶液是8%ACN/0.3%TFA,最佳的洗脱溶液是0.1mol/LEDTA(pH值8.0),从而建立了一套完整而简单有效的磷酸化多肽富集方法。  相似文献   
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人民教育出版社 2 0 0 0年 6月出版的新高中教材《生物·第一册》(实验修订本·必修 )里 ,编写了“探索影响淀粉酶活性的条件”的实验 ,目的在于 :1)初步学会探索影响酶活性条件的方法 ;2 )探索淀粉酶在不同温度和 p H下催化淀粉水解的情况。通过该实验的学习可以让学生了解酶作为生物催化剂 ,其活性的发挥需要适宜的条件。其基本流程略。在经过近 2年的试行收到了良好的效果 ,同时从各地从事生物学教学的中学教师的反馈信息中了解到 ,“温度对淀粉酶活性的影响”实验在实际教学过程中 ,或多或少的遇到一些问题和令人遗憾之处 :首先是材料…  相似文献   
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