酶的微波孵育

我们在酶组织细胞化学技术中,应用微波辐射对生物组织进行快速孵育处理,获得满意的效果。具体操作;将小鼠断椎处死后立即打开腹腔,取出心、肾等组织,用刀片切成1mm~3左右的小块,放入2％多聚甲醛和2.5％戊二醛混合固定液中固定2小时。再用0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液浸洗3次,每次10分钟。     

伊立替康联合替莫唑胺对儿童难治性实体瘤近期疗效的研究

目的：研究伊立替康（Irinotecan,CPT-11）联合替莫唑胺（Temozolomide,TMZ）对儿童难治性实体瘤的近期疗效;方法：选取了11名难治性儿童实体瘤患者并争取了家属同意,分别给予了伊立替康：60mg／m2／d,ivgtt,连用5天;替莫唑胺：75mg／m2／d,连用5天,在伊立替康前一小时口服;用药期间同时给予思密达或者头孢菌素类抗生素预防药物相关性腹泻,并定期复查血象以及肝肾功;28天一疗程,每疗程行复查CT或MRI进行疗效评定和药物安全性评价。结果：11例患者经过2-6个疗程的治疗：疾病控制率（DCR）达到54％;明显延长了患者的无疾病进展生存期,中位无疾病进展生存期3．3个月。用药期间不良事件主要包括0-Ⅲ级的药物相关性腹泻、呕吐、血小板减少、贫血等;结论：伊立替康联合替莫唑胺方案能明显延长儿童难治实体瘤患者未进展存活时间,且耐受性好、安全性高,可以作为儿童晚期实体瘤患者的首选治疗方案。     

培门冬酶治疗儿童急性淋巴细胞性白血病的不良反应观察

目的：观察左旋门冬酰胺酶两种常用剂型在急性淋巴细胞性白血病患儿联合化疗中的治疗反应。方法：本院2010.3-2010.12行长春新碱＋吡柔比星＋门冬酰胺酶＋强的松方案化疗的急性淋巴细胞白血病患儿,使用含有聚乙二醇化的左旋门冬酰胺酶剂型培门冬酶即VDPAP者作为A组（40例）与既往使用含大肠杆菌剂型即VDLP者B组（60例）对比,观察不良反应。化疗前后检测血象,肝功能,凝血功能,观察过敏情况等,记录化疗后第28天的各项指标。结果：A组过敏发生2例（5%）而B组过敏发生13例（21.67%）,P值0.045,有统计学意义。既往对大肠杆菌剂型发生过敏的13例患儿首剂使用PEG-Asp均无过敏,2例于第二剂时出现皮试阳性。A组（〉2级）白细胞减少16例,中性粒细胞减少26例,血红蛋白降低0例,血小板减少5例,纤维蛋白原降低1例,部分凝血活酶时间延长0例;B组（〉2级）白细胞减少28例,中性粒细胞减少46例,血红蛋白降低2例,血小板减少16例,纤维蛋白原降低2例,部分凝血活酶时间延长0例。A组（未分级）抗凝血酶Ⅲ降低23例,D二聚体升高4例,谷丙转氨酶升高5例;B组（未分级）抗凝血酶Ⅲ降低33例,D二聚体升高8例,谷丙转氨酶升高5例。.血液学不良反应差异无统计学意义。A组平均住院日11.14天。B组平均住院日18.47天。结论：左旋门冬酰胺酶两种剂型不良反应相当,但培门冬酶具有使用次数少,使用方便,过敏率低,缩短住院日的优点。     

伊立替康联合替莫唑胺对儿童难治性实体瘤近期疗效的研究

目的:研究伊立替康(Irinotecan,CPT-11)联合替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)对儿童难治性实体瘤的近期疗效;方法:选取了11名难治性儿童实体瘤患者并争取了家属同意,分别给予了伊立替康:60mg/m~2/d,ivgtt,连用5天;替莫唑胺:75mg/m~2/d,连用5天,在伊立替康前一小时口服;用药期间同时给予思密达或者头孢菌素类抗生素预防药物相关性腹泻,并定期复查血象以及肝肾功;28天一疗程,每疗程行复查CT或MRI进行疗效评定和药物安全性评价。结果:11例患者经过2-6个疗程的治疗;疾病控制率(DCR)达到54%;明显延长了患者的无疾病进展生存期,中位无疾病进展生存期3.3个月。用药期间不良事件主要包括0-Ⅲ级的药物相关性腹泻、呕吐、血小板减少、贫血等;结论:伊立替康联合替莫唑胺方案能明显延长儿童难治实体瘤患者未进展存活时间,且耐受性好、安全性高,可以作为儿童晚期实体瘤患者的首选治疗方案。     

藏红花素对白血病患儿骨髓树突状细胞体外增殖作用的影响

目的:探讨藏红花素(crocin)对白血病患儿骨髓树突状细胞体外增殖作用的影响。方法:采用Ficoll-Hypaque法分离急性白血病患者骨髓液单个核细胞,将本实验分为六组。培养至第9天,在倒置显微镜下观察各组细胞形态,对各组细胞进行计数,并行瑞氏-姬姆萨染液染色,在油镜下观察典型树突状细胞的形态,应用流式细胞仪检测各组细胞免疫表型。结果:结果表明,实验各组均得到一定数量典型的DC,对照组中未见,实验各组细胞数目明显高于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。在加入细胞因子的各组中,以E组即加入藏红花素1.25mg/ml组细胞数最高,而C组细胞数与D组细胞数比较无显著差异(P>0.05)。培养至第9天,流式细胞仪免疫分析显示C、D、E、F各组CD1a+、CD83+、HLA-DR+细胞比例明显高于A、B两组(P<0.01),差异有显著统计学意义,A、B两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。D、F组与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。E组与C、D、F组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:藏红花素能促进树突状细胞增殖,其促进树突状细胞增殖的能力明显弱于细胞因子的联合作用。藏红花素协同细胞因子促进树突状细胞的成熟具有浓度依赖性,在藏红花素浓度为1.25mg/ml时作用最强,而浓度过高或过低时均未表现出明显的促进作用。     

流行性出血热病毒在人B淋巴母细胞中复制增殖

本文应用细胞培养、免疫荧光及电镜技术研究了B淋巴母细胞对EHF病毒的易感性。结果表明EHF病毒可在该细胞中增殖。感染细胞无明显细胞病变,在形态上与对照组无差别。虽然大部分感染细胞呈现明亮病毒抗原荧光,但在电镜下却难以找到完整的病毒颗粒,仅在扩张的囊泡中发现一些性质待定的微丝样物质。人B淋巴母细胞持续感染的建立,提示患者外周血中大量出现的异型淋巴细胞可能允许EHF病毒在其中复制。     

23例儿童霍奇金淋巴瘤临床分析

目的：分析儿童青少年霍奇金淋巴瘤（HL）患者的病理特征、临床表现及其预后影响因素。方法：收集青岛大学医学院附属医院血液儿科2001年5年至2013年8月收治的23例经病理确诊的儿童青少年HL患者的临床资料,采用Fisher确切概率法等进行各组间差异检验。结果：确诊病例共23例,中位年龄7.5岁,男：女发病比例=6.7：1,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分别占13.0%、26.2%、30.4%、30.4%;结节性淋巴细胞为主型（NLPHL）1例（4.3%）,经典型HL22例（95.7%）：混合细胞型（MC）10例（43.5%）,淋巴细胞为主型（LP）11例（47.9%）,结节硬化型（NS）1例（4.3%）;受累部位以颈部淋巴结最多见,其次依次为纵隔、腹腔及腹膜后、脾、骨骼、肺组织等,其中巨大纵隔肿块者2例;具有B症状者8例（34.7%）。化疗2个疗程评估总有效率为100%,完全缓解（CR）率69.6%,部分缓解（PR）率30.4%。Ⅰ期和Ⅱ期患者CR率100%,明显高于Ⅲ期和Ⅳ期患者（50%）,P〈0.05;23例患者7例复发,复发率Ⅲ期和Ⅳ期患者为46.2%,Ⅰ期和Ⅱ期患者为11.1%,前者高于后者（P=0.0098）;有B症状与无B症状患者之间复发率有显著统计学差异（P=0.019）;2例有巨大包块患者皆复发;各病理分型与疾病的复发间差异无统计学意义（x2=2.695,P〉0.05）。结论：儿童霍奇金淋巴瘤预后相对较好,但Ⅲ期和Ⅳ期、合并B症状及大肿块或大纵隔肿瘤的患者复发率高,应依据疾病危险度分层治疗,以期更好的预后。     

藏红花素对白血病患儿骨髓树突状细胞体外增殖作用的影响

目的：探讨藏红花素（crocin）对白血病患儿骨髓树突状细胞体外增殖作用的影响。方法：采用Ficoll-Hypaque法分离急性白血病患者骨髓液单个核细胞,将本实验分为六组。培养至第9天,在倒置显微镜下观察各组细胞形态,对各组细胞进行计数,并行瑞氏-姬姆萨染液染色,在油镜下观察典型树突状细胞的形态,应用流式细胞仪检测各组细胞免疫表型。结果：结果表明,实验各组均得到一定数量典型的DC,对照组中未见,实验各组细胞数目明显高于对照组,差异有显著统计学意义（P〈0.01）。在加入细胞因子的各组中,以E组即加入藏红花素1.25mg/ml组细胞数最高,而C组细胞数与D组细胞数比较无显著差异（P〉0.05）。培养至第9天,流式细胞仪免疫分析显示C、D、E、F各组CD1a＋、CD83＋、HLA-DR＋细胞比例明显高于A、B两组（P〈0.01）,差异有显著统计学意义,A、B两组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。D、F组与C组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。E组与C、D、F组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：藏红花素能促进树突状细胞增殖,其促进树突状细胞增殖的能力明显弱于细胞因子的联合作用。藏红花素协同细胞因子促进树突状细胞的成熟具有浓度依赖性,在藏红花素浓度为1.25mg/ml时作用最强,而浓度过高或过低时均未表现出明显的促进作用。