抗登革病毒NS1单抗的制备及检测NS1方法的建立

制备抗登革病毒NS1蛋白单克隆抗体,建立检测NS1的ELISA方法。表达1~4型登革病毒NS1蛋白,将1型NS1蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体。经ELISA、Western blotting、间接免疫荧光筛选和鉴定单克隆抗体,进行纯化和HRP标记。通过鉴定每两株单抗之间是否存在竞争作用,选择非竞争单抗组合并建立NS1捕获法ELISA。结果获得7株高滴度抗NS1单抗,捕获法ELISA可以检出10ng/mL NS1。原核表达登革病毒NS1蛋白制备的单抗可以和天然病毒抗原反应,NS1捕获法ELISA可以用于登革病毒感染检测。     

右归饮加减方联合"固本通络"针法对类风湿性关节炎患者血清炎性因子和细胞免疫功能的影响

摘要 目的：探讨右归饮加减方联合"固本通络"针法对类风湿性关节炎患者血清炎性因子和细胞免疫功能的影响。方法：按照随机数表法将我院于2018年1月至2020年1月收治的105例患者分为对照组（n=52）和研究组（n=53）。对照组给予西医常规治疗，研究组在其基础上给予右归饮加减方联合"固本通络"针法治疗，两组均连续治疗3个月。统计两组的临床总有效率，分别于治疗前后测定DAS-28积分和症状体征指数积分，于治疗前后检测患者类风湿因子（RF）、红细胞沉降率（ESR）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1（IL-1）水平及外周血CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺水平。结果：研究组的临床总有效率明显比对照组高（P<0.05）。两组治疗后DAS-28积分、症状体征指数积分、CRP、RF、ESR、CD8⁺及血清TNF-α、IL-1及IL-6水平均明显小于治疗前（P<0.05），CD3⁺、CD4⁺均明显大于治疗前（P<0.05），研究组治疗后症状体征指数积分、DAS-28积分、RF、CRP、ESR、CD8⁺及血清TNF-α、IL-1及IL-6水平均明显小于对照组（P<0.05），CD3⁺、CD4⁺均明显大于对照组（P<0.05）。结论：右归饮加减方联合"固本通络"针法治疗类风湿性关节炎的疗效明确，有助于改善细胞免疫功能、抑制炎症反应及减轻临床症状。     

用表达T7RNA聚合酶细胞系拯救麻疹病毒微复制子

构建稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系,用于提高拯救麻疹病毒微复制子效率.PCR扩增T7RNA聚合酶基因,克隆到真核表达载体,转染Vero细胞,用G418筛选到稳定表达的细胞株Vero/pcDNA3-T7.用Westernblotting证明了T7RNA聚合酶在细胞中的表达.将T7启动子控制绿色荧光蛋白表达的质粒转染该细胞后,绿色荧光蛋白在细胞株中得到表达.反向插入报告基因的微复制子转染感染麻疹病毒的Vero/pcDNA3-T7细胞后,细胞中能够检测到报告基因的表达.用细胞系取代痘苗病毒系统,可以提高拯救效率.