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目的 建立脊髓型肌萎缩症(SMA)小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)体外培养体系,研究反义寡核苷酸(ASO)对其生物学特性的影响,为深入研究SMA发病机制及药物筛选提供可靠的体内模拟工具细胞。方法 选取刚出生4 d的SMA小鼠,CO2窒息法处死后,于75%乙醇中浸泡,分离、纯化骨髓细胞。细胞荧光检测细胞表面标志物;RT-PCR及Western Blot研究ASO对运动神经元存活基因2(SMN2)外显子(exon7)列入水平以及运动神经元存活(SMN)蛋白表达量;EDU法和TUNEL法检测细胞增殖和凋亡能力。结果 体外分离培养的SMA模型小鼠BMMSC具有贴壁生长、可以传代等特点;对P3代BMMSC进行细胞免疫荧光鉴定结果显示：CD44、CD29高表达,CD34、CD45低表达;转染ASO后细胞SMN2 exon7列入率显著上升以及SMN蛋白表达量显著上调,并显著促进细胞增殖能力,同时核内Gemini bodies(gems)数量也有所增多。结论 成功建立SMA小鼠BMMSC体外培养体系,通过阳性药物ASO验证可促进BMMSC SMN2 exon7列入及SMN蛋白表... 相似文献
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小鼠脊髓重与颈膨大截面积QTL研究 总被引：2，自引：0，他引：2
应用近交系小鼠A/J和C5 7BL/ 6J以及其F2 代重组小鼠定位脊髓重与颈膨大截面积数量性状基因座(QuantitativeTraitLoci,QTL)。结果表明 13个QTL与脊髓重和截面积相关 ,这些QTL分别位于 2、4、8、14、15、17、18、19和X染色体上。其中 6个QTL与脊髓重相关 ;4个QTL与颈膨大截面积相关 ;3个QTL与二者均相关。在 13个QTL中 ,3个QTL (P <0 0 1)———SC1(位于D15Mit15 8附近 )、SC2 (DXMit14 0附近 )和SC3(DXMit6 4附近 )其表型变异的解释率分别为 2 4 %、19%和 15 % ;加性效应分别为 - 3 78、3 4 1和 2 0 6mg。其他QTL的P值在 0 0 1～ 0 0 5之间。在上述 3个QTL中 ,SC1是唯一与脊髓重和面积均相关的QTL 相似文献
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