H5N1亚型禽流感病毒NS1基因截短体的克隆与原核表达

禽流感病毒H5N1 NS1蛋白是一种非结构蛋白,在病毒感染过程中发挥着重要的作用.构建基因截短的重组蛋白,可为进一步研究NS1不同结构域与宿主蛋白间的相互作用奠定基础.在成功克隆禽流感病毒H5N1全长NS1基因并测序的基础上,将部分截短基因序列克隆到表达栽体pET28a(+)上,构建基因截短的重组表达质粒pET28a-NS1-RBD和pET28a-NS1-ED,转化大肠埃希菌BL21(DE3),阳性重组质粒经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,然后利用Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对重组蛋白进行纯化,并通过Western Blotting进一步确认NS1及截短体蛋白的表达.结果表明,实验成功构建禽流感病毒H5N1亚型的NS1蛋白截短体,并在大肠埃希菌中高效表达,这为进一步研究NS1蛋白不同结构域与宿主蛋白的相互作用提供了实验材料,为深入研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础.     

不同月龄虹鳟肝显微及超微结构特征

应用多种组织化学方法和透射电镜技术,对同一生长条件下8月龄、20月龄及30月龄虹鳟（Oncorhynchus mykiss）肝显微结构和超微结构特征进行研究。结果表明：不同月龄虹鳟肝被膜均为单层扁平上皮,厚度变化明显;肝细胞为单核,8月龄细胞排列不明显,20月龄及30月龄形成完整双层管式排列,胆管及其周围结缔组织随月龄发育尤为明显,血窦分支吻合成网状,窦壁内皮细胞扁平,胞质孔较多,窦腔内巨噬细胞具有典型胞质突,但并没有观察到Kupffer细胞;各月龄组肝星状细胞发育完善,胞突彼此相连;汇管区分为胆管孤管型、胆管动脉型、胆管静脉型、胆管动静脉型4种,8月龄以胆管孤管型为主,20月龄以胆管动脉型为主,30月龄以胆管动脉型、胆管动脉静脉型为主。因此,性成熟前虹鳟肝组织结构与其生理发育密切相关,胆管系统结构形式随月龄变化明显,肝细胞排列逐渐完善,Disse间隙胶原纤维及网状纤维含量逐渐增加,与被膜、中央静脉及汇管区结缔组织互相延伸,构成肝完整骨架,有利于调节肝细胞正常生理功能。     

ICU院内真菌性尿路感染临床特点及危险因素分析CSCD

目的探讨ICU院内真菌性尿路感染临床特点和危险因素。方法回顾性分析复旦大学附属上海市第五人民医院2016年1月至2020年12月期间ICU院内真菌性尿路感染患者临床资料,描述其临床特点、危险因素。结果①2016年—2020年收入复旦大学附属上海市第五人民医院重症监护室患者共2557例,符合研究条件的共130例,真菌性尿路感染发生率为5.1%。②ICU院内真菌性尿路感染临床表现不典型,其发生与性别、年龄、导尿管留置时间有关,与年份无关。③尿病原体培养以白念珠菌为主(42.5%),其次为光滑念珠菌(31.3%),热带念珠菌(19.4%),近平滑念珠菌(4.5%),其他念珠菌(2.2%)。④对ICU院内真菌性尿路感染危险因素分析,单因素分析发现糖尿病、原发疾病脑卒中、抗生素种类、感染前血白细胞计数,感染前灌肠5个因素具有统计学意义(P<0.05)。将单因素分析有意义的指标纳入多因素分析中,结果提示糖尿病(P<0.001,OR=5.488)、原发疾病脑卒中(P=0.009,OR=2.782)、感染前血白细胞计数(P=0.014,OR=3.515)、感染前灌肠(P=0.001,OR=3.567)是ICU院内真菌性尿路感染发生的独立危险因素。结论针对ICU院内真菌性尿路感染,我们应采取积极措施治疗原发疾病及基础疾病,同时应警惕灌肠后所致的肠源性污染。