霍乱毒素B亚基融合蛋白表达系统的构建

霍乱毒素Ｂ亚基（ＣＴＢ）是良好的免疫佐剂和载体蛋白。本研究通过定点突变,在ＣＴＢ基因（ｃｔｘＢ）３＇端终止密码前引入了限制性内切酶ＥｃｏＲＩ,构建了质粒ＰＭＣ０５,ＰＭＣ０５中ＣＴＢ与下游ｌａｃＺ＇基因阅读框架相同,转化大肠杆菌后能够表达ＣＴＢ与β－半乳糖苷酶α肽的融合蛋白;所表达的融合蛋白能与ＧＭ１结合,说明融合蛋白保持ＣＴＢ的基本高级结构和生物学活性;融合蛋白能与抗－ＣＴＢ抗体结合,说明融合蛋     

双齿长蠹—中国新记录

长蠹类昆虫,在国内报导较多的只有竹长蠹Dinoderus minutus Fabr.及谷蠹Rhizopertha dominica Fabr. 昆明地区常见一种为害边材和幼树的长蠹,过去称为“边材小蠹”,学名未定。最近我们鉴定为双齿长蠹Sinoxylon japonicum Lesne,属长蠹科Bostrichidae长蠹亚科Bostrichinae。 成虫体长4.0～4.5毫米,宽1.8～2.2毫米,黑色;头及前胸背板黑色;触角、上唇,两须、翅鞘及跗节棕褐色。前胸背板帽状,覆盖头部,其上密生微细颗粒,以前端两侧者较大而显著。渐至中部和后方则渐小,成为小的密集点刻;前胸背板上密生灰白色微毛。触角10节。端部3节向内侧延伸成叶状。鞘翅全面具细点刻,饰以灰色纤毛;鞘翅后端急剧倾斜成为75°～80°的角度,两个鞘翅的倾斜部分合而为圆形,其上各     

霍乱弧菌O139多糖抗原的提取方法及优化

目的:研究霍乱弧菌O139多糖抗原的提取方法,以获得高纯度的多糖抗原。方法:采用热酚水法提取霍乱弧菌O139的脂多糖(LPS),并增加了DNaseⅠ、RNase消化步骤,以去除DNA及RNA的污染;进一步采用酸水解法获得脱毒的O特异性多糖(O-SP)。结果:经生化方法检测,证实提纯的LPS和O-SP纯度较高,能满足进行霍乱免疫研究的要求。结论:该方法简便可行,值得推广。     

核转录因子C/EBPβ的研究进展

C／EBPβ是转录因子C／EBPs(CCAAT enhancer binding proteins)家族的重要成员,其C端具有高度保守的DNA结合域和二聚化功能域。它主要通过对靶细胞基因转录的调节,参与细胞增殖与分化、肿瘤发生与凋亡、机体炎症反应等重要生命活动;其功能受到蛋白酶降解、磷酸化、蛋白质相互作用等多种途径的调控。本综述有关C／EBPβ的生物学功能及其调控机理近年来的一些研究进展。     

非受体酪氨酸激酶ARG与过氧化氢酶相互作用机制的初步研究

通过体外结合实验,发现Arg蛋白与过氧化氢酶之间有相互作用,且这种作用是通过Arg蛋白的SH3结构域和过氧化氢酶的P290FNP介导的。利用体外激酶分析和Western印迹证明Arg蛋白可以使过氧化氢酶磷酸化。本研究为过氧化氢酶的活性调控研究奠定了基础。     

恶性疟原虫子孢子CS抗原融合基因的表达及其生物活性

采用遗传工程技术获得了含有恶性疟原虫子孢子CS抗原融合基因的重组质粒pMC055－CS的工程菌株,能高效分泌CS抗原的融合蛋白至胞外,可达25mg／L．具有霍乱毒素B亚单位（CT－B）和子孢子CS的抗原性．将纯化的融合蛋白免疫C57纯系小鼠,免疫后抗CT－B抗体滴度可达1：3200～6400,抗CS抗体滴度可达1：320～640．免疫小鼠采用约氏疟子孢子腹腔攻击,保护率达34～45％．     

胎球蛋白A/AHSG的结构与生物学功能

胎球蛋白A(fetuin-A/ AHSG)是一种由肝脏分泌的人血浆糖蛋白．它在人体血液中的含量与外伤感染、心血管疾病、结石、SARS等疾病相关．AHSG具有高度的遗传多态性,其基因的多态性位点与Ⅱ型糖尿病、血管钙化和SARS的易感性等相关．AHSG有多种生物学功能：能够抑制碱性磷酸钙（basic calcium phosphate, BCP）沉淀,维持体液中钙含量;能够参与巨噬细胞失活,调控炎症程度;能够抑制胰岛素受体自身磷酸化和其酪氨酸激酶的活性,导致产生胰岛素抵抗和Ⅱ型糖尿病;能够与转化生长因子-β（transforming growth factor, TGF-β）结合,进而抑制肠肿瘤的生长．本文将近年来关于AHSG的结构、遗传多态性、含量和生物学功能的研究进展情况作一概述．     

FHL2参与调控MCF-7细胞周期

目的：研究FHL2对细胞周期阻滞的影响。方法：应用pSR-GFP/Neo载体构建FHL2-siRNA干扰载体,转染MCF-7细胞,G418筛选稳定细胞系,通过流式细胞仪检测离子辐射后细胞周期的变化。结果：利用设计的FHL2-siRNA干扰载体能够干扰细胞中FHL2的表达;当离子辐射后,FHL2敲除细胞G2/M期阻滞的程度比野生型细胞显著降低。结论：FHL2参与调控MCF-7细胞离子辐射后细胞周期G2/M期阻滞。     

中国汉族人群MASP2基因单核苷酸多态性的连锁不平衡和单体型分析

目的：探讨中国汉族人群甘露糖结合凝集素相关的丝氨酸蛋白酶（MASP2）基因单核苷酸多态性（SNP）的连锁不平衡和单体型,为相关研究提供更为详实的数据。方法：选取30例广州汉族无关个体,用重新测序的方法进行MASP2基因SNP的发掘,构建连锁不平衡（LD）模式,与HapMap公布的其他4个人群数据相比,并选择4个标签SNP（tagSNP）在232例北京汉族个体和291例广州汉族个体中分析MASP2的多态性和单体型。结果和结论：对MASP2的重测序共检测出16个SNP,LD分析显示来自中国不同地区人群的LD模式基本相同,与来自美国和日本的人群存在差异;北京和广州地区汉族人群tagSNP的等位基因和基因型频率分布不存在显著差异。     

霍乱毒素A基因内部翻译调控元件具有翻译起始功能

通过大肠杆菌体外转录－体外翻译系统,证明霍乱毒素Ａ基因内部的翻译调控元件具有翻译起始功能,且其翻译起始效率较ｃｔｘＡ基因高得多,当ｃｔｘＡ的起始密码突变时,从该元件起始的翻译效率下降,说明基因内翻译起以ｃｔｘＡ翻译起始的调控。结果进一步证实了霍乱毒素Ａ、Ｂ亚工比例表达调控的翻译弱化－翻译偶联机理。