皮肤癣菌体外蛋白水解酶活性测定

目的观察皮肤癣菌的体外蛋白水解酶活性;比较分离自不同感染部位的红色毛癣菌的体外蛋白水解酶活性。方法实验菌株包括来自不同感染部位的红色毛癣菌22株、须癣毛癣菌3株、犬小孢子菌5株,进行体外培养,并利用9-羟基乙酚噻唑标识的酪蛋白和酶标仪检测真菌细胞外蛋白水解酶的活性。结果须癣毛癣菌的体外蛋白水解酶活性高于红色毛癣菌和犬小孢子菌（P〈0.05）,而红色毛癣菌和犬小孢子菌之间无差异（P〉0.05）。红色毛癣菌的细胞外蛋白水解酶活性在分离自浅部感染部位的菌株之间无差异（P〉0.05）,但高于引起毛癣菌肉芽肿的菌株（P〈0.05）。结论不同的皮肤癣菌体外蛋白水解酶活性可能不同;分离自不同感染部位的同一菌种的体外蛋白水解酶活性也有可能不同。     

马尔尼菲蓝状菌病致溶骨性损害合并Sweet样皮疹1例

本文报道广西医科大学第一附属医院皮肤性病科收治的马尔尼菲蓝状菌病致溶骨性损害合并Sweet样皮疹1例。免疫力正常人群较少患马尔尼菲蓝状菌病。本例患者既往体健,起初合并融骨性损害,在两性霉素B、伊曲康唑治疗过程中逐渐出现Sweet样皮疹。患者经两性霉素B、伊曲康唑、激素等治疗后,病情逐渐好转。     

马尔尼菲篮状菌基因研究进展

温度依赖性双相真菌马尔尼菲篮状菌可致局限性或全身播散性感染,在东南亚以及我国南方,尤其是广西、广东有区域性流行。该菌主要感染免疫力低下的人群,是流行区艾滋病患者特征性的机会性感染。文中主要介绍马尔尼菲篮状菌的相关基础知识、基因研究历史进程以及综述马尔尼菲篮状菌在生长发育、双相转换、信号通路、细胞壁合成、细胞代谢、应激反应、热休克、色素、毒力及耐药方面的基因研究进展。     

SakA对马尔尼菲篮状菌药物应激及致病力的影响

目的探讨SakA对马尔尼菲篮状菌(Talaromyces marneffei,TM)致病力及药物应激的影响。方法构建SakA敲除株(ΔsakA),观察孢子与巨噬细胞共培养;比较野生株及ΔsakA在药物压力下的生长状况;比较野生株和ΔsakA分别感染小鼠的死亡率、菌载量。结果被巨噬细胞吞噬24h后,野生株在胞内可见腊肠样酵母细胞,而ΔsakA以孢子形态存在。ΔsakA共培养裂解物形成的菌落数少于野生株。与野生株比较,ΔsakA对棘白霉素类药物更敏感。ΔsakA感染小鼠死亡率、菌载量较野生株明显降低。结论 SakA与TM酵母相对棘白霉素不敏感相关,在其致病过程中发挥重要作用。     

钙调磷酸酯酶Calcineurin在控制马尔尼菲篮状菌无性发育、极性生长、压力应激中的作用研究CSCD

目的明确钙调磷酸酯酶calcineurin调节亚基编码基因(cnaB)及催化亚基编码基因(cnaA)在马尔尼菲篮状菌无性发育、极性生长、压力应激的作用。方法与母本FRR2161(wild-type)对比,观察cnaB基因敲除株(ΔcnaB)、cnaA基因敲除株(ΔcnaA)在25℃、37℃的生长、形态发生及压力应激变化。结果ΔcnaB敲除株、ΔcnaA敲除株在无性发育、极性生长、压力应激均存在严重缺陷;ΔcnaA在细胞溶解分离、压力应激表现出更严重缺陷。结论cnaB、cnaA对马尔尼菲篮状菌无性发育、极性生长、压力应激均发挥着重要功能;但cnaA在细胞溶解分离、氧化应激、盐应激等表现出更为重要的调控作用。     

实时荧光定量PCR检测肺泡灌洗液在HIV阴性马尔尼菲篮状菌病诊断中的价值

目的 探讨实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)技术检测HIV阴性支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)对马尔尼菲篮状菌病诊断价值。方法 收集2019年9月—2022年6月就诊于广西医科大学第一附属医院的17例HIV阴性有肺部感染症状的TSM患者及33例肺部其他真菌感染患者或非感染患者的BALF及血清标本,分别提取总DNA,运用qPCR技术检测标本中TM菌载量值,并同时进行BALF真菌培养。结果 同一时间采集的17例外周血和支气管肺泡灌洗液中,在外周血样本中qPCR检测阳性仅11.8%(2/17),BALF真菌培养TM阳性患者同份BALF标本qPCR阳性率可达90.0%(9/10);BALF真菌培养TM阴性患者中,其同份标本有2例qPCR检测呈阳性。33例对照组患者的血清及BALF qPCR均为阴性。其中,BALF qPCR阳性样本的Cq值中位数为31.40,范围为20.71～35.59。同份BALF样本中,BALF qPCR技术(Kappa值：0.708)比BALF培养(Kappa值：0....     

伊曲康唑预防艾滋病患者真菌感染有效性的Meta分析

目的 对艾滋病患者预防性应用伊曲康唑的有效性进行Meta分析,为临床合理使用伊曲康唑预防艾滋病患者真菌感染提供依据.方法 制定检索策略,检索Cochrane图书馆临床对照试验数据库、PubMed、EMbase、EBSCO、万方和清华同方数据库,时间从1981年1月～ 2013年7月,收集有关对艾滋病患者预防性应用伊曲康唑的随机对照临床研究.应用Stata 10.0软件进行Meta分析,采用异质性检验（齐性检验）,统计合并效应量,得出合并后的RR值及其95％ CI值.结果 共3篇文献符合纳入标准进入Meta分析.结果显示,预防性应用伊曲康唑可以明显降低艾滋病患者的总体真菌感染率,RR =0.54 （95％ CI：0.44 ～0.67）,P＜0.05;而侵袭性真菌感染率差异无统计学意义,RR =0.38（95％ CI：0.13～1.10）,P＞0.05;病死率差异无统计学意义,RR =1.14 （95％ CI：0.79～1.65）,P＞0.05.结论 艾滋病患者预防性应用伊曲康唑可以明显降低总体真菌感染率,目前对侵袭性真菌感染并未显示有预防效果.对于艾滋病患者是否预防性应用伊曲康唑,需要仔细评估,要根据不同疾病阶段的真菌感染率制定不同的预防策略.     

中国广西地区格特隐球菌菌种复合体的基因型分析

目的探讨中国广西地区格特隐球菌菌种复合体的基因型特点、种群结构特征和全球菌株的进化关系。方法收集2014—2018年间分离自临床确诊为隐球菌病患者的隐球菌临床株,利用CGB培养基初步筛选格特隐球菌菌种复合体。采用多位点序列分型方法(MLST)确定基因型。通过MEGA7软件构建系统发育树,利用R语言进行主成分分析。使用微量肉汤稀释法M27-A3方案行体外抗真菌药物敏感性检验。结果120株临床隐球菌中,分离出11株格特隐球菌菌种复合体,6株属于C.deuterogattii(AFLP6/VGII),5株属于C.gattii sensus stricto(AFLP4/VGI)。分离自广西的AFLP6/VGII呈遗传多样性,主要起源进化自南美巴西格特隐球菌菌种复合体。11株分离菌株均对常用抗真菌药物敏感。结论中国广西可能出现高致病性AFLP6/VGII,对格特隐球菌菌种复合体进行有效的全国性监测是必要的。     

米卡芬净联合两性霉素B／伊曲康唑作用于马尔尼菲青霉致病性酵母相的体外药敏实验研究

温度双相性真菌马尔尼菲青霉所致的马尔尼菲青霉病是一种严重的机会性真菌病,在东南亚、我国南方,尤其是广西有区域性流行。马尔尼菲青霉主要感染免疫力低下的患者,近年来发生于AIDS患者的马尔尼菲青霉病逐年增多,已成为东南亚和我国南方的AIDS患者最常合并的机会性真菌感染病之一。马尔尼菲青霉侵犯肺、肝、脾、骨髓等多种组织器官,如不及时治疗,死亡率很高。目前该病的治疗药物首选两性霉素B引。     

农杆菌介导的马尔尼菲青霉基因转化技术的建立及优化

目的建立农杆菌介导的马尔尼菲青霉(PM)基因转化技术,并对该技术条件进行优化。方法以二元质粒p DHt/SK为载体,通过农杆菌介导将pyr G基因插入马尔尼菲青霉尿嘧啶缺陷株SPM4(pyr G-,nia D-)中,在不含尿嘧啶的培养基中筛选阳性转化子。运用PCR验证重组子。进一步对影响转化效率的农杆菌类型、共培养浓度、转化媒介、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等六个条件进行优化。结果 PCR验证pyr G基因成功的插入SPM4中,所得到转化子可稳定传代,通过条件优化,得到转化子约300个/106个细胞。选用AGL-1,以农杆菌共培养浓度为OD600=0.8,AS浓度为200μmol/L,无膜IM固体共培养基为介质,25℃共培养48 h为最适转化条件。结论成功建立了农杆菌介导PM基因转化技术,简化并优化了转化条件,该方法可用于PM基因功能研究。