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目的:利用Ad easy腺病毒表达系统构建含人肌浆网钙离子ATP酶2a(SERCA2a)基因重组腺病毒,并在HEK293细胞中扩增制备重组腺病毒.方法:将人SERCA2a基因全长c DNA(3700bp)插入到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,成功构建pAd-TrackCMV SERCA2a重组质粒,经Pme I酶切线性化,采用电击法转入到已含Ad easy质粒的电感受态菌BJ5183进行重组.挑选同源重组质粒,Pac I酶切线性化转染HEK293细胞包装成重组腺病毒颗粒,荧光检测有绿色荧光蛋白表达.将重组病毒和SD大鼠心肌细胞共培养,western-blot检测SERCA2a可以在大鼠心肌细胞过表达且影响了胞内SERCA2a的活性.结果:成功包装含人SERCA2a基因的重组腺病毒,并可以有效感染SD大鼠心肌细胞.结论:利用新型腺病毒载体在短时间内成功构建了携带有人SERCA2a基因的腺病毒,为以后进一步研究人SERCA2a基因治疗提供了新途径. 相似文献
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X线是人类了解和应用最多的一种放射
线,每当人们研究一种新的辐射类型的生物效
应时,都要与之相比较。同样,在各种辐射类型
诱发人染色体畸变的研究中,已经有大量的实
验资料将丫线、中子、电子及其他粒子流与X线
作了比较。但是,在进行这种比较之前,首先要
对X线本身有更多的知识,即应了解光子能量
不同的X线诱发染色体畸变的效能如何,这正
是本工作的目的所在。为此,我们选用目前临
床诊断和治疗中经常使用的60kV, 180kV和
10MV X线,对其诱发人血染色体畸变的剂量效
应关系做了比较研究。 相似文献
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桉树叶片光合色素含量高光谱估算模型 总被引:13,自引:1,他引:12
色素在植物的生理生态过程中非常重要,利用高光谱数据,揭示光谱反射率上特征波段与光合色素含量间的关系将有助于理解光合色素光谱反射特征的规律,同时为利用高光谱遥感技术快速无损监测植物叶片光合色素提供了技术支持.利用野外采集的桉树叶片样本,在实验室内测定了叶片的高光谱反射率及对应的叶绿素、类胡萝卜素含量.利用光谱分析技术和统计学方法对光谱数据进行处理分析,提取了光谱特征参量,并建立叶绿素、类胡萝卜素含量与光谱特征参量间的估算模型.通过精度检验,研究结果表明以(SDr-SDb)/(SDr+SDb)为变量建立的指数模型估算效果最佳. 相似文献
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摘要 目的:研究西比灵联合神经生长因子(NGF)对脑出血患者的NIHSS、ADL评分及血肿体积影响。方法:研究对象选取我院2015年9月到2016年10月间收治的脑出血98例,采用随机数字法分为2组,每组各49例。对照组接受常规基础性治疗,在此基础上,研究组患者口服西比灵联合肌肉注射NGF治疗。比较两组患者的治疗总有效率,同时比较血肿、水肿带体积、神经功能缺损量表(NIHSS)、日常生活能力量表(ADL)评分、神经源性营养因子(BDNF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平变化情况及不良反应发生情况。结果:治疗后,两组总有效率比较差异显著(P<0.05);治疗前,研究组和对照组血肿体积、水肿带体积比较无显著差异;治疗后,研究组和对照组血肿体积、水肿带体积随着时间的推移而降低,且研究组均低于对照组,差异显著(P<0.05);治疗前,研究组和对照组NIHSS、ADL评分比较无显著差异;治疗后,研究组和对照组NIHSS随着时间的推移而降低,且研究组均低于对照组,ADL评分随着时间的推移而升高,且研究组高于对照组,差异显著(P<0.05);治疗前,研究组和对照组BDNF、MCP-1、NSE比较无显著差异;治疗后,研究组和对照组MCP-1、NSE随着时间的推移而降低,且研究组均低于对照组,BDNF随着时间的推移而升高,且研究组高于对照组,差异显著(P<0.05);两组不良反应比较无效显著差异(P>0.05)。结论:脑出血患者应用西比灵联合NGF效果可靠,可明显减少继发性损伤,且治疗安全性较高,值得在临床推广。 相似文献
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目的:利用Ad easy腺病毒表达系统构建含人β2-肾上腺素能受体(β2-AR)基因重组腺病毒,并在HEK293细胞中扩增制备重组腺病毒.方法:将β2-AR全长cDNA插入到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,构建pAdTrackCMV-β2AR重组质粒,经PmeI酶切线性化后经电击法转入含Ad easy质粒的电感受态菌BJ5183进行重组.挑选同源重组质粒,Pac I酶切线性化转染HEK293细胞包装成重组腺病毒颗粒.将重组病毒和SD大鼠心肌细胞共培养,western-blot检测β2-AR的表达.结果:琼脂糖凝胶电泳显示在1242bp处有特异性条带后被克隆至腺病毒穿梭质粒.重组穿梭载体经Hind Ⅲ和Xba Ⅰ限制性酶切可以得到目的条带并经测序证实.电击法转化BJ5183所得候选重组子经PacⅠ酶切后得到30Kb腺病毒基因组片段和4.5Kb氨苄抗性片段,证实获得同源重组质粒.转染293细胞可以看到绿色荧光蛋白,以MOI100转染SD大鼠心肌细胞发现携带β2-AR的腺病毒可以在心肌细胞中过表达.结论:利用新型腺病毒载体在短时间内成功构建了携带有人β2-AR基因的腺病毒,为进一步研究人β2-AR基因治疗奠定了基础. 相似文献
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目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对离体大鼠心肌细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法:离体大鼠心肌细胞与LDL、ox-LDL共孵育,分别于0h、6h、12h、24h、48h收集细胞培养上清液,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中TGF-β1和bFGF的浓度。结果:与正常组和LDL组相比,ox-LDL组细胞培养上清液中TGF-β1和bFGF表达增加(P<0.01)。结论:ox-LDL能够刺激离体大鼠心肌细胞分泌TGF-β1和bFGF,其在心肌纤维化的进展中可能到起较重要作用。 相似文献
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目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(ox—LDL)对离体大鼠心肌细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法:离体大鼠心肌细胞与LDL、ox-LDL共孵育,分别于0h、6h、12h、24h、48h收集细胞培养上清液,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中TGF-β1和bFGF的浓度。结果:与正常组和LDL组相比,ox-LDL组细胞培养上清液中TGF-β1和bFGF表达增加(P〈0.01)结论:OX—LDL能够刺激离体大鼠心肌细胞分泌TGF-β1和bFGF,其在心肌纤维化的进展中可能到起较重要作用。 相似文献
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目的:重组腺病毒Ad5-ADRbeta2-EGFP转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)并植入心衰大鼠心肌,观察其心功能的变化.方法:采用部分缩窄腹主动脉法制备大鼠压力超负荷性慢性心力衰竭模型.分离和培养成年大鼠BMSCs,待细胞传代到第6代,用重组腺病毒Ad5-ADRbeta2-EGFP转染BMSCs48h后将BMSCs移植入心衰大鼠心肌内.实验共分3组:心衰组、移植BMSCs组及移植转染Ad5-ADRbeta2-EGFP的BMSCs组.移植BMSCs(1×104)4周后,检测大鼠血流动力学各指标的变化.结果:荧光显微镜下可见转染BMSCs绿色荧光蛋白表达达到80%以上.移植BMSCs组和移植转染Ad5-ADRbeta2-EGFP的BMSCs组的左心室舒张末压力(LVEDP)低于心衰组,左心室内压变化最大速率(±dp/dt max)和心率均高于心衰组,差异均有统计学意义(P<0.05).移植转染Ad5-ADRbeta2-EGFP的BMSCs组的左心室内压上升最大速率(+dp/dt)高于移植BMSCs组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:重组腺病毒Ad5-ADRbeta2-EGFP转染BMSCs并移植入心衰大鼠后,能够改善心衰大鼠的心功能. 相似文献
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