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目的评价博尔纳病病毒(BDV)抗原免疫的杂交瘤细胞系的产生抗体能力与抗体特异性。方法随机抽取2株由BDV抗原免疫的杂交瘤细胞系H1和H2,通过体内和体外方法制备单克隆抗体,通过间接免疫荧光、免疫印迹和间接酶联免疫吸附3种试验方法对制备的抗体进行特异性鉴定及效价测定。结果杂交瘤细胞系H1和H2可以产生一定效价的单克隆抗体,并对BDV的P24和P40抗原具有特异性。结论由杂交瘤细胞系H1和H2产生的单克隆抗体可以用于检测BDV特异性抗原。 相似文献
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目的:原核表达人类肥胖基因瘦素蛋白,方法:以携人类肥胖基因的pUC119-ob为模拟,PCR扩增瘦素蛋白基因片段,并克隆到pET-32a构建重组表达质粒pET-32a-ob,经酶切和测序鉴定后,转化至大肠埃希菌DH5α中表达,SDS-PAGE电泳鉴定表达产物。结果:测序和限制性分析均证明了pET-32a-ob的序列正确,转化的DH5α可高效表达一个30kD融合蛋白,与预期结果一致。结论:经pET-32a-ob转化的DH5α可有效表达重组人类瘦素蛋白,为进一步研究瘦素蛋白的生物活性提供了基础。 相似文献
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以宫颈癌组织DNA为模板,利用PCR法扩增HPV16LIDNA片段,获得了3个HPV16LI基因片段。将LIDNA片段与克隆载体PCRZ.1连接,构建了HPV16LI-IXIItL.1重级质粒,并用Thudm和BstE11酶切,回收4.gkbDN片段进行亚克隆。经转化、质拉提纯、精制后,对重级质粒及亚克隆重级质材用PCR荧光素测序法分别对3个HPV16LIDNA片段进行全序列测定,并以theki细胞内HPV16LIDNA为对照。结果经微机处理将所得序列与1985年&e0L,rr.K报道的HPV16LI原始序列进行比较。测定序列相当于HPV16原始序列的5401-7317。IJI阅读框(ORF… 相似文献
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目的分析博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)H1766株对BALB/c小鼠的感染性。方法选择病毒滴度为2.0×107FFU/ml的BDV病毒液分别对新生和成年BALB/c小鼠进行脑内接种,并用相同病毒液对原代培养的新生BALB/c小鼠脑细胞进行接种。经过一定时间的病毒作用后分别提取总RNA,采用巢式RT-PCR方法检测BDV-p40基因,并通过免疫组化方法检测脑内接种脑组织中BDV-P40蛋白。结果脑内接种病毒的小鼠脑组织中可以检测到BDV-p40基因和BDV-P40蛋白,培养的小鼠脑细胞中可以检测到BDV-p40基因。结论BDVH1766株可以感染新生和成年的BALB/c小鼠。 相似文献
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病毒分离和PCR-RFLP法对急性结膜炎标本中腺病毒感染及其型别的分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的分析2003年下半年收集的哈尔滨医科大学第一临床医学院急性结膜炎标本中的腺病毒(Adenovirus,AdV)感染情况及其型别。方法采集59例临床确诊为急性结膜炎患者的结膜拭子标本,在观察和分析接种细胞的病变(CPE)情况的基础上,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR—RFLP)法,特异性检测CPE阳性细胞中腺病毒核酸的存在情况,并对PCR阳性扩增产物进行病毒型别的分析。结果70.7%(41/59)的急性结膜炎标本接种于培养细胞后可以引起明显的CPE;其中,53.6%(22/41)的CPE阳性标本可以扩增出腺病毒核酸,RFLP分析证实68.18%(15/22)的腺病毒感染为Ad3型,31.82%(7/22)的腺病毒感染为Ad7。结论2003年下半年哈尔滨市急性结膜炎主要以腺病毒3、7型感染为主。提示结合病毒分离培养和PCR—RFLP方法,可以广泛应用于急性结膜炎相关的病毒感染及其型别的进一步分析与研究。 相似文献
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小鼠艾滋病模型的建立及用鹿肠道病毒治疗的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用小鼠白血病病毒LP-BM5MuLV接种新生BALB/C小鼠,感染后4~6个月可出现与人类AIDS极为相似的病理变化和免疫缺陷的症状,包括血免疫球蛋白增高、淋巴结肿大、T辅助淋巴细胞减少和淋巴细胞转化功能降低等。通常作为小鼠获得性免疫缺陷综合症即小鼠艾滋病(MAIDS)的模型使用。本实验采用已证实具有溶瘤作用的鹿肠道病毒ECCO-18株对小鼠艾滋病进行实验性治疗,结果表明鹿肠道病毒ECCO-18可明显缓解艾滋病小鼠的淋巴结肿大和延长艾滋病小鼠的生存时间。提示鹿肠道病毒ECCO-18治疗小鼠艾滋病有效。 相似文献
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用巢式RT-PCR检测精神分裂症患者血液标本中博尔纳病病毒p24基因 总被引:4,自引:2,他引:2
目的:检测精神分裂症患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)标本中博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)p24基因,探讨BDV感染与精神分裂症的关系。方法:用巢式RT—PCR方法检测黑龙江省精神分裂症患者及正常人PBMCs中BDV—p24基因片段,同时扩增β—肌动蛋白(β-actin)作为内参照。结果:66例精神分裂症患者中,BDV—p24基因的阳性检出率为28.8%(19/66);47例正常人中,BDV—p24基因的阳性检出率为6.3%(3/47),经比较两者间阳性率差异有显著性(P<0.05)结论:证实中国存在BDV感染,黑龙江省精神分裂症的发生可能与BDV感染有关。 相似文献
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细菌小RNA是一类长度在50~500个核苷酸之间的不具有编码蛋白质功能,但具有转录后调控作用的RNA,在细菌中参与调控细菌多种生理和病理活动,如调节细菌代谢和毒力作用等过程。近年来,在结核分枝杆菌已经鉴定出近200种小RNA,并证明这些小RNA参与结核分枝杆菌的生理和病理过程。本文对结核分枝杆菌小RNA在细菌生长繁殖、毒力因子调控、细菌耐药和巨噬细胞内应激环境的适应等方面的作用进行综述。 相似文献