TAT蛋白介导外源物质进入细胞的作用机制探讨

来源于人类免疫缺陷病毒HIV-1的反式激活因子(trans-activator,TAT)蛋白能够有效的介导多肽、蛋白质、基因以及一些其它的物质进入细胞。它以低亲和力与细胞上的受体相结合,通过破坏细胞质膜,以非内吞途径转导外源物质进入细胞内部。     

哺乳动物中基因持续表达的策略

人类遗传病的治疗越来越依赖于基因水平上的治疗,但外源基因不能在哺乳动物中持续表达的缺陷严重阻碍了这一手段的快速发展。含有转座子载体的染色体基因组整合,裸露质粒DNA转化到肝脏的压力输送,或是在质粒载体中插入真核基因的顺式作用元件如内含子、3’端非翻译区、EBV序列等,都可以在一定程度上赋于外源基因以长期持续的表达,这些策略对于基因治疗的发展具有重要的意义。 Abstract: Gene therapy holds great promises to a variety of inherited diseases. However, the limitations on extended and consistent foreign gene expression has severely hampered the development of applicable gene therapy approaches. Technologies are reviewed here including transponson integration, biolistic measures that pulse the naked plasmid into living organs, or the integration of eukaryotic cis elements into introns, 3′ untranslated regions, or the integration of the EBV sequences, which could assist in the prolonged gene expression of the introduced foreign genes. These strategies may significantly promote the progresses of gene therapy.     

伊犁河谷不同生境苦豆子根系生态化学计量特征及其与土壤理化因子的关系

苦豆子(Sophora alopecuroides)为中旱生且耐盐碱,多生长于荒漠、半荒漠地带中的植物,属于新疆伊犁河谷山地草原典型毒害草之一,其强大的根系是吸收土壤养分的重要器官.本研究以伊犁河谷4种不同生境(林下、荒地、路边、农田)的苦豆子根系及其根际土壤为对象,分析苦豆子根系的化学计量学特征,结合冗余分析探讨苦豆...     

急性出血坏死性胰腺炎早期细菌易位规律及生长抑素的头孢噻甲羧肟对其影响

目的：探讨急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）早期细菌易位规律及生长抑素（ｓｔｉｌａｍｉｎ）与头孢噻甲羧肟（Ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ）对其的影响。方法：应用去氧胆酸钠逆行胰管注射致大鼠ＡＨＮＰ模型。一、将ＳＤ大鼠随机分为模型组和对照组,１２及２４小时后采样。二、将ＳＤ大鼠模型随机分为：生理盐水治疗组,Ｓｔｉｌａｍｉｎ治疗组,Ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ治疗组,对照组同上。各组经腹腔用药,２４小时后采样,观察各组胰肝细菌学指标、小肠粘膜改变、肠组织ＭＤＡ含量及胰腺光镜病理学评分。结果：一、模型组胰肝细菌检出率及菌落计数明显高于假手术组（Ｐ＜００５）,检出菌以大肠杆菌和肠球菌为主,肠粘膜病变主要在回肠。二、肝胰菌落计数（ＣＦＵ／ｇ）：生长抑素组和抗生素组明显低于盐水组,（Ｐ＜００５）。抗生素组检出的细菌以肠球菌为主。生长抑素组肠粘膜病变较其它组明显减轻,且肠组织ＭＤＡ含量明显减少（Ｐ＜００１）,除出血外（Ｐ＜００５）胰腺病理评分较其它组未见显著差异。结论：ＡＨＮＰ早期应用抗生素和生长抑素能减轻细菌的肠道透壁易位,但不能阻止耐药菌易位。生长抑素腹腔用药能保护肠粘膜屏障。其机理与减轻氧自由基对肠道损伤有关     

沙库巴曲缬沙坦钠对老年慢性心力衰竭合并2型糖尿病患者肾功能、神经内分泌激素和TGF-β1/Smad3信号通路的影响

摘要 目的：探讨沙库巴曲缬沙坦钠对老年慢性心力衰竭（CHF）合并2型糖尿病（T2DM）患者肾功能、神经内分泌激素和转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad3信号通路的影响。方法：选择我院2020年5月~2021年5月期间收治的92例老年CHF合并T2DM患者,按照双色球法将患者分为对照组（n=46,接受常规治疗）和研究组（n=46,对照组基础上接受沙库巴曲缬沙坦钠治疗）。对比两组心功能、肾功能、神经内分泌激素、TGF-β1/Smad3信号通路相关指标和不良反应发生情况。结果：治疗12个月后,研究组心输出量（CO）、左心室射血分数（LVEF）高于对照组,左心室舒张末期内径（LVEDD）低于对照组（P<0.05）。治疗12个月后,研究组血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、血尿酸（UA）、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、胱抑素C（Cys-C）低于对照组（P<0.05）。治疗12个月后,研究组去甲肾上腺素（NE）、醛固酮（ALD）和血管紧张素II（AngII）低于对照组（P<0.05）。治疗12个月后,研究组Smad7 mRNA高于对照组,Smad2 mRNA、TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：沙库巴曲缬沙坦钠用于治疗老年CHF合并T2DM患者,可有效改善患者的心功能、肾功能、神经内分泌激素和TGF-β1/Smad3信号通路相关指标,安全性较好。     

TAT蛋白在介导外源物质进入细胞方面的应用

TAT蛋白能够介导多肽、蛋白质、基因等外源物质进入细胞 ,对机体没有毒性 ,对周围环境的影响也不敏感 ,因而可以直接应用于组织细胞。它能够引导外源基因定位于细胞核 ,具有其它介导方法所没有的优点。这些优点将使TAT蛋白在研究蛋白质功能、基因治疗等方面发挥极为重要的作用。TAT蛋白与细胞表面进行低亲和力的结合 ,以Caveolae途径进入细胞 ,将其与高亲和力配体结合可以有更大的功用     

GFP为报告基因的酵母哺乳动物细胞穿梭载体的构建及其在人血管内皮细胞中的表达

为研究酵母作为载体在口服基因治疗及免疫中的作用 ,需要一种能够在酵母中复制而在哺乳动物细胞中表达的穿梭载体 .利用通用载体质粒融合系统 (UPS)构建了一种以GFP为报告基因的新载体 ,以常规的氯化锂法对酿酒酵母进行转化 ,证明该载体能够在酵母中复制 ;以脂质体介导向人血管内皮细胞进行了转染 ,有绿色荧光 ,证明该载体能够在哺乳动物细胞中表达 .所获得的新型的穿梭载体为口服酵母在基因治疗中的应用提供了物质准备     

海拔对吐尔根河流域野杏空间分布的影响

使用卫星遥感影像和数字高程模型,通过实地调查与遥感分析吐尔根河流域新疆野杏纯林的空间分布特征,结果表明：（1）野杏呈断续带状或点片状分布于流域西南部的丘陵和沟谷坡面上,面积17.45 km2,覆盖率6.54%。（2）野杏集中分布于海拔900～1 900 m,面积、覆盖率都随海拔上升先递增后递减,在海拔1 300～1 400 m出现最大值。（3）随海拔升高,同一海拔内各坡向、各坡度间野杏覆盖率的差异均先减小后增大。综上,吐尔根河流域野杏具有明显的垂直地带性,中山带下部中段的不同微地形上野杏分布差异最小、生境适宜性最好,应因地制宜地科学保护与开发野杏资源,发挥其自然生态、社会经济效益。     

伊犁河谷不同类型湿地土壤活性有机碳组分及其含量差异

土壤活性有机碳对环境变化反应敏感,为探讨伊犁河谷不同类型湿地土壤活性有机碳组分含量及其影响因素,本研究以伊犁河谷常年水淹的芦苇湿地、极少水淹的雀稗湿地以及季节性水淹的拂子茅湿地为对象,测定0～40 cm土层内土壤易氧化有机碳(EOC)、可溶性有机碳(DOC)、微生物生物量碳(MBC)的含量,分析不同类型湿地EOC、DOC和MBC之间的相关性及其与土壤酶活性(蔗糖酶、脲酶、过氧化氢酶)、土壤养分(铵态氮、全磷)和土壤有机碳(SOC)之间的关系。结果表明:3种不同类型湿地土壤活性有机碳组分在0～40 cm土层内的垂直分异规律一致,均随土壤剖面的加深而递减,而土壤MBC、EOC和DOC含量差异性显著(P0.05),其中芦苇湿地的土壤MBC、EOC和DOC含量均最低;3种类型湿地中,MBC、EOC和DOC所占SOC的比例分别在4. 33%～18. 02%、28. 85%～66.06%、0.73%～1.36%;除DOC所占SOC比例在0～40 cm土层内呈现先增大后减小规律外,MBC和EOC占SOC比例未呈现一致的变化规律; 3种土壤活性有机碳组分所占土壤有机碳的比例以EOC所占比例最大,DOC所占比例最小; MBC、EOC占SOC的比例均以雀稗湿地最高,DOC所占比例以拂子茅湿地最高,而芦苇湿地MBC、EOC和DOC比例均较低;3种类型湿地MBC、EOC和DOC彼此之间相关性均达到显著水平,DOC与土壤全磷相关性不显著,而3种土壤活性有机碳组分与土壤养分、土壤酶活性相关性均达到显著水平。本研究表明,土壤酶活性和土壤养分是影响土壤活性有机碳含量的重要因子。     

hGH消化道途径转基因的研究

消化道途径转基因过程方便、快捷、易适应,可为基因治疗提供全新的模式。为了研究人 生长激素(bGH)基因的经消化道途径转基因过程,实验首先应用ECHO克隆系统。在供载体 pUni-hGH和宿主载体pcDNA4／TO-E的基础上,构建出hGH的哺乳动物表达载体pcDNA4-hGH;然 后结合酿酒酵母表达载体pESC-URA,构建出hGH的酵母-哺乳动物穿梭栽体pESC-CMV-hGH,测 序鉴定后转化酿酒酵母。用阳性重组酵母对小鼠进行灌胃免疫实验,间接ELISA方法在实验组 小鼠的血清中检测到抗hGH抗体的存在。结果证实hGH基因可通过消化道途径转进小鼠体细 胞并进行表达,初步证明了hGH的消化道基因治疗的可行性。