白色念珠菌蛋白酶与其毒力关系的研究

目的 探讨白色念珠菌蛋白酶活动与其毒力关系。方法的采用牛奶平地检测５４株白色念珠菌蛋白酶的分泌能力,然后选择６侏菌分别经摇瓶培养测定其蛋白酶活力,并以静脉内注射方式感染小鼠进行毒力试验,以小鼠平均生存时间来评价菌株毒力。结果 ５４株白色念珠菌全部能分泌蛋白酶,检出率为１００％。动物试验表明蛋白酶活力愈高的菌株,相应小鼠平均生存时间愈短;蛋白酶活力与菌株毒力直接正相关（γ＝０．９３４,Ｐ＜０．０１）     

结核分枝杆菌ESX-1分泌蛋白ESAT-6增强巨噬细胞吞噬功能

【目的】研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)分泌蛋白ESAT-6(early secreted antigenictarget of 6 kDa)对巨噬细胞吞噬功能的影响。【方法】用重组质粒pFLAG-ESAT-6和pFLAG-EGFP转染RAW264.7细胞,经G418筛选,PCR、RT-PCR和Western blot鉴定,获得稳定表达flag-ESAT-6和flag-EGFP的RAW细胞系,然后用流式细胞术观察各稳转细胞系吞噬荧光微球的能力,并用共聚焦显微镜和菌落计数法检测稳转细胞系吞噬大肠杆菌(Escherichia coli)的能力。【结果】获得了稳定表达flag-ESAT-6的RAW-E6细胞系和表达flag-EGFP的RAW-EGFP细胞系;流式细胞术检测结果表明RAW-E6吞噬荧光微球的能力显著强于野生型细胞系RAW264.7和对照细胞系RAW-EGFP;菌落计数和激光共聚焦分析表明RAW-E6细胞系吞噬E.coli的能力也显著强于RAW264.7和RAW-EGFP。【结论】通过胞内表达发现结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6能够增强巨噬细胞的吞噬功能,这将为深入理解结核分枝杆菌的致病机制提供新的思路。     

小鼠腹腔感染中白色念珠菌芽管及蛋白酶活性与其毒力的相关性研究

目的 :探讨白色念珠菌与腹膜炎发生相关的毒力因子。方法 :4 0株临床分离菌分别以腹腔接种方式感染小鼠进行毒力试验 ,以血清中丙氨酸氨基转移酶 (AL T)和α-淀粉酶 (AM)活力为表示菌株毒力的指标。结果 :白念菌体外测得的芽管长度分别与受染动物血清中 AL T、AM含量呈正相关 (r ALT=0 .893,r AM=0 .80 1,P<0 .0 1) ,菌株分泌型天冬氨酸蛋白酶 (SAP)活力与血中 AL T、AM水平也存在显著的正相关关系 (P<0 .0 1) ,且经 SAP特异抑制剂处理过的受染小鼠其 AL T活性显著降低 (P<0 .0 1)。结论 :白念菌芽管和蛋白酶均为其与腹膜炎发生有关的重要的毒力因素