黑曲霉(AS0006)产纤维素酶的纯化研究

利用实验室中黑曲霉菌株AS0006进行粗酶发酵,对产出的纤维素酶液进行不同饱和度(NH4)2SO4的分级沉淀,经过Sephadex G-25、Sephadex G-100分离纯化后,得到两种内切酶(EG)组分、一种外切酶(CBH)组分。通过酶活性及电泳检测发现,两种EG酶组分的相对分子质量分别为29.63 kD、37.49 kD,CBH酶组分相对分子质量为56.51 kD。相较原始粗酶液,EG回收率可达18.07%、纯化倍数为3.46,CBH回收率可达12.96%、纯化倍数为4.14,β-葡萄糖苷酶(CB)回收率可达22.37%、纯化倍数为3.58。     

三种节杆菌产生谷氨酰胺合成酶的研究

谷氨酰胺合成酶是应用广泛的生物酶类,以LNU 0165,LNU 0066和LNU 0254为实验出发菌株,对不同pH、温度条件下产谷氨酰胺合成酶的最佳发酵条件进行了研究,通过测定谷氨酰胺合成酶,并进行比较选择高产菌株,LNU 0165产酶活最高,经16S rRNA的序列和生理生化的鉴定,确定LNU 0165为球形节杆菌(Arthrobacter globiformis),其GS酶的最适温度为60℃,最适pH为7.5左右。