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青蒿转杜松烯合成酶基因发根系的培养 总被引:8,自引:2,他引:8
将已克隆的棉花杜松烯合成酶的cDNA(cadC14)插入到植物表达载体pBI121中,构建含CaMV35S启动子驱动下的杜松烯合成酶基因的植物表达载体pBIC14。用含pBIC14质粒的发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)15834感染青蒿(ArtemisiaannuaL.)叶片并诱导发根,共建立121个生长迅速的发根系。经浓度为20mg/L的Kan筛选,获得12个抗Kan阳性根系。PCR和Southernbloting分析表明,外源杜松烯合成酶基因已整合到青蒿基因组中,其转基因频率为3%。RTPCR分析表明,外源杜松烯合成酶基因在C37根系中,在转录水平上已有表达。 相似文献
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盐胁迫下三色苋甜菜碱及有关酶含量的变化 总被引:2,自引:0,他引:2
三色苋(Amaranthus tricolor)不同器官中的甜菜碱(GB)含量显著不同.除子叶外,根、茎和叶的GB含量和茎、叶中的胆碱单加氧酶(CMO)含量都因300 mmol/L的NaCl处理而增加.甜菜碱醛脱氢酶(BADH)的表达无论盐处理与否在所有器官中都能检测到,其含量变化不大.当种子发芽时,具备合成GB的能力,CMO含量增加;在此之前未能检测到CMO,也不能合成GB.研究结果表明三色苋响应盐胁迫而合成GB的关键酶是CMO. 相似文献
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中麻黄悬浮培养体系的建立 总被引:5,自引:1,他引:4
本文用中麻黄无菌苗为外植体,其切段培养在附加2mg/L2,4-D和0.5mg/L 6 BA的MS培养基上,全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于MS+0.5mg/L2,4-D+0.2mg/L6BA+0.2mg/L NAA+4%蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养,培养基为附加0.2mg/L2,4-D+0.1mg/L6BA+0.1mg/LNAA+2%蔗糖的MS液体培养基,得到分散性好,细胞形状接近圆形,细胞大小均一,细胞团多由2-30个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为0.35g·fw/20ml·d,细胞有丝分裂指数为11.2%。条件培养和高密度接种可缩短延迟期,条件培养不能提高分裂指数,1g/10ml接种密度可使分裂指数提高至21.2%。 相似文献
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棉花法呢基焦磷酸合酶cDNA克隆、序列分析及其在种子发育过程中的表达特征 总被引:3,自引:0,他引:3
根据法呢基焦磷酸合酶(FPS)保守域设计简并引物,应用NestPCR和PCR96孔板筛库技术分离到亚洲棉(GosypiumarboreumL.)法呢基焦磷酸合成酶的cDNA。序列分析表明,该cDNA全长1280bp,开放阅读框共编码342个氨基酸残基,推断蛋白质分子量约为39kD,推测的氨基酸顺序与拟南芥和青蒿的FPP合酶序列同源性为789%和807%。应用RTPCR定量分析fps1基因在“苏棉6号”(G.hirsutumL.cv.“Sumian6”)种子发育过程中的表达特征,发现从胚珠开始形成种子(开花后20d)至种子成熟(开花后40d),fps1mRNA转录水平发生明显变化。在种子发育早期,开花后20d至27dfps1基因保持相对稳定的表达水平;但从开花后27d到种子成熟,fps1mRNA的转录水平迅速增高,此期倍半萜棉毒素在种子中的积累亦呈明显的增长趋势,完全风干成熟的种子中倍半萜棉毒素的含量可达13mg/g。推测fps1基因在转录水平参与种子中倍半萜类物质合成的调控。 相似文献
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