水稻原生质体产生细胞团的冰冻保存和冻后再生植株形成

水稻(Oryza sativa L.)原生质体产生的细胞团加上10-20％的二甲亚枫(DMSO)和10-20％的蔗糖,置于液氮中保存。冻后细胞生存率达到对照的40-50％。存活的细胞在附加2×10~(-5)mol/l 2,4-D 的Linsmier-Skoog(Ls)固体培养基上再生长,然后将形成的愈伤组织块转到附加10~(-6)mol/l NAA,4×10~(-6)mol/l 激动素和10~(-6)mol/l 2 IP 及8％的蔗糖的 LS培养基上分化出芽并形成植株。     

水稻原生质体产生细胞团的冰冻保存和冻后再生植株形成

水稻（Oryza sativa L.)原生质体产生的细胞团加上10－20％的二甲亚枫（DMSO）和10－20％的蔗糖,置于液氮中保存,冻后细胞生存率达到对照的40－50％,存活的细胞在附加2×10^-5mol/l 2,4-D的Linsmier-Skoog(LS)固体培养基上再生长,然后将形成的愈伤组织块转到附加10^-6mol/l NAA,4×10^-6mol/l激动素和10^-6mol/l 2 IP及8％的蔗糖的LS培养基上分化出芽并形成植株。     

采用低pH值和适量的玉米素、ABA配合恢复褐化的水稻愈伤组织

在建立水稻体细胞悬浮培养体系的实验中,我们观察到当将胚性愈伤组织从固体培养基转入液体分化培养基进行悬浮培养并去掉2.4-D 时,随着培养时间的延长,愈伤组织往往出现褐化现象。与这种情况类似的是,当将悬浮培养的愈伤组织和成熟胚状体转入固体培养基时,也出现严重的褐化现象。这种褐化现象一般认为是不可逆的,伴随着胚性愈伤组织和成熟胚状体的褐化,胚性愈伤组织逐渐丧失分化能力,成熟胚状体则逐渐死亡。     

吲哚乙酸、吲哚乙酸氧化酶和几种愈伤组织生长的关系

将大豆(Glycine max(L.)Merr.)哈密瓜(Cucumus melo L.var saccharinus)烟草(Nicotianatabacum L.)和毛白杨(Populus tometasa Carr.)的愈伤组织分别接种在附加IAA4毫克/升和激动素0.5毫克/升的Miller液体培养基上。烟草和哈密瓜的愈伤组织迅速地生长,能持续到50天左右;而大豆和毛白杨的愈伤组织生长缓慢,且20天就停止生长。 测定培养中IAA的消耗情况表明,接种大豆和哈密瓜的愈伤组织的培养液IAA消耗最快,到第四天就消耗完了;接种毛白杨愈伤组织的培养液IAA消耗次之,到第六天也消耗完了;接种烟草愈伤组织的培养液IAA消耗最慢,到第20天仍有加入量的2.8％。 培养液中IAA的消耗与吲哚乙酸氧化酶的活性有密切的关系。吲哚乙酸氧化酶的活性越高,IAA消耗越快,大豆、烟草和毛白杨愈伤组织的生长也随IAA的降低而减慢,但是哈密瓜愈伤组织的生长在IAA消耗完以后,仍能持续生长多日。因此可以认为有些愈伤组织的生长为其所包含的吲哚乙酸氧化酶的活性所制约;有的并不如此。     

植物激素对哈密瓜(Cucumis melo L.)子叶形成愈伤组织和植株再生的作用

用附加2ppm NAA 和0.5ppm 激动素或单附加高浓度(5—10ppm)激动素的 Miller 培养基,能诱导出两种形态不同的愈伤组织,前者松软如海绵,后者质硬成瘤状。只有瘤状愈伤组织在含高浓度激动素的Miller培养基中才能分化出芽,进而形成完整的植株。但改用 White 培养基,或以下胚轴为材料,都未获得再生植株。因此,认为植物产生愈伤组织和再分化为植株不仅与外源激素有关,而且因植物材料和营养条件而异。     

哈蜜瓜子叶脱分化和再分化过程中几种脱氢酶同工酶的研究

哈蜜瓜子叶切段接种在附加萘乙酸(NAA)2mg/l 和激动素0.5mg/l 或不加 NAA,只附加激动素10—15mg/l 的 Miller 培养基上,可以分别诱导出两种形态不同的愈伤组织。在30天的培养过程中前者疏松呈黄白色,最终不能分化出芽;而后者质硬如瘤状呈深绿色,15天左右有瘤状小突起,25—30天即可分化出无根的叶片状小植株。用盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法,在培养不同时期(5、10、15、20、25天)分别测定6-磷酸葡萄糖脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶的同工酶。结果表明:在不同培养期,两种不同类型的愈伤组织均有四种脱氢酶存在。说明磷酸戊糖途径、三羧酸循环以及谷氨酸的代谢同时运行。但长芽愈伤组织中的6-磷酸葡萄糖脱氢酶和苹果酸脱氢酶的同工酶谱与不长芽的愈伤组织的有些不同。     

冬芹胚性愈伤组织分化能力衰减的初步研究

植物的愈伤组织在继代培养过程中会发生变异,并逐步丧失分化能力。这是组织培养过程中遇到的一个难题。近年来一些研究者试图采用一些方法阻止或延缓组织分化能力的衰减。但是效果和范围仍然是十分有限的。研究愈伤组织分化能力衰减的基本规律和内在变化,将有助于这一问题的解决,从而可以扩大组织培养在实际中的应用。本文就芹菜胚     

冬芹胚性愈伤组织的分步冻结与冻后再生

芹菜与胡萝卜一样,由于胚状体容易诱导,而且频率很高,已被人用作研制人工种子的模式植物。如果能用液氮将胚性细胞或胚状体冻结保存起来,这不仅可以为人工种子的研制积累大量的材料,也可为研究胚状体分化的机理提供方便。本文介绍冬芹胚性愈伤组织的分步冻结和冻后再生的方法。首先将冬芹叶柄切段培养在有2.4-D 的 MS 或 B_5培养基上.几天后开始出现愈伤组织,一个月左右将愈伤组织切下进行继代培养,半个月后在无菌条件下放在5℃条件下预