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SRY盒基因在斑马鱼和胡子鲇中的保守性分析 总被引:7,自引:2,他引:7
本文采用人类SRY基因探针,与EcoRI消化的中国的胡子鲇(Clarias fusc us)和美国的斑马鱼(Brachydanio rerio)基因组DNA进行了Southern印迹杂交分析。首次在这两种鱼中发现了SRY盒基因及其存在特征;在斑马鱼中发现了明显的限制性片段长度多态性; 并深入分析了SRY盒基因的进化保守性。
Abstract:Using,Southern bloting analysis,EcoRI-digested genomic DNA from Clarias fuscus and Brachydanio rerio were hybridizae to human SRY probe.Hybridization occurred in both male and female of the two species.RFLP associated with SRY-box genes was observed in Brachydanio rerio.The conservation of SRY-box genes was analysed. 相似文献
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具有内含子的大鳞副泥鳅Sox8基因(英文) 总被引:3,自引:0,他引:3
鱼类在脊椎动物系统进化过程中起着承先启后的作用,其性别决定具有原始性、多样性和可塑性。深入研究鱼类的性别决定和分化具有重大的理论意义。Sox基因家族是九十年代发现的一个新的基因家族,其中的许多成员都与性别决定和分化具有直接的关系。大鳞副泥鳅是一种常见的小型鱼类,属于鲤形目鳅科,是少数具有异形性染色体中的一种。本文根据已发表的Sox蛋白质的序列资料,选择在不同物种中保守程度最高的区段设计兼并引物。该组引物可以特异扩增 Sox基因的 HMG盒区。以大鳞副泥鳅基因组 DNA为模板,在扩增产物中有三条主带,其大小分别为220bp,550bp和1500bp,另有一条相当弱的带,大小为700bp(Fig.1)。雌雄个体中扩增结果一致。经克隆和DNA序列分析,从550bp扩增带中得到一新的基因片段,长500bp,编码53个氨基酸;其余部分长340bp,可能为一内含子,且符合“GT…AG”规律(Fig.2)。其可能编码的蛋白质氨基酸序列与小鼠的 Sox8, 9, 10,SRY基因的相似性分别为 96%, 94%, 90%和 47%;与人类 Sox 8, 9, 10, SRY基因的相似性分别为64%, 94%, 58%和40%(Fig.3)。 相似文献
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采用DNase Ⅰ超敏感性分析和限制性内切酶介导的原位切口平移技术(Restriction Enzyme Nick Translation,RE-NT)对黄鳝二价体基因组结构进行了分析研究。已知DNaseⅠ超敏感性与潜在活性基因分布密切相关。结果表明,经DNaseⅠ介导的原位切口平移处理,在黄鳍二价体上可展现类D带带型,而由限制性内切酶介导的原位切口平移结果显示,AluⅠ和MspⅠ均在黄鳝二价体上诱导产生类G带带型,HpaⅡ和HaeⅢ则优先切割5号二价体上一特定区域,诱导出一段由标记信号所构成的类C带,对上述结果进行了分析和讨论。 相似文献
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两种泥鳅中PdSox8和PdSox9的RFLP分析 总被引:2,自引:2,他引:0
以α-32P-dCTP标记的大鳞副泥鳅的PdSox8和PdSox9基因片段为探针,研究了二者在泥鳅和大鳞副泥鳅中的限制性片段长度多态性。结果表明两种探针在6尾大鳞副泥鳅(3♀3 ♂)和6尾泥鳅(3♀3 ♂)的经EcoRI和HindIII完全酶切的基因组DNA中检测到了较丰富的阳性杂交带,并讨论了其产生的可能原因。未发现性特异杂交带。
Abstract:With the α-32 P-dCTP-labeled PdSox8 and PdSox9 fragments of Paramisgurnus dabryanus as probes, the Restricted Fragment Length Polymorphism(RFLP) were analyzed in two species of loaches P. dabryanus and Misgurnus anguillicaudatus. The results showed that the plentiful positive bands were observed in the genomic DNA of 6 individuals(3♀3♂) of P. dabryanus and 6 individuals(3♀3♂) M.anguillicaudatus, which were digested thoroughly by EcoRI and HindIII. The possible reasons were discussed. No sex-specific band was observed. 相似文献
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近年的研究表明,酪氨酸蛋白激酶受体通过其细胞膜外部的结构域与细胞外的信号分子配体结合后,激活本身位于细胞质内的激酶结构域,磷酸化的酪酸进而激活下游一系列信号分子。这些分子的激活引起细胞内基因表达的改变,最终导致细胞本身表型状态的变化。本文发现并研究了存在于鱼类中的酪氨酸蛋白激酶受体基因的同源序列matk。实验用黄鳝和胡子鲇为集市采购。PCR扩增采用人SRY基因编码区的一对引物,分别为:5′CCCGAATTCGACAATGCAATCATATGCTTCTGC3′和5′CTGTAGCGGTCCCGTTGCTGCGGTG3′。分别制备雌雄性黄鳝基因组DNA,进行PCR扩增。2%琼脂糖凝胶电泳分析表明,雌雄性样品中均可见到约250bp的扩增带。将雄性的扩增产物matk重组pUC13载体上。对其进行测序,结果表明:matk与人SRY和SRY盒基因序列无同源性,而与最近才报道的大鼠酪氨酸蛋白受体基因ptk3cDNA5′端序列具有56%的序列一致性(图1)。有报导,人与鼠的酪氨酸蛋白激酶受体基因DDR和ptk3存在96%的同源性。表明这种酪氨酸蛋白受体基因具有很强的保守性。以matk为探针,对经过EcoRI酶切过的雌雄黄鳝的胡子鲇(为对照)的基因组DNA进行Southern印迹分析。杂交结果(图2)显示:实验组的雌雄性黄鳝中,在3.3Kb和2.2Kb处均有两条一致的杂交带;而对照组中没有杂交带。说明黄鳝中存在酪氨酸蛋白激酶受体同源序列,有两个抟。类似地:果蝇和线虫的胰岛素受体基因scvenless和EGF/TGF-α等在哺乳动物中均有各自的同源基因-rasl和lin-3等。本研究结果有助于了解信号传导机制及其在水生动物到陆生动物中的进化模式。 相似文献