危重病房耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌同源性研究

目的探讨杭州市第一医院危重病房耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌之间的同源性,进行分子流行病学调查,旨在为制定预防和控制其院内感染的措施提供依据。方法收集该院危重病房2005年1月至12月分离到的34株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。采用全自动微生物分析系统VITEK-AMS60对34株耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌进行鉴定及药敏;用琼脂稀释法和E-test法测定14种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),脉冲场凝胶电泳(PF-GE)分析其耐药株的同源性,对碳青霉烯类基因OXA-23型、OXA-24型、IMP型、VIM型基因进行PCR扩增及序列分析。结果PFGE发现34株鲍曼不动杆菌菌株为同一耐药克隆株,在危重病房呈爆发流行。所有对亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌明确产OXA-23型碳青霉烯酶,未检出OXA-24、IMP、VIM基因型。34株菌株质粒提取未成功。结论该院同一个耐药克隆株在危重病房不同患者身上流行,可能与行气管插管、呼吸机、氧气湿化瓶、护士手操作有关。     

实时荧光聚合酶链反应检测呼吸道感染鲍曼不动杆菌TEM-1基因

目的 建立一种快速、准确、特异、定时检测鲍曼不动杆菌TEM-1型β-内酰胺酶耐药基因的方法.方法 选择TEM-1型β-内酰胺酶耐药基因作为靶序列,设计合成引物和探针;收集呼吸道感染患者痰标本培养的鲍曼不动杆菌279株,并对其进行检测分析.结果 采用荧光聚合酶链反应检测鳗曼不动杆菌TEM-1耐药基因灵敏度为102拷贝,279株鲍曼不动杆菌中检出47株携带TEM-1基因,检出率为16.8%.结论 应用Taqman探针荧光聚合酶链反应能够快速、准确检测鲍曼不动杆菌TEM-1型β-内酰胺酶耐药基因.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的了解杭州市第一人民医院产ESBLs大肠埃希菌的发生比例及对临床上常用的24种抗菌药物的耐药率变化.方法收集2003 2004年该院各类临床标本中分离的大肠埃希菌,采用NCCLS推荐的表型确证试验方法检测ESBLs菌株;药敏试验采用纸片扩散法.结果2003年与2004年,产ESBLs的大肠埃希菌分离率分别为46.11%（184/399）、57.44%（386/672）（P=0.0003）;2年来,ESBLs阳性菌对临床常用的24种药物表现出较高的耐药性,耐药率上升非常显著（P=0.0005）;非产ESBLs大肠埃希菌对大多数抗菌药物仍保持较高的敏感率;但2004年ESBLs阴性的大肠埃希菌的耐药性,比2003年显著上升（χ^2=37.785,P=0.0005）.结论尽早开展产ESBLs菌的监测,合理使用抗菌药物,对于有效控制产ESBLs菌的播散与流行是一项重要措施.     

不同来源株香港海鸥形菌药敏试验结果分析

目的对分离自社区获得性胃肠炎患者及淡水鱼肠道内的香港海鸥形菌(Laribacter hongkongensis,LH)进行药敏试验,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法2005年至2006年杭州市第一人民医院肠道门诊从社区获得性胃肠炎患者中分离到4株及2种淡水鱼体内10株LH菌株,计14株,按美国CLSI推荐的纸片扩散法进行药敏试验。结果药敏结果显示,14株LH菌株对24种常用抗菌药物中的15种药物,分别表现出不同程度的耐药性,耐药率达62.5%;尤其对青霉素、头孢唑啉和头孢哌酮等3种药物,14株LH菌株均为耐药,耐药率为100.0%;其中人体株LHHZ26,对12种药物耐药、1种为中介。LH对3代头孢表现为较高的耐药性,3种头孢药物的耐药率为71.43%~100%;14株LH株对头孢吡肟及头孢哌酮/舒巴坦均为敏感。对氨曲南(14.29%)、庆大霉素(7.14%)、复方新诺明(7.14%)的耐药率较低;喹诺酮类、氯霉素、阿米卡星、美罗培南、亚胺培南等药物均敏感。结论LH菌株对β-内酰胺类药物表现出耐药性,对青霉素类、头孢菌素类药物广泛耐药。建议对LH感染患者喹诺酮类为首选治疗用药。     

摩氏摩根菌耐药性和超广谱β-内酰胺酶检测

目的了解摩根摩根菌临床分离株对抗菌药物的体外敏感性和临床分布,研究摩氏摩根菌超广谱β-内酰胺酶基因类型分布。方法用K—B法对67株摩氏摩根菌进行药物敏感性检测;PCR法检测超广谱β-内酰胺酶基因,并对PCR结果进行测序分析。结果摩氏摩根菌株对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、氨苄西林／舒巴坦、庆大霉素、呋喃妥因均已产生较高的耐药率;而对环丙沙星、左旋氧氟沙星和第三代头孢菌素的耐药率保持在较低水平;对亚胺培南、美洛培南、头孢西丁100％敏感。基因型分析显示有5株携带CTX-M基因,其中3株摩根摩根菌基因型为CTX—M-14型,2株为CTX—M-15型。结论摩氏摩根菌ESBLs检出率仍较低;5株产超广谱β-内酰胺酶摩氏摩根菌对多种抗菌药物耐药,其基因型为CTX—M-15或者CTX—M-14;需加强对不常见肠杆菌科细菌的耐药监测。     

有核细胞对淋球菌存活力的影响

目的观察不同浓度的淋球菌在有核细胞内外和体外的存活状况。方法白带标本在密闭保湿和开放干燥的环境下,分别在0、12、24、48h接种于巧克力平板,另将淋球菌用生理盐水配成不同浓度的菌液与有核细胞悬液混合培养30min、1h、5h,然后分别取不同时间段的混合培养液接种于巧克力平板。结果在密闭保湿状况下,白带标本中的淋球菌在中量时存活时间长,少量或大量时其存活力相对较低;在干燥状况下,淋球菌存活时间短;在菌量很少（10／ml）时,有核细胞可以吞噬淋球菌而导致淋球菌存活时间减少,但在菌量较多时（大于300／ml）时,有核细胞可以延长淋球菌存活时间。结论温暖湿润环境有利淋球菌存活;有核细胞对淋球菌既具有保护作用又有杀伤作用。