外加电场对小麦和簇毛麦原生质体分裂和生长发育的影响

外加电场对小麦和簇毛麦原生质体分裂和生长发育的影响周爱芬,夏光敏,陈惠民（山东大学生物系,济南２５０１００）ＩＮＦＬＵＺＮＣＥＳＯＦＥＬＥＣＴＲＩＣＡＬＳＴＩＭＵＬＡＴＩＯＮＯＮＴＨＥＤＩＶＩＳＩＯＮＧＲＯＮＴＨＡＮＤＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＯＦＰＲＯ...     

普通小麦与簇毛麦不对称体细胞杂交的研究

以不同浓度(0～2.5mmol/L)碘乙酰胺(IOA)处理的小麦(Triticum aestivum L.)原生质体为受体,以经6krad(130rad/min)⁶⁰Co-γ射线处理的继代后4～5d期簇毛麦(Haynaldia villosa)愈伤组织原生质体为供体,使用PEG法诱导细胞融合。融合细胞经培养形成细胞团、愈伤组织或植株。通过形态学比较、染色体检查及同工酶分析,确认了得到的愈伤组织和再生植株为体细胞杂种。     

Comparative study of symmetric and asymmetric somatic hybridization between common wheat and Haynaldia villosa

Symmetric and asymmetric protoplast fusion between long term cell suspension-derived protoplasts of Triticum aestivum (cv. Jinan 177) and protoplasts of Haynaldia villosa prepared from one-year-old embryogeneric calli was performed by PEG method. In asymmetric fusion, donor calli were treated with gamma ray at a dose of 40, 60, 80 Gy (1.3 Gy/min) respectively and then used to isolate protoplasts. Results of morphological, cytological, biochemical (isozyme) and 5S rDNA spacer sequence analysis revealed that we obtained somatic hybrid lines at high frequency from both symmetric and asymmetric fusion. Hybrid plants were recovered from symmetric and low dose γ-fusion combinations. GISH (genomic in situ hybridization) analysis proved exactly the existence of both parental chromosomes and the common occurrence of several kinds of translocation between them in the hybrid clones regenerated from symmetric and asymmetric fusion. And the elimination of donor DNA in hybrid clones regenerated from asymmetric fusion     

普通小麦与簇毛麦对称及不对称体细胞杂交的比较

由长期继代的小麦品种济南177悬浮系制备原生质体为受体,取继代一年的簇毛麦愈伤组织不经照射或经⁶⁰Co-g射线照射,剂量分别为40,60,80Gy(1.3Gy/min),然后分离原生质体为供体,在PEG诱导下分别进行了对称及不对称融合(g融合).经形态学、细胞学、同工酶及5SrDNA间隔序列分析鉴定,对称及不对称融合均高频率地获得了体细胞杂种细胞系,并在对称融合及低剂量g辐照组合得到再生杂种植株.基因组原位杂交的结果证实,对称及不对称融合杂种中异源染色体间不同方式的易位及重组均普遍存在.g辐照存在剂量效应.结果表明:对称及不对称体细胞杂交均可有效地实现核基因的转移与重组,而不对称体细胞杂交还可直接导致染色体小片段易位,显示出此方法在小麦育种上的独特优势.     

同一小麦品种不同来源的两种原生质体与簇毛麦原生质体融合再生杂种植株(英文)

小麦 (TriticumaestivumL .)济南 177的两种原生质体 ,一种来自快速生长的悬浮细胞 ,它们因长期继代而丧失分化能力 ,其染色体只有 2n =2 4～ 2 8;另一种来自可以再生的愈伤组织 ,其原生质体不能持续分裂。它们中任一种与UV照射过的簇毛麦原生质体融合均不能再生植株。然而当它们混合在一起作为受体时 ,能够获得再生绿色植株。细胞核基因和胞质基因的分析证明这些绿色植株是杂种。以上事实说明这两种原生质体在融合时存在某些互补的关系 ,讨论了这种融合方式的可能作用及重要性。     

同一小麦品种不同来源的两种原生质与簇毛麦原生质体融合再生杂种植株

小麦（Triticum asetivum L.)济南177的两种原生质体,一种来自快速生长的悬浮细胞,它们因长期继代而丧失分化能力,其染色体只有2n-24-28,另一种来自可以再生的愈伤组织,其原生质体不能持续分裂,它们中任一种与UV照射过的簇毛麦原生质体融合均不能再生植株,然而当它们混合在一起作为受体时,能够获得再生绿色植株,细胞核基因和胞质基因的分析证明这些绿色植株是杂种,以上事实说明这两种原生质体在融合时存在某些互补的关系,讨论了这种融合方式的可能作用及重要性。     

用RAPD技术鉴定小麦属间不对称体细胞杂种

用随机引物扩增多态DNA(RAPD)技术对三种不同组合:小麦(Triticum aestivum)( )簇毛麦(Haynaldia villosa);小麦( )羊草(Leymus chinensis)和小麦( )高冰草(Agropyron elongatum)的属间不对称杂种进行分子鉴定,不同杂种植株的基因组经随机引物扩增后,均出现双亲的多态特异产物,证实它们含有双亲的基因组。将引物OPJ-12扩增的高冰草多态特异产物(分子量为0.77bp的DNA片段)分离纯化并标记作探针,用Southern杂交证明了小麦( )高冰草杂种经OPJ-12扩增的0.77kbp特异片段与高冰草这一片段具有同源性。本文结果证明,RAPD技术可作为小麦属间不对称体细胞杂种的一种快速、简便、有效的分子鉴定方法。     

Asymmetric somatic hybridization between Triticum aestivum L. and Haynaldia villosa Schur

Suspension cell-derived protoplasts of wheat, inactivated with different concentrations (0-2.5mol/L) of IOA, were fused by PEG method with the Haynaldia villosa protoplasts which originated from the calli 4-5d after subculture and were irradiated with 60Co-γ ray. Cell colonies, calli or regenerated plants were obtained from different combinations of fusion. The calli and plants were verified to be hybrids by chromosome counting, isozyme analysis and morphological inspection.     

应用5SrDNA间隔序列分析鉴定体细胞杂种

近年来,由于分子生物学的飞速发展,极大地推动了生命科学各分支学科在ＤＮＡ水平上的研究力度。就体细胞杂种的鉴定而言,仅形态、细胞学、生化方面的证据还远远不足,直接从ＤＮＡ水平上鉴定其杂种性质已成为必然。目前,从分子水平上鉴定体细胞杂种的方法有多种,如ＲＦＬＰ图谱分析、ＲＡＰＤ分析等。由于ＲＦＬＰ分析需要特异探针,ＲＡＰＤ分析的重复性较差,在一定程度上限制了两种方法在体细胞杂种鉴定方面的应用。据报道［１］,５ＳｒＤＮＡ（即５ＳｒＲＮＡ基因）在至今研究的所有真核生物中是以串联重复单位组成的,与卫星ＤＮ…