维生素K3通过调控Ras信号通路抑制前列腺癌细胞增殖

摘要 目的：研究维生素K3对前列腺癌细胞增殖的影响及其机制。方法：CCK-8检测维生素K3对前列腺癌细胞系增殖的影响;应用siRNA干扰Siah2表达之后,CCK-8检测维生素K3对前列腺癌细胞系增殖的影响;Western Blot检测维生素K3对前列腺癌细胞Siah2和Spry2表达的影响;免疫共沉淀技术检测维生K3对Siah2介导的Spry2泛素化水平的影响;Western Blot检测维生素K3对Ras信号通路中pERK表达的影响;构建裸鼠皮下前列腺癌模型,研究维生素K3对肿瘤生长的影响。结果：维生素K3抑制前列腺癌细胞系增殖,并且维生素K3浓度越高,对细胞抑制增殖作用越明显。前列腺癌细胞中干扰Siah2表达后,10 μM维生素K3对细胞增殖无明显抑制作用即维生素K3对前列腺癌细胞增殖抑制作用依赖Siah2。10 μM维生素K3能减弱Siah2对Spry2的泛素化水平使Spry 2表达升高。维生素K3能使前列腺癌细胞中Ras信号通路中的pERK蛋白表达降低。动物实验显示维生素K3治疗12天后,对照组和维生素K3组间肿瘤体积大小具有统计学差异,说明维生素K3能够有效地抑制裸鼠皮下前列腺癌生长。结论：维生素K3通过抑制Siah2泛素连接酶活性,介导其底物Spry2表达升高,进而抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路起到抑制前列腺细胞增殖作用。     

血管内皮细胞通过诱导ERG表达促进前列腺癌耐药

目的:探讨血管内皮细胞对前列腺癌细胞耐药能力的影响,并进一步研究血管内皮细胞作用于前列腺癌细胞的可能的分子机制。方法:1.利用Transwell小室构建共培养体系,通过CCK-8和Annexin V-FITC/PI检测细胞耐药的能力并通过蛋白印迹法(WB)检测凋亡相关分子的表达;2.利用聚合酶链式反应(PCR)及WB检测共培养后前列腺癌细胞中成红细胞病毒E26致癌物(ERG)的表达情况;利用酶联免疫吸附实验(ELISA)筛选出共培养组与非共培养组细胞上清之间有差异的细胞因子,并通过WB检测各个细胞因子与ERG的关系,确定影响ERG表达最明显的细胞因子。结果:1.前列腺癌细胞与血管内皮细胞共培养后,前列腺癌细胞对多西他赛的耐药性增加,细胞凋亡减少;2.共培养后前列腺癌细胞ERG的表达增高;血管内皮细胞分泌的成纤维细胞生长因子2(FGF2)在共培养后有明显增加,FGF2可以促进前列腺癌ERG的表达,并且这种病效应会被FGF2的抑制剂所逆转。结论:血管内皮细胞分泌的FGF2可促进前列腺癌细胞ERG的表达,促进前列腺癌细胞对多西他赛的耐药性。