FCST法与ATB法在酵母样真菌药敏试验中的对比研究

目的探讨ATB（Automatic testing bacteriology）法和FCST（Flow Cytometry Susceptibility Testing）法在检测常见几类酵母样真菌对抗生素敏感性中的一致性。方法应用ATB法和FCST法检测153株酵母样真菌氟胞嘧啶、氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑和两性霉素的敏感性。结果白假丝酵母菌对氟胞嘧啶、氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑和两性霉素的Kappa检验值分别为0．593、1．000、0．542、0．624、0．467（P〈0．01）;其他酵母样真菌一致性较好。结论相对于ATB常规药敏试验,FCST具有快速、准确、稳定等优点,有着广泛的临床应用前景。     

2010年舟山某医院拉米夫定无良好应答乙肝患者耐药监测分析

目的观察2010年舟山某医院拉米夫定单药治疗无良好应答的乙肝患者其基因型和P区耐药位点突变的关系。方法随机选取舟山某医院就诊的124例拉米夫定单药治疗无良好应答的本地乙肝患者,男64例,女60例,平均年龄(46.92±15.16)岁,用实时荧光定量PCR检测其基因型和HBV-DNA,并用毛细管电泳测序技术对P区进行突变位点检测。结果 124例患者35例(28.23%)B型和89例(71.77%)C基因型。C型HBV-DNA为(5.83±0.91)log10 copies/mL,高于B型的(5.07±1.13)log10 copies/mL,差异具有统计学意义(t=3.55,P<0.01)。拉米夫定在B基因型中的耐药率为45.71%(16/35),低于C基因型的65.17%(58/89),差异具有统计学意义(2χ=3.951,P<0.05)。拉米夫定耐药株在B基因型中rtM204 I/V/S位点突变率为68.75%(11/16),高于C基因型的37.93%(22/58),差异具有统计学意义(2χ=4.821,P<0.05)。结论对于本地区拉米夫定治疗无良好应答的C基因乙肝患者,应加强拉米夫定的耐药位点筛查,而拉米夫定治疗无良好应答的B基因乙肝患者应加强rtM204 I/V/S位点检测。     

利用单细胞RT-PCR体外克隆个体化乙型肝炎表面抗体重链

目的建立一种利用单细胞RT-PCR技术克隆乙型肝炎表面抗体重链的方法,为人源化、个体化的乙肝治疗性抗体研制奠定基础。方法利用单细胞分选技术从乙肝疫苗接种志愿者外周血中分选得到单个抗体分泌细胞（antibody-secreting cells,ASC）,用单细胞RT-PCR克隆其IgG重链全长到pEGFP-N1载体,转染COS-7细胞,上清液用乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）通过Western blot进行结合力验证。结果克隆得到1 500 bp左右的重链全长,重链表达产物经验证能与乙肝表面抗原特异结合。结论克隆得到表达产物能与HBsAg特异结合的重链基因,为我们后期制备抗体轻链、连接轻重链和抗体亲和力鉴定奠定基础。