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人癌胚抗原-重组痘苗病毒的构建和制备 总被引:23,自引:0,他引:23
痘苗病毒的基因组庞大,结构复杂而特殊,不可能将外源基因直接插入它的基因组,必须利用一种特殊的痘苗病毒质粒,才能构建成功重组痘苗病毒.在分析了痘苗病毒质粒pJ120〔含有我国天花疫苗-痘苗病毒天坛株761的启动子和胸苷激酶(thymidinekinase,简称TK基因),及含有人癌胚抗原(carcinoembrynicantigen,简称CEA)cDNA全序列的质粒p91023B-cea-17结构的基础上,设计出三步法构建了重组疫苗病毒质粒pJ-CEA.经酶切及PCR鉴定pJ-CEA中CEAcD-NA的存在,进一步用同源重组方法构建了表达人CEA的重组痘苗病毒,并以人体成纤维细胞作为宿主细胞,对CEA-重组痘苗病毒进行了大量培养.再次证实痘苗病毒是良好的真核表达载体,可以高效而准确地表达细胞膜糖蛋白CEA. 相似文献
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