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产气肠杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆和表达及影响重组酶活性的因素 总被引:4,自引:0,他引:4
用PCR方法从产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)中克隆出09kb的DNA片段,经DNA测序证明是α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactate decarboxylase,α-ALDC)基因。将α-ALDC基因重组到质粒pBV220后,转化大肠杆菌,经筛选获得高效表达的重组子菌株。重组α-ALDC基因表达量占菌体总蛋白量的27%。酶活检测表明重组子细胞表达的α-ALDC活性是产气肠杆菌的12000倍。另外,粗提的重组α-ALDC的最适pH为6.5~7.0,pH稳定范围为5.5~8.0,适合的温度为35~45℃。Ba2+、Cd2+、Fe2+、Co2+、Mn2+、Sn2+可提高重组α-ALDC的活性。氨基酸修饰剂可降低其活性。 相似文献
2.
利用已构建的含有短芽孢杆菌(Bacillus brevis)和产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactate decarboxylase, α-ALDC)基因的工程菌株,并使它们分别在大肠杆菌中高效表达,获得重组α-ALDC。在实验室,用 2L体积的麦芽汁进行啤酒生产试验,添加 2种重组α-ALDC后,使啤酒中的双乙酰含量快速下降到或始终保持在0.1mg/L以下。证明得到的重组a-ALDC能有效地降低啤酒中双乙酰含量。 相似文献
3.
醋酸杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因克隆、表达及在啤酒发酵中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
根据α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactatedecarboxylase,α-ALDC)基因的碱基序列,用PCR方法从醋酸杆菌(Acetobacteraceti)中克隆出了0.99kb的DNA片段,经DNA测序后证明该片段是α-乙酰乳酸脱羧酶基因.将该基因重组到质粒pBV220中,转化大肠杆菌,筛选获得具有α-ALDC活性的重组子菌株.酶活检测表明,重组子细胞表达的α-ALDC活性是供体菌的1100倍.将得到的α-ALDC粗提后用于啤酒发酵试验,降低了啤酒中双乙酰的含量 相似文献
4.
二种重组α-乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中降低双乙酰的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
利用已构建的含有短芽孢杆菌(Bacillus brevis)和产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactate decarboxylase, α-ALDC)基因的工程菌株,并使它们分别在大肠杆菌中高效表达,获得重组α-ALDC。在实验室,用 2L体积的麦芽汁进行啤酒生产试验,添加 2种重组α-ALDC后,使啤酒中的双乙酰含量快速下降到或始终保持在0.1mg/L以下。证明得到的重组a-ALDC能有效地降低啤酒中双乙酰含量。 相似文献
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