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黄单胞菌(Xanthomonas campestris)XA5-5β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达 总被引:4,自引:0,他引:4
以黄单胞菌(Xanthomonas campestris)XA5-5为供体菌,广泛寄主质粒pRK404为载体,在大肠杆菌中克隆了一个β-葡萄糖苷酶基因,重组质粒pLZS1外源片段为1.1kb,将pLZS1接合导入黄单胞菌XA5-5,得到了克隆子XA5-5(pLZS1).以水杨苷为底物,XA5-5(pLZS1)的酶活性大大高于E.Coli JM83(pLZS1).并且质粒在XA5-5中能相对稳定地存在.初步结果表明,所克隆的基因编码的产物对于水杨苷底物有较强的亲和力,并可以在一定程度上降低XA5-5中酶与pNPG底物的亲和力,使其酶活减小. 相似文献
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纤维素占植物总干重的30%~50%,是地球上分布最广、含量最丰富的碳水化合物。据报道,全球每年通过光合作用产生的植物物质高达1.55×10~9吨,其中89%尚未被人类利用。我国纤维素资源也很丰富,仅农作物秸杆、皮壳一项,每年即可达数亿吨。纤维素的利用与转化对于解决前世界能源危机,粮食短缺、环境污染等问题具有重要意义。 相似文献
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将生孢噬纤维粘菌(SporocytophagaB29)染色体用PstI部分酶切后,连接到大肠杆菌(E.coli)质粒载体pUC8上,然后转化E.coliJM83,从而建立了B29的基因文库,并筛选一个含有内切葡聚糖纤维素酶(CMCase)的阳性克隆.从此阳性克隆中提取质粒再转化JM83,发现所有的氨苄青霉素抗性(Apr)转化子都具有CMCase酶活性,证明在大肠杆菌中克隆到一个B29的内切葡聚糖酶基因. 相似文献
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以黄单胞菌(Xanthomonas campestris)XA5-5为供体菌,广泛寄主质粒pRK404为载体,在大肠杆菌中克隆了一个β-葡萄糖苷酶基因,重组质粒pLZS1外源片段为1.1kb,将pLZS1接合导入黄单胞菌XA5-5,得到了克隆子XA5-5(pLZS1).以水杨苷为底物,XA5-5(pLZS1)的酶活性大大高于E.Coli JM83(pLZS1).并且质粒在XA5-5中能相对稳定地存在.初步结果表明,所克隆的基因编码的产物对于水杨苷底物有较强的亲和力,并可以在一定程度上降低XA5-5中酶与pNPG底物的亲和力,使其酶活减小. 相似文献
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野油菜黄单胞菌S-152遗传转移系统的建立及外源性内切葡聚糖酶基因在其体内的表达 总被引:2,自引:2,他引:0
(通过细胞接合的方式将广宿主质粒pRK404、pKT230和RP4分别转入野油菜黄单胞菌S-152中,其转移频率均在10-4数量级上,从而建立起了S-152的转移系统。用同法将由载体质粒pRK404和白纹黄单胞菌XA1-1的CMC酶基因构成的重组质粒pND82转入到S-152中并得到了表达,使S-152(pND82)的胞内CMC酶酶活比出发菌株S-152提高了1倍。The wide-host-range plasmid vectors pRK404 and pKT230 were transferred into a recipient strain S-152 respectively by conjugation with the aid of the helper plasmid pRK2013 at frequencies of 10-4, and a genetic transfer system for S-152 was developed. A recombinant plasmid pND82, constructed by combining the plasmid vector pRK404 with a chromosomal DNA fragment coding for CMCase from XA1-1, was introduced into S-152 by this transfer system.As a result, the intracellular CMCase activity of S-152 (pND82) increases 1 time in comparison with S-152. 相似文献