缢蛏碱性磷酸酶胍溶液中分子折叠与活力变化研究

报道了缢蛏碱性磷酸酶（简称ＡＬＰ）经不同浓度盐酸胍处理时酶的分子构象所发生的变化以及酶变化和失活的动力学过程。在胍中酶荧光发射峰强度下降,紫外差光谱在２４６ｎｍ和２８５ｎｍ处出现２个负峰,ＣＤ谱中酶的α螺旋度下降,且随浓度增大,变化程度也加大。动力学研究表明,酶在０．５ｍｏｌ／Ｌ、１．０ｍｏｌ／Ｌ、２．０ｍｏｌ／Ｌ３．０ｍｏｌ／Ｌ、４．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍中的变性速度常数分别为３．２１×１０~（－４）ｓ~（－１）、６．３８×１０~（－４）ｓ~（－１）、２．１７×１０~（－３）ｓ~（－１）、２．３３×１０~（－３）ｓ~９－１）、５．１７×１０~（－３）ｓ~（－１）;而酶在相应盐酸胍中的失活速度常数分别为２．３３×１０~（－４）ｓ~（－１）、３．５７×１０~（－４）ｓ~（－１）、５．８６×１０~（－４）ｓ~（－１）、１．１４×１０~（－３）ｓ~（－１）、３．４５×１０~（－３）ｓ~（－１）;表现为失活与构象伸展变化基本平行。     

有机溶剂对缢蛏碱性磷酸酯酶分子构象和催化活力的影响

本文初步研究了三种有机溶剂甲醇、二甲基甲酰胺、二氧六环对缢蛏碱性磷酸酯酶(ALP)分子构象和催化活力的影响。发现在有机溶剂作用下,ALP的荧光发射光谱、紫外差光谱、园二色光谱都发生了显著的变化,而酶经甲醇、二甲基甲酰胺预处理后酶活力提高,经二氧六环预处理后活力下降,但当测活体系中有三种有机溶剂存在时,酶的活力却被大大抑制。     

缢蛏碱性磷酸酶胍溶液中分子折叠与活力变化研究

报道了缢蛏碱性磷酸酶（简称ＡＬＰ）经不同浓度盐酸胍处理时酶的分子构象发生的变化以及酶变化和失活的动力学过程。在胍中酶荧光发谢峰强度下降,紫外差光谱在２４６ｎｍ和２８５ｎｍ处出现２个负峰,ＣＤ谱中酶的α螺旋度下降,且随浓度增大,变化程度也加大。动力学研究表明,酶在０．５ｍｏｌ／Ｌ、１．０ｍｏｌ／Ｌ、２．０ｍｏｌ／Ｌ、３．０ｍｏｌ／Ｌ、４．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍中的变性速度常数分别为３．２１×１０＾－４ｓ     

PTHrP受体胞外区基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

PTHrP(甲状旁腺激素相关蛋白,Parathyroid hormone related protein)与多种肿瘤的生物学行为有关,尤其对肿瘤的骨转移起重要作用。应用其可溶性受体阻断它的病理作用是一个非常值得研究的课题。从肾癌组织中提取RNA,采用逆转录PCR (RT-PCR)方法获得PTHrP受体N端胞外区543碱基对的带信号肽的cDNA片段。将其核苷酸序列与国外发表的资料相比,基因中第262位核苷酸由T变为C,相应密码子由TAC变为CAC,导致氨基酸变异,即由酪氨酸变为组氨酸。将获得的受体基因克隆到原核表达载体pET-3a,在大肠杆菌得到高效表达,经ELISA证实表达产物可与PTHrP特异性结合。体外生物学活性检测表明表达产物可阻断PTHrP的生物学活性。     

甲状旁腺素相关蛋白cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

采用ＲＴＰＣＲ方法从中国人肾癌细胞株中克隆到甲状旁腺素相关蛋白（Ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｎｏｅｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ,ＰＴＨｒＰ）ｃＤＮＡ,其核苷酸序列与国外发表资料相比,有６个核苷酸不同,其中仅９２位密码子的不同导致氨基酸变异,即由脯氨酸变为丝氨酸。将克隆的ＰＴＨｒＰｃＤＮＡ插到原核表达载体ｐＥＴ３ａ的Ｔ７噬菌体启动子下游,转化大肠杆菌后得到高效表达,并经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和生物学活性检测对表达产物作了鉴定。     

苦荬菜属植物化学研究进展

对近些年来发表的有关苦荬菜属的化学成分进行了综述,主要为倍半萜内酯类、三萜类成分。     

黑化粘虫的形态特征及其遗传模式

本文首次研究报道了黑化粘虫Mythimna separata的形态特征及其遗传模式。所获的结果表明,黑化型与正常型粘虫的外部形态特征差异主要表现在成虫期。与正常型粘虫相比,黑化粘虫的成虫体色几乎全部变黑,正常型成虫所具有的黑色特征在黑化粘虫中已完全看不见,其他的颜色特征也由于黑化而产生了变异。卵、幼虫和蛹的颜色与正常型的没有明显的区别,只是黑化型的蛹在将羽化时的体色比正常型的深。黑化粘虫的遗传遵循孟德尔的隐性遗传规律,由位于常染色体上的单基因控制。这些结果表明,黑化型与正常型粘虫虽然仍属于同一个种,但黑化粘虫已经演变成了不同的基因型。最后,对黑化粘虫产生的原因及其在进化上的适应意义进行了讨论。     

63例非典型急性下壁心肌梗死临床分析

目的:研究评价各种常见诱因对急性下壁心肌梗死(IAMI)患者误诊判断的临床意义。方法:选择2002年1月～2009年12月我院急门诊IAMI患者63例,对其首发症状、心电图资料进行回顾性分析。结果:63例中,以头晕乏力首诊19例(30.16%),以晕厥首诊11例(17.46%),以上腹痛伴恶心呕吐,偶腹泻首诊13例(20.63%),以咽痛或牙痛首诊10例(15.87%),以呼吸困难首诊8例(12.70%),以左心衰竭首诊2例(3.17%)。结论:对急性下壁心肌梗死患者,常规心电图检查是必要的。再结合心肌坏死生化标志物指标,早诊断,早治疗。     

甲状旁腺素相关蛋白cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达*

采用RT-PcR方法从中国人肾癌细胞株中克隆到甲状旁腺素相关蛋白(Parathyroidhonnnoe related protein,PTHrP)cDNA,其核苷酸序列与国外发表资料相比,有6个核苷酸不同．其中仅92位密码子的不同导致氨基酸变异．即由脯氨酸变为丝氨酸。将克隆的PTHrPcDNA插到原核表达载体pET一3a的T7噬菌体启动子下游,转化大肠杆菌后得到高效表达,并经Western blot和生物学活性检测对表达产物作了鉴定。     

宏基因组技术在开拓天然产物新资源中的应用

微生物代谢产物具有巨大的化学多样性,是多种抗生素和其它药物的重要来源。由于现有培养手段的局限性,可培养的微生物不到微生物总数的1％,使绝大部分微生物资源的开发利用受到制约。近年来．直接提取环境样品中混合微生物总基因组DNA,利用可培养的宿主细菌构建宏基因组文库,通过筛选目的克隆,寻找活性代谢产物,取得瞩目进展。对这一新领域的研究进展结合我们的研究概况进行了简要综述。