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簇毛麦基因组特异性PCR标记的建立和应用 总被引:10,自引:0,他引:10
以普通小麦中国春、簇毛麦、中国春-簇毛麦二体附加系和代换系为材料进行RAPD分析,筛选出一个簇毛麦基因组特异性RAPD片段OPFO2757,该片段分布于簇毛麦所有染色体上。在对OPFO2757进行克隆、测序的基础上,设计一对PCR引物,建立了簇毛麦基因组特异性PCR标记。用这对PCR引物对不同普通小麦品种、不同硬粒小麦品种、不同居群的簇毛麦、中国春-簇毛麦二体附加系、中国春-簇毛麦二体代换系、普通小麦-簇毛麦双二倍体、硬粒小麦-簇毛麦双二倍体等材料进行扩增,凡具有簇毛麦染色体的材料都能扩增出一条长为677bp的DNA片段,而不具簇毛麦染色体的材料包括大麦、黑麦、长穗偃麦草、中间偃麦草等不能扩增出该片段。所以,该特异性PCR标记可用于快速跟踪检测小麦背景中的簇毛麦染色体。 相似文献
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小麦HMW-GS1Dx5基因的克隆及其特异性表达 总被引:3,自引:0,他引:3
显微切割了普通小麦钢82-122(Triticumaestivum2n=42)具有1Dx5+1Dy10亚基的1D染色体长臂端,利用PCR扩增得到了HMW-GS1Dx5亚基的5(端400bp序列片段.以此作为探针从基因的组织特异性和特定发育阶段的表达两个方面研究了HMW-GS1Dx5基因表达的规律.结果表明,干种子及萌发种子中存在此基因,而在发育的幼苗中此基因未表达.HMW-GS1Dx5基因可能从开花初期开始表达.HMW-GS1Dx5基因在籽粒成熟期表达,然而在营养器官如叶片中未表达,其表达存在组织特异性.HMW-GS1Dx5基因在蜡熟期籽粒表达水平最高,其次是乳熟期籽粒.从开花15d至蜡熟期籽粒,表达趋于增加.开花15d其mRNA水平是蜡熟期籽粒mRNA的28%,灌浆期为40%、乳熟期为72%、完熟期为54%.这为进一步研究其表达调控和改善小麦品质打下基础 相似文献
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普通小麦-中间偃麦草TAI-27中附加染色体的显微切割及特异性探针的筛选 总被引:1,自引:0,他引:1
试验以长穗偃麦草基因组DNA为探针 ,与普通小麦 中间偃麦草TAI 2 7进行染色体原位杂交 ,表明有 4条与长穗偃麦草同源的染色体 ;以P .stipifolia (St)基因组DNA为探针 ,有 4条与St同源的染色体 .这说明TAI 2 7中有 4条St染色体 .TAI 2 7是异代换 附加系 .对TAI 2 7中附加的中间偃麦草染色体进行显微切割 ,并建立其微克隆库 ,从中筛选获得了中间偃麦草的特异性探针 ,同源性分析表明该序列为一新序列 .这为进一步筛选抗病、抗逆和优质基因打下基础 . 相似文献
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小麦面粉的烘烤品质与其高分子量谷蛋白5亚基(HMW-GSIDx5)基因的表达有关。本文从该基因的组织、器官特异性和特定发育阶段的表达特性等方面,对其在小麦发育过程中表达的变化规律进行了研究,从分子水平为小麦的栽培和育种提供依据。显微切割普通小麦钢82-122的ID染色体长臂为模板,扩增该基因400bp的片段为探针(Fig.1),并经重组后测序(Fig.2)确认扩增无误。小麦苗期、生长期、开花期及成熟期分别取样、分离总RNA、做斑点(Fig.3,4&5)或Northern杂交(Fig.6)、并扫描足量(Fig.7)。结果表明:该基因只在籽粒中表达(Fig.3,4&5),从开花15天起(Fig.4),逐渐增加,至腊熟期达最高,以后渐次降低(Fig.6&7),有趣的是:在干种子和萌发种子亦有少量表达(Fig.1)。Cressey和陈和等方曾报告在开花15天可检测到HMW-GS蛋白。 相似文献
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从CIMMYT引进的人工合成六倍体小麦D染色体组微卫星分子标记的遗传差异 总被引:22,自引:0,他引:22
采用微卫星(SSR)分子标记技术,选用23个D染色体组特异性引的对来自CIMMYT的26份人工合成六倍体小麦D染色体组的遗传多样性进行了分析。研究发现,26份材料在D染色体组上存在丰富的等位基因变异(92个),平均每个基因座为4个。遗传距离计算结果也显示,26份材料D染色体组之间具有较大的遗传差异,平均遗传距离高达0.4955。因此,人工合成六倍体小麦D染色体组中存在丰富的遗传多样性,可以作为拓宽普通小麦遗传基础的新的遗传变异来源。研究还发现,由同一个粗山羊草基因型与不同硬粒小麦杂交合成的人工合成六倍体小麦(如合成种17和18)在所用检测的23个基因座中有3个存在差异,说明小麦在多倍化后,供体基因组在重复序列区域会发生遗传分化。 相似文献
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利用wx基因分子标记辅助选择培育糯性小麦 总被引:31,自引:0,他引:31
利用中国春及其缺体-四体对wx-B1基因的STS标记和wx-A1、wx-D1的微卫星(SSR)标记进行了定位.联合应用这2种分子标记,对12个小麦品种和5个高代糯麦株系做了鉴定,与Wx蛋白的SDS-PAGE结果一致;从组合江苏白火麦×关东107的F2分离群体中筛选出8种wx基因型,其中3种基因型(AD同缺型,BD同缺型和糯型)为自然界中所没有,并且培育出了国内首批糯性小麦品系.另外,应用SSR标记对江苏白火麦回交改良群体中个体进行辅助选择,得到了含wx-D1b的7D单体,为将来进一步改良糯性小麦的农艺性状提供广泛的遗传材料.利用wx基因分子标记辅助选择,可以加速培育糯性小麦的进程. 相似文献
8.
介绍了染色体显微切割及微克隆技术的原理和主要方法,综述了显微切割及微克隆的研究进展,并讨论了其在植物中的应用. 相似文献
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