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人分裂细胞核抗原基因片段的筛选、测序及对启动子的分析 总被引:1,自引:0,他引:1
经6.6×105个克隆筛选,从装在λ噬菌体载体Charon30中的人基因库中筛选到了一个含人分裂细胞核抗原(PCNA)基因的克隆。经Southern杂交分析插入基因长约14kb,有较长的5'上游区,但3'端缺少一部分。经亚克隆和测序已确定从5'上游1263bp到3'端与λ载体接点共4969bpPCNA基因片段的核苷酸序列。将PCNA基因启动子核苷酸序列与DNA聚合酶α,拓扑异构酶Ⅱα,胸苷酸激酶基因的启动子进行比较有30%以上同源性,具有“看家基因”特征。在转录起始点的5'上游几百bp的范围内都有与CAT,SP1,E2F,NFHB,Oct1和ATF等转录因子的结合位点相似的核苷酸序列。 相似文献
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为了制备核糖核酸酶P的底物——人工合成的tRNA前体,我们用五核苷四磷酸_(HO)U_PC_PC_PA~*_PC_(OH)(~*P代表~(32)P)与天然的酵母丙氨酸tRNA或其5′半分子在T_4RNA连接酶催化下反应,连接产率甚低。但观察到一个很奇特的现象:不管何种反应条件,甚至不加tRNA和不加酶的对照实验中,经聚丙烯酰胺凝胶(PAG)电泳分析反应产物时发现,在约相当于RNA序列分析“梯子”18核苷酸(nt)处总 相似文献
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rhTNF-α是一种具有较强抗癌活性的蛋白质,因此近年来人们对它的提取和分离纯化做了大量工作[1,2].破碎萃取联合操作是对双水相萃取和珠磨法破碎的发展和集成.它的出现给rhTNF-α粗提开了一个好头.经双水相萃取后,上相大量的PEG及盐保护了同样处于上相的rhTNF-α的活性[3].但大量PEG及盐的存在使样品很难用层析来进一步纯化. 相似文献
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A serial gel filtration operation with the combination of G25 and G100 in one column was developed to remove salt and PEG from upper phase rich in recombinant human tumor necrosis factor alpha after simultaneous cell disruption and two-phase aqueous extraction. Buffer exchanging and primary purification were also achieved at same time. The purification factor of 4.4 was obtained with an activity recovery of 97% by one single step of serial operation. 相似文献
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