高胆固醇高脂肪膳食对家兔β-VLDL组成及其与巨噬细胞相互作用的影响的初步研究

给家兔喂以1％胆固醇及10％菜油(A组)或猪油(B组)50多天后A组血胆固醇水平(824.2±265.1mg/dl)明显低于B组(1666±693.8mg/dl);A组甘油三酯水平(51.9±19.1mg/dl)亦低于B组(104±40.2mg/dl)。二组家兔的β—VLDL的脂类组成无差别,但A组β—VLDL的apoE高于B组,分别为45.2％及37.5％。高分子量apoB(apoB_h)为33.6％,低于B组β-VLDL(47.3％)。A组β-VLDL促进小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇堆积的程度大于B组,可能与apoE含量高有关。我们认为多不饱和脂酸减轻动脉粥样硬化(As)的作用不在于改变脂蛋白构成后阻碍泡沫细胞的形成而是促进β—VLDL从体内清除。     

巨噬细胞对正常人极低密度脂蛋白亚组分代谢的研究

本文研究了小鼠腹腔巨噬细胞对正常人极低密度脂蛋白(N-VLDL)两种亚组分VLDL_1和VLDL_3的代谢。两种亚组分都能以受体方式和非特异性方式被巨噬细胞摄取和降解。在受体途径中以VLDL_1的摄入量居多。对胞内甘油三酯(TG)的堆积作用以VLDL_1较强,对胆固醇酶(CE)的堆积则以VLDL_3较强。表明两者在促进巨噬细胞向泡沫细胞转变中的作用有所不同。     

介导巨噬细胞摄取氧化修饰极低密度脂蛋白的受体

用未标记氧化修饰极低密度脂蛋白（ｏｘ－ＶＬＤＬ）、ｎ－ＶＬＤＬ、乙酰ＬＤＬ竞争１２５Ｉ－ｏｘ－ＶＬＤＬ与巨噬细胞的结合。在浓度为２００μｇ蛋白／ｍｌ时,分别抑制标记ｏｘ－ＶＬＤＬ结合量的７０～７８％、６０～７０％和２５～３５％。用未标记ｏｘ－ＶＬＤＬ竟争１２５Ｉ－ｎ－ＶＬＤＬ与巨噬细胞的结合,能抑制７７％。结果说明ｏｘ－ＶＬＤＬ主要通过ｎ－ＶＬＤＬ受体进入巨噬细胞。以ｏｘ－ＶＬＤＬ与ｏｘ－ＬＤＬ进行交叉竞争时,ｏｘ－ＶＬＤＬ与ｏｘ－ＬＤＬ自身可抑制标记ｏｘ－ＶＬＤＬ或ｏｘ－ＬＤＬ的７５～８２％,而ｏｘ－ＶＬＤＬ或ｏｘ－ＬＤＬ的交叉竞争仅３８～４０％。表明ｏｘ－ＶＬＤＬ与ｏｘ－ＬＤＬ有部分共同的构象与巨噬细胞的脂蛋白受体结合,但ｏｘ－ＶＬＤＬ不是经ｏｘ－ＬＤＬ受体被巨噬细胞摄取。     

介导巨噬细胞摄取氧化修饰极低密试脂蛋白的受体

用未标记氧化修饰极低密度脂蛋白（ｏｘ－ＶＬＤＬ）、ｎ－ＶＬＤＬ、乙酰ＬＤＬ竞争＾１２５Ｉ－ｏｘ－ＶＬＤＬ与巨噬细胞的结合。在浓度为２００μｇ蛋白／ｍｌ时,分别抑制标记ｏｘ－ＶＬＤＬ结合量的７０￣７８％、６０￣７０％和２５￣３５％。用未标记ｏｘ－ＶＬＤＬ竞争＾１２５Ｉ－ｎ－ＶＬＤＬ与巨噬细胞的结合,能抑制７７％。结果说明ｏｘ－ＶＬＤＬ主要通过ｎ－ＶＬＤＬ受体进入巨噬细胞。以ｏｘ－ＶＬＤＬ与ｏｘ－ＬＤ     

血红蛋白的生物合成

自从同位素追踪法被广泛地应用于研究机体的代谢过程以来,近廿年中各方面都有着惊人的进展。在合成代谢方面利用同位素研究的结果,证实许多复杂的生理上很重要的化合物不需从食物输入,而是从很简单的物质逐步合成的。血红蛋白就是很好的例子。12年前对于血红蛋白的合成代谢可说一无所知,而在短短的12年中,借助于同位素突验,发现这样复杂的卟啉环仅由甘氨酸及琥珀酰辅酶 A 所合成,实际上不需要任何吡咯衍     

全长及缺失VLDL受体基因转染的CHO细胞与β-VLDL的结合效应

为探讨 VLDL受体结合域中 8个重复序列在结合 VLDL中所起的作用 ,利用构建的全长VLDL受体 c DNA和缺失 5个重复序列的该受体 c DNA重组表达载体分别导入 CHO细胞中 .RT- PCR可检测到外源性 VLDL受体基因的表达 .受体与配体结合研究表明 ,转染全长 VLDLR重组体的 CHO细胞结合β- VLDL的能力明显高于转染 VLDLR缺失重组体的 CHO细胞 ,表明人VLDL受体在 CHO细胞中能有效表达 ,而缺失 5个重复序列的 VLDL受体基本失去了结合β-VLDL的能力     

兔主动脉平滑肌细胞低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的诱导表达调节

在兔主动脉平滑肌细胞 ( SMC)培养基中分别加入正常低密度脂蛋白 ( N- LDL)、氧化低密度脂蛋白 ( ox- LDL)、正常极低密度脂蛋白 ( N- VLDL)、氧化极低密度脂蛋白 ( ox- VLDL)和 β-极低密度脂蛋白 (β- VLDL )培养 2 4 h后 ,用定量 RT- PCR和配体结合实验检测平滑肌细胞 LRP的m RNA和蛋白质水平的表达 .结果表明 :五种脂蛋白均能在转录和翻译水平诱导兔主动脉平滑肌细胞的 LRP表达 ,尤以富含胆固醇的 N- LDL ,ox- LDL和β- VLDL的刺激作用更明显 .用胆固醇单独或与脂蛋白共同温育 SMC后 ,发现胆固醇本身可促进 SMC的 LRP蛋白水平的表达 ,脂蛋白与胆固醇的共同刺激作用更为显著 .结果提示 :上述五种脂蛋白对 SMC上 LRP的表达有上调作用 ,其机制可能主要是通过其中的胆固醇来实现的 .