朱桔Mn-SOD的纯化、鉴定及浓度梯度胶电泳在其中的应用

朱桔叶中存在Mn-SOD、Fe-SOD和CuZn-SOD三种类型,在10%的PAGE中有三条活性带,其中Mn-SOD的Rf值大于Fe-SOD与CuZn-SOD₁的Rf值相同;在4%~35%的梯度胶电泳中有四条活性带,而Mn-SOD的R_f值最小,表明该酶带有较高的电荷密度。Mn-SOD占总活性的20%左右,已被纯化到均一程度。该酶的比活性为1 249 U/mg,分子量和亚基分子量分别为54.0 kD和26.6 kD,在紫外区最大吸收值为280 nm,在95℃处理15 min仍保留了46%的酶活性,等电点为5.06。该酶的活性不被KCN、H₂O₂抑制,但对1% SDS和氯仿-乙醇液敏感。