北京棒状杆菌RNA聚合酶的提纯及其性质的研究

本文报道了北京棒状杆菌RNA聚合酶的分离和提纯方法。经DEAE纤维素层析提纯后的酶的比活比硫酸铵分段后提高53倍;低浓度利福平和放线菌素D对酶显示强烈的抑制作用;酶对外加DNA模板呈现明显的依赖性;酶的反应最适温度为37℃,最适pH为7.9,反应30分钟时酶活力达到最高值,当0．I 5M氯化钾存在时表现最高酶活性。此外,本文还报道了模板、二价金属离子浓度和抑制剂浓度对酶活力的影响。     

四环素生产菌——金色链霉菌的噬菌体

本文证实国内某些工厂四环素生产中的异常发酵现象是由噬菌体所引起的,从一些工厂中分离到噬菌体SAI、SA2、SA3、SA4和SA5。对它们的噬菌斑进行了描述,在血清分型、寄主范围、热失活、pH值的稳定性测定方面都进行了工作,同时在电镜下观察了形态和测量了大小。我们认为这些噬菌体都是属于同一血清型,形态基本相似,大小差异不显著,对pH值有广泛的适应性,对热抵抗力较强,但在这些特征和寄主范围内却存在一定差异。这类噬菌体和已知的金色链霉菌噬菌体是不相同的。     

多粘芽孢杆菌噬菌体的分离及其特性的研究

从全国18个省、市、自治区的不同类型土壤和污水采集样品193号,在134号样品中分离到多粘芽孢杆菌噬菌体。对其中侵染多粘芽孢杆菌28的23株噬菌体进行了血清学的研究,可区分为四种血清型。对这四种血清型的代表株除测定血清中和反应外,还进行了寄主范围、吸附速度常数和一级生长曲线的测定。同时进行了电子显微镜观察。发现代表株之间存在着显著的差异。从生产方面考虑,我们进行了不同pH对噬菌体的存活影响,以及它们对温度稳定性的研究,可为防治噬菌体的感染提供依据。     

产无色胞外多糖菌株的筛选及其产物鉴定

从加拿大切叶蜂虫茧上分离到36株短梗霉,其中8株可程度不等的分泌胞外多糖。此多糖经支链淀粉酶(Pullulanase E.c.3.2.1.41)酶解产生麦芽三糖,酸水解产生葡萄糖,并与标准品的RF值相同。从而证明多糖为麦芽三糖通过1→6糖苷键连结聚合的出芽短梗胞糖(pullulsn)。它们可利用蔗糖,糖蜜作碳源分泌短梗胞糖,糖的转化率为25—32%。     

丝状噬菌体

丝状噬菌体的分子生物学研究和应用是近年来发展较为突出的一个领域,它们具有丝杆状的形态,在分类中归属于丝杆噬菌体科(Inoviridae),内有两属,即丝状噬菌体属(Inovirus)和杆状噬菌体属(Plectrovirus)。这里所谈的丝状噬菌体隶属于丝状噬菌体属,包括感染大肠杆菌和其它肠道细菌、假单胞菌、弧菌和黄单胞菌的噬菌体。至今,研究较清楚     

碱性蛋白酶生产菌——地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)的温和噬菌体

碱性蛋白酶生产菌——地衣芽孢杆菌经丝裂霉素C或紫外线处理,均可诱导释放噬菌体,电镜观察表明噬菌体头部外廓呈六边形,有不收缩的尾部(头部40nm×40nm,尾部107×5,7nm),噬菌体BLL1 DNA对限制酶Eco R Ⅰ,HindⅢ和Bam H Ⅰ敏感,分别切割成8,15,和9个片段,经电泳法测定。噬菌体DNA分子量约相当于23.4kb,根据解链温度计算出噬菌体的G+C含量约为31.2摩尔％,噬菌体提纯的外壳蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳呈现5条主带,其分子量分别约为78000,72000,55000,39000,35000。     

两株枯草芽孢杆菌的噬菌体

从三门峡酶制剂厂分离到与过去形态不同的两种噬菌体BS3l和BS32。BS31有收缩尾鞘,头部为六边形;BS32有复杂的短尾,形态与φ29相似,寄主范围窄且有差异,用限制酶分析,噬菌体DNA的分子量分别为62kb和17kb。根据解链温度计算噬菌体DNA的G十c含量分别为45．7mol％和40．7mol％。两株噬菌体的结构蛋白经SDS聚丙烯酰胺凝胶电沫测定,BS3l有2条主带,10条次带;BS32有3条主带和6条次带。     

枯草芽孢杆菌AS1.398的温和噬菌体

中性蛋白酶生产菌 Bacillus subtilis ASI．398为双溶源菌,能产细菌素,经紫外线和丝裂霉素C诱导,分离到二林温和噬菌体BSLl 0和BSLll。电镜观察表明,二株噬菌体形态相似,均属长尾噬菌体科的成员,经EcoRl限制酶消解,将BSLl0和RSLll分别切割成6和14个片段,经电泳方法测定其分子量分别为22．6kb和51．7kb。BSLl0和BSLll DNA的G十C含量分别为65mol％和60．2mol％。两者蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝肢电泳检测发现分别有3和4条主带。     

抗噬菌体产a-淀粉酶菌株的选育

利用亚硝基胍诱变与自然选育相结合的方法,经过多次反复分离和用不同方法测定对噬菌体的抗性,并检查在发酵中同时加入三种噬菌体对产酶水平的影响。从2500株诱变菌中,获得两株具有抗全部分离到的噬菌体能力,其产酶水平接近或超过出发菌株,经过15次传代后,基本上仍保持原有所需性状。通过三吨罐中型试验,产酶平均分别为320和381单位／ml,最高分别达到342和411单位／ml,对照组的水平为354单位／ml。说明这两株菌可应用于生产中作为综合防治噬菌体的一个环节。     

庆丰链霉菌细菌素的提纯和鉴定

利用Sephadex G25 凝胶过滤和磷酸纤维素层析相结合的方法,将庆丰链霉菌Q3所产生的细菌素——庆丰链霉菌素进行了提纯。这种细菌素是一种分子量为4737的蛋白性质物质,对热、紫外线和所试用的有机溶剂稳定,最适pH处于7.0—9.0。嗜热菌蛋白酶和链霉蛋白酶P可以完全破坏其活性,蛋白酶K能部分减低其活性,但所试验的其它蛋白水解酶类,以及DNA酶和RNA酶均无损其活性。根据庆丰链霉菌素对所测定的革兰氏阳性和阴性菌的生长影响,呈现抑制生长和促进生长,有一部分介于中间类型。