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青霉素酶发酵液的预处理和酶学特性 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了在发酵液中添加絮凝剂对发酵液进行预处理,对蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)产生青霉素酶的影响与酶学特性。实验结果表明,发酵液膜处理的难易程度与芽孢释放程度成正相关,在发酵液中添加0.02g/mL自制絮凝剂进行预处理,过滤效率提高10倍,而酶活损失仅5%;酶学特性研究结果表明,该酶最佳反应温度55℃时,酶的最适反应pH值7.0,金属离子锌、锰、镁对酶有激活作用,其浓度为0.25moL/L;酶热稳定性研究结果表明,在75℃下保温30min时,酶活损失85%。该酶在过量青霉素底物下,酶促反应为0级反应。 相似文献
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定向进化技术改良β-糖苷酶的低聚糖合成性能 总被引:2,自引:0,他引:2
对携带糖苷酶基因pBBGly的质粒pBtac2进行易错PCR定向进行研究,以改良其合成低聚糖催化性能。来源于Thermus thermophilus的耐高温β-糖苷酶,通过一轮易错PCR随机突变和限制性酶切再连接介导的体外基因重组,获得了两株高转糖基活性的突变酶:N339TF401S和F401S。它们能以天然糖类为糖基受体,低聚糖的合成得率分别为48%和62%,是野生型酶的6~8倍,而底物的水解活力只有野生型酶的0.08%和1.3%。另外,在突变酶的酶反应中,糖基受体对供体的水解反应有显著的促进作用,而野生型酶没有此特征。并且它们的催化水解动力学特征也明显区别于野生酶,水解反应初始浓度对速度关系呈一条直线。 相似文献
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维生素B12(VB12)是一种重要的动物和人类营养因子, 广泛应用于饲料、食品和医药卫生领域。中国已成为全球VB12的主要产地, 2007年产量为27 t, 占全球总产量的77%。VB12是目前已发现的最大、最复杂的维生素分子, 化学合成极其困难, 所有VB12产品均采用生物发酵制备其主体结构。VB12主要由古生菌和一些真细菌通过有氧或厌氧两种途径合成, 工业上主要采用费式丙酸菌(Propionibacterium freudenrechii)和脱氮假单胞菌(Pseudomonas denitrificans)进行发酵生产。综述了VB12的基本性质, 生物合成途径, 以及发酵生产工艺, 并对VB12的应用与市场前景作了分析。 相似文献
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采用重叠延伸PCR方法合成阻遏蛋白的编码基因tetr和插入操纵基因teto的Ketogulonigenium vulgare山梨糖脱氢酶启动子psndhteto的基因序列,借助宽宿主质粒p BBR1MCS-5,构建四环素诱导表达的穿梭质粒,转化Ketogulonigenium vulgare,获得阳性重组菌株,实现卡那霉素抗性的调控表达,结果表明:培养重组菌株2小时后,添加0.4μg/ml的四环素诱导剂后,能够在含有卡那霉素的培养基中生长,不添加四环素诱导剂的重组菌株不能在含卡那霉素的培养基中生长,确定了最适四环素的诱导浓度为0.6μg/ml。 相似文献
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一株芽孢杆菌在维生素C二步发酵中对小菌的促进作用 总被引:1,自引:0,他引:1
从土壤中分离到1株能更好促使小菌生长和产酸的芽孢杆菌B601,作为伴生菌与巨大芽孢杆菌相比,在生长过程中,发酵液中B601活菌数小于巨大芽孢杆菌,而其芽孢数则多于巨大芽孢杆菌。对B601组成菌系的发酵条件进行优化,得到如下结果:100g/L L-山梨糖、6g/L尿素、10g/L玉米浆、培养温度30℃和发酵周期44h。与巨大芽孢杆菌组成菌系相比其底物,L-山梨糖质量浓度提高了25%,尿素下降了50%.玉米浆质量浓度下降了33%,温度提高了2℃,发酵周期缩短了4h。结果表明:B601作为伴生菌,与巨大芽孢杆菌相比,该菌株明显提高了发酵效率。 相似文献
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丙酸积累对薛氏丙酸杆菌生长及产酸的影响* 总被引:9,自引:0,他引:9
报道丙酸积累对维生素B12产生菌Propionibacterium shermanii生长及丙酸产生的影响,在初糖浓度6%,pH6.5的批次发酵条件下,测定了该菌的耗糖、产酸和茵体生长曲线。发酵24h后,培养基中添加1%、3%和6%的丙酸,发酵结束时菌体干重只有对照的75.2%、65.4%和52.9%,产酸是对照的79.3%、69.2%和39.3%。加入6%的丙酸不能完全抑制耗糖和产酸。部分解除丙酸抑制可使菌体干重增加60%。 相似文献
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维生素B12(VB12)是一种重要的动物和人类营养因子, 广泛应用于饲料、食品和医药卫生领域。中国已成为全球VB12的主要产地, 2007年产量为27 t, 占全球总产量的77%。VB12是目前已发现的最大、最复杂的维生素分子, 化学合成极其困难, 所有VB12产品均采用生物发酵制备其主体结构。VB12主要由古生菌和一些真细菌通过有氧或厌氧两种途径合成, 工业上主要采用费式丙酸菌(Propionibacterium freudenrechii)和脱氮假单胞菌(Pseudomonas denitrificans)进行发酵生产。综述了VB12的基本性质, 生物合成途径, 以及发酵生产工艺, 并对VB12的应用与市场前景作了分析。 相似文献
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甘露糖异构酶(EC 5.3.1.7,Mannose isomerase,简称MI)能够催化果糖和甘露糖之间的异构转化.甘露糖加氢催化形成甘露醇,因此甘露糖异构酶的研究为工业生产甘露糖和甘露醇提供了新的可能途径.本研究以Escherichia coli JM109基因组DNA为模板,PCR扩增mi基因.结果表明,所克隆的mi基因与E.coli str.K-12 substr.MG1655的MI基因序列一致性为99.9%,氨基酸序列一致性为99%.该基因能够在E.coli BL21(DE3)中进行高效诱导表达,诱导出51.4 kD的特异性融合蛋白.酶学研究表明,该酶最适反应温度为37℃,最适pH为7.5,甘露糖为最佳反应底物,反应平衡时果糖与甘露糖的比值约为2.7. 相似文献
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