幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88、K99)的高密度发酵生产工艺及抗原过量表达

本文报道了幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88、K99)的高密度发酵生产工艺和抗原基因的过量表达研究结果。采用New Biunswick公司发酵罐,主要发酵参数为搅拌速度1000rpm,通气量为18L／min,溶氧为25％,pH6．5,罐压为48．3kPa,温度37℃,发酵时间为20h。菌体浓度为A 6 0 0 nm40以上,K88、K99抗原效价分别达212水平。发酵过程中发现表达的抗原除装配细菌伞毛之外,过量表达的抗原以相当于伞毛中抗原浓度游离存在于溶液中。含双价疫苗基因的表选型质粒的稳定性在发酵20h后保持在70％。本文结果表明利用小型发酵罐(10L发酵液)每次可制备10000支疫苗,完全可以满足对幼畜腹泻基因工程疫苗盼大量需要。     

The usefulness of CHAPS as a non-cytotoxic stabilizing agent in purification of growth factors

Among several detergents, a zwitterionic detergent, 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propane sulfonate (CHAPS), was found to be least cytotoxic for cultured mammalian cells. CHAPS improved the activity recovery and elution profile of crude and purified fibroblast growth factors (FGFs) during chromatographies. Diluted preparations of FGFs were stabilized by CHAPS against the loss during storage. Amino acid sequence analysis was not disturbed by CHAPS. CHAPS was removable by reversed-phase high-performance liquid chromatography. These results indicate that CHAPS is useful as a non-cytotoxic stabilizing agent in purification of various kinds of bioactive polypeptides.Abbreviations -MEM Alpha Modification of Eagle's Minimal essential medium - CHAPS 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propane sulfonate - CHAPSO 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]-2-hydroxy-1-propane sulfonate - CS Calf Serum - EGF Epidermal Growth Factor - FGF Fibroblast Growth Factor - HPLC High-Performance Liquid Chromatography - NGF Nerve Growth Factor - NOG 1-O-n-octyl--D-glucopyranoside - NP-40 Nonidet P-40 - PBS Phosphate-Buffered Saline - SB 12 3-(dodecylmethylammonio)-1-propane sulfonate - SDS Sodium Dodecyl Sulfate - TGF- and Transforming Growth Factor type and      

流行性出血热病毒R22株cDNA克隆及其特异性鉴定

用家鼠型流行性出血热病毒R22株RNA,经polyA接尾,以Oligo-dT做引物,合成cDNA。用pUC18为载体转染E.coli Mc1061,建立cDNA克隆。再经菌落杂交,选择病毒特异性的5个阳性克隆制成缺口翻译探针,与病毒RNA3个片段进行反杂交,确定RNA片段的特异性。结果表明,3个克隆为中(M)片段的cDNA,另两个分别为大(L)和小(S)片段cDNA。核苷酸序列分析证明,克隆的DNA中含病毒特异的核苷酸序列。     

黄根豆的核型分析

本文首次对单种属植物黄根豆(Chrysoirhiza adenotricha T.Chen)进行了核型分析,其核型公式为K(2n)=22=22m,并确认黄根豆属(Chrysorhiza)的染色体基数为X=11。     

汉防己多糖的研究

从汉防己根热水提取液中,分离得到两种葡聚糖,高效液相色谱法测得分子量为９．３×１０３和２．０×１０６,经甲基化分析、过碘酸盐氧化、Ｓｍｉｔｈ降解和部分酸水解确定两种多糖可能均以ａ（１→４）连接形成主链,在６－Ｏ上有分枝,两者分枝的类型和数目有所不同。     

大鼠肾脏和其它组织中磷酸酪氨酸蛋白的研究

本文采用P-tyr-BSA为免疫原免疫家无得抗血清。将纯化的IgG与HRP偶联,建立了P-tyr-Pr的ELISA法,并测定了正常大鼠肾脏等组织中P-tyr-Pr含量,其分布规律如下:上清中P-tyr-Pr含量高者,其颗粒部分则低,反之亦然;其中肾脏上清中含量远比其它组织(脾、肺、肝等)高。在此基础上,又研究了膜性肾炎大鼠肾脏P-tyr-Pr含量,发现其上清中的含量远远高于正常大鼠肾脏中的含量。     

前科迪勒拉（阿根廷）寒武─奥陶纪牙形刺和沉积演化

阿根廷前科迪勒拉区寒武─奥陶系地层发育。中晚奥陶世时,前科迪勒拉东部与中部山区为浅水陆棚相,西部山区为斜坡─盆地相。牙形刺的分布主要与平静的暖水大洋有关。寒武纪仅发现晚寒武世Ｐｒｏｃｏｎｏｄｏｎｔｕｓ带,此期间有一次海侵事件。在奥陶纪发现了牙形刺并可识别出四次海侵事件三次海退事件和二次缺氧事件。     

红细胞的前向光散射

本文从红细胞前向光散射的观点出发对红细胞的尺寸、红细胞的变形性研究以及红细胞容积、血红蛋白浓度等参数的测定作了系统的思考。提出在红细胞与周围悬浮介质折射车相差不大时,反常衍射比夫朗和费衍射更适合用于红细胞前向光散射的研究。利用两组不同角间隔的前向散射光来同时测量红细胞容积和血红蛋白浓度。同时其它一些标识红细胞的参数如平均红细胞容量（ＭＣＶ）、平均血红蛋白量（ＭＣＨ）等均可直接或间接由这两项参数导出。最后还将红细胞的光散射与Ｍｉｅ理论作了对比．     

蛇毒抗肝癌作用的研究

眼镜蛇毒具有抗肝癌作用.我们采用多种小鼠移植性肝癌研究了眼镜蛇毒抗肝癌作用.通过多项指标的体内实验证实眼镜蛇毒经腹腔给药,对小鼠腹水型肝癌 H_(22)(HepA)均有明显的抑制作用,其生存时间,癌重生长抑制率接近5-Fu.我们认为眼镜蛇毒是一种新型的,有一定抗癌活性药物,有在临床上进一步研究的价值.