双功能抗体介导的胃癌杀伤效应

将诱变的αＣＤ３杂交瘤（ＴＫ~－）与ＰＤ４杂交瘤（ＨＧＰＲＴ~－）融合,获得分泌双功能抗体（ＢｓＡｂ）的四体杂交瘤Ｃ３．ＢｓＡｂＣ３可分别与ＣＤ３分子及胃癌相关抗原Ｐ４０反应．体外杀伤试验证实,当效靶比为４０：１,ＢｓＡｂＣ３浓度为１ｍｇ／Ｌ时,其杀伤效应可达７７．６％．该杀伤效应具有明显的特异性,仅Ｐ４０阳性表达的靶细胞可被溶解,体内杀伤试验证实,裸鼠接种胃癌细胞后５ｄ,以ＢｓＡｂＣ３活化的外周血淋巴细胞（ＰＢＬｓ）经局部皮下注射处理,可使移植胃癌完全消退（５／５）．这一明显的治疗作用可能与局部注射途径有关,可供临床应用参考．     

基于翻转课堂的环境生物学实验PBL教学设计与实践

基于翻转课堂理论,结合以问题为基础的学习(Problem-based learning,PBL)教学法的"问题设置"、"问题解决"等特点与优势,构建了适用于实验操作类课程的教学模式,并以"水体疑遭粪便污染"这一实际问题作为情景进行的综合设计性实验为例,对高等教育环境相关本科专业基础课程"环境生物学实验"进行了创新性教学设计和实践。该教学模式通过课前准备、课中实施和课后反馈3个过程对实际问题进行分析和解决。课前准备包括教学团队针对实际问题设置若干相关实验场景,制作和搜集相应教学视频等教学资源,安排学生学习和完成任务;课中实施时教师直接指导学生进行实验操作,强调观察和记录实验现象,提出问题引导学生思考;课后反馈为学生提交实验结果与讨论、完成巩固练习和反馈问题等。实践表明,该教学模式在一线教学中行之有效,能取得较好的教学效果,值得推广。     

两个单点突变对昆虫羧酸酯酶降解马拉硫磷的影响

马拉硫磷是一种高效低毒的有机磷杀虫剂, 分子量大且结构特殊, 广泛用于农业害虫的防治。羧酸酯酶突变是昆虫对有机磷类杀虫剂产生代谢抗性的重要机制之一。本实验室前期已从棉蚜Aphis gossypii、 褐飞虱Nilaparvata lugens、 斜纹夜蛾Spodoptera litura、 家蚕Bombyx mori、 异色瓢虫Harmonia axyridis、 赤拟谷盗Tribolium castaneum和西方蜜蜂Apis mellifera中各克隆了一个非特异性羧酸酯酶基因, 通过体外定点突变构建了G/A151D和W271L两种突变体, 并进行了原核细胞表达和纯化。本实验在体外测定了这7种昆虫野生型和两种突变型羧酸酯酶对马拉硫磷的降解。结果显示： 棉蚜、 西方蜜蜂、 斜纹夜蛾、 赤拟谷盗的野生型羧酸酯酶能够降解马拉硫磷, 两个突变并不能提高它们的降解活性, 而家蚕、 异色瓢虫和褐飞虱的野生型羧酸酯酶不能降解马拉硫磷, G/A151D和/或W271L突变能使这些酯酶获得马拉硫磷羧酸酯酶（MCE）的活性, 有可能使这些昆虫对马拉硫磷产生抗性。不同物种的MCE活性相差较大, 斜纹夜蛾的MCE活性最高, 其k_cat/K_m值为1.8~1.9 L/μmol·min, 其次是赤拟谷盗, 其K_cat/K_m值为0.87~0.95 L/μmol·min, 其他昆虫的MCE活性相对较低, 相差可高达10倍。     

水稻转录因子OsBP-73靶基因的初步筛选

OsBP-73是用酵母单杂交系统,以水稻蜡质基因(Wx)的顺式作用元件为诱饵,从水稻cDNA表达文库中筛选获得的转录因子。本文以OsBP-73基因为例介绍了用"下拉"(pull-down)方法筛选转录因子靶基因的一般步骤。将含有该基因DNA结合功能域的cDNA片段构建到原核表达载体上,并在大肠杆菌中诱导表达获得其蛋白p73。用纯化后的p73蛋白通过"下拉"实验对OsBP-73靶基因进行初步筛选,获得了22个阳性克隆,为进一步研究转录因子OsBP-73参与的水稻转录调控网络提供依据。     

ES小鼠和ES细胞中H19基因甲基化状态

为探讨印迹基因H19的甲基化状态与ES小鼠胚胎发育之间的关系, 以遗传背景相同的正常成年对照小鼠、22只成年ES小鼠和8只新生死亡的ES小鼠以及不同传代次数的ES细胞为实验材料, 利用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR技术分别检测了其印迹基因H19的5′非翻译区两个位点的甲基化状态。结果表明, 发育至成年的ES小鼠印迹基因H19所检测位点的甲基化状态与正常成年对照小鼠之间没有差异, 而新生死亡的ES小鼠印迹基因H19所检测位点的甲基化状态与成年ES小鼠以及正常成年对照小鼠相比则存在明显差异。推测ES细胞中印迹基因H19所检测位点的甲基化状态与成年ES小鼠以及正常成年对照小鼠之间可能存在 差异。     

Comprehensive profiling of accessible surface glycans of mammalian sperm using a lectin microarray

It is well known that cell surface glycans or glycocalyx play important roles in sperm motility, maturation and fertilization. A comprehensive profile of the sperm surface glycans will greatly facilitate both basic research (sperm glycobiology) and clinical studies, such as diagnostics of infertility. As a group of natural glycan binders, lectin is an ideal tool for cell surface glycan profiling. However, because of the lack of effective technology, only a few lectins have been tested for lectin-sperm binding profiles. To address this challenge, we have developed a procedure for high-throughput probing of mammalian sperm with 91 lectins on lectin microarrays. Normal sperm from human, boar, bull, goat and rabbit were collected and analyzed on the lectin microarrays. Positive bindings of a set of ~50 lectins were observed for all the sperm of 5 species, which indicated a wide range of glycans are on the surface of mammalian sperm. Species specific lectin bindings were also observed. Clustering analysis revealed that the distances of the five species according to the lectin binding profiles are consistent with that of the genome sequence based phylogenetic tree except for rabbit. The procedure that we established in this study could be generally applicable for sperm from other species or defect sperm from the same species. We believe the lectin binding profiles of the mammalian sperm that we established in this study are valuable for both basic research and clinical studies.     

Enhancing effect of macroporous adsorption resin on gamma-aminobutyric acid production by Enterococcus faecium in whole-cell biotransformation system

Amino Acids - Gamma-aminobutyric acid (GABA) biosynthesis depended to a great extent on the biotransformation characterization of glutamate decarboxylase (GAD) and process conditions. In this...     

药用甘草组织培养生产黄酮的研究进展

甘草是驰名中外的中药材,有"十方九草"之称,甘草黄酮为其主要成分之一,不仅具有消炎保肝、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒和抗菌等药用功效,还可用于食品、化妆品等工业生产中。本文介绍了甘草黄酮的种类、组织化学定位,并着重总结了黄酮的组织培养获得途径及生物合成调控的影响因素,在此基础上,对今后的研究及应用进行了分析和展望,旨在为更好地开发利用甘草黄酮提供一定的依据。     

13种沙生植物纤维和导管分子长度变异的研究及木质部特征的定量研究

对13种沙生植物的纤维长和导管分子长度进行了测定分析, 二者的径向变异规律呈现上升,下降, 波动或恒定不变趋势。所选树种的平均纤维长度小于900 μm,属于较短纤维。所选树种的纤维长度和导管分子长度除沙冬青年轮内差异不显著外,其他树种间及树种年轮间的差异极其显著。对沙生植物的解剖特征的定量研究可以看出,所选树种的次生木质部特征体现了对沙漠环境的高度适应性。较短,孔径较窄导管以单管孔或复管孔形态出现,纹孔较小使干旱区沙生植物具有较大的水分运输能力,也是水分安全传导的一种策略。