Early conception factor lateral flow assays for pregnancy in the mare

The ECF™ lateral flow assay test is marketed to detect non-pregnancy in mares. The objectives of the present study were to determine the accuracy of the ECF test, the accuracy of the electronic reader accompanying the ECF test, and agreement between two human readers and the electronic reader. Serum samples were collected from anestrus, cycling but not inseminated, and inseminated mares, and were evaluated with the ECF™ test (EDP Biotech Company, Knoxville, TN, USA) at The Ohio State University and at the EDP Biotech Laboratory. Specificity ranged from 0.07 to 0.16, the negative predictive value ranged from 0.15 to 0.33, and accuracy ranged from 0.43 to 0.52. The electronic reader did not add improve the accuracy or predictive values of the test. Based on the electronic reader, 80.0% of the serum samples collected from the anestrus mares were false positives; Readers 1 and 2 had 60.0 and 33.3% false positives, respectively. For samples collected during the estrous cycle, 83.9% were false positives by the electronic reader, whereas Readers 1 and 2 had 43.7 and 26.4% false positives. We concluded that, regardless of whether the test strips were evaluated by a human or electronic reader, this assay was not accurate for determination of the non-pregnant mare.     

Fluorescent energy transfer measurements on fluorescein isothiocyanate modified cytochrome P-450 LM2

The distance between the heme iron and the N-terminus of cytochrome P-450 LM2 was determined by fluorescence energy transfer measurements. Fluorescein isothiocyanate which was covalently bound to the N-terminal methionine was used as donor chromophor. The Ro value between fluorescein isothiocyanate and the heme was calculated to be 3.98 nm. The distance between the nitrogen of the N-terminal methionine and the heme was estimated with 2.84 +/- 0.23 nm excluding most likely the N-terminal amino acid of cytochrome P-450 LM2 to participate in the electron transfer to the heme iron. A cytochrome P-450 LM2 membrane model is proposed.     

Über die gesteigerte Peroxydaseaktivität in gestörtenPhaseolus-Artbastarden

Ohne ZusammenfassungMit 3 Textabbildungen     

Untersuchungen über die Ursachen der Peroxydasevermehrung in gestörtenPhaseolus-Artbastarden

Zusammenfassung Um Aufschluß darüber zu erlangen, wie die Vermehrung der Peroxydase in gestörtenPhaseolus-Artbastarden (Phaseolus vulgaris x Phaseolus coccineus) zustande kommt, wurde die Fähigkeit der Bastarde zur Bildung von Peroxydaseapoenzym und Peroxydasecoenzym (=Hämatin) geprüft. Diese Prüfung wurde auf Grund des Befundes vonTheorell u. Mitarb., daß sich Peroxydaseapo- und Peroxydasecoenzym beiph-Werten um 7 spontan zur aktiven Peroxydase vereinigen, vorgenommen.Zusatz von Peroxydaseapoenzym zu Blatthomogenaten normaler und gestörter Pflanzen beeinflußt in keinem Fall die Peroxydasereaktion. Coenzymzusatz bleibt wirkungslos bei normalen, führt aber zu einem starken Anstieg der Peroxydasereaktion bei gestörten Bastarden. Wie der Chlorophyllgehalt ist auch der Gesamthämatingehalt bei den gestörten Bastarden stark vermindert.Aus den Befunden darf geschlossen werden, daß normale und gestörte Bastarde kein freies Hämatin enthalten und daß freies Apoenzym den normalen Bastarden fehlt, bei den gestörten Bastarden aber in größerer Menge vorhanden ist. Bei den normalen Bastarden sind Apound Coenzymproduktion aufeinander abgestimmt, während bei den gestörten Bastarden diese Koordination fehlt. Der begrenzende Faktor für die Peroxydasebildung ist bei den letzteren das Coenzym. Trotz des niedrigeren Gesamthämatingehaltes ist wesentlich mehr Hämatin in Form von Peroxydase festgelegt als bei den normalen Bastarden.Die Ergebnisse werden mit den Befunden über die Peroxydasevermehrung im alternden und im verdunkelten Blatt in Verbindung gebracht und diskutiert.Herrn Prof. Dr.W. Rudorf zum 70. Geburtstag gewidmet.     

Über die Fraktionierung des Protoplasmas vonPhaseolus-Arten undPhaseolus-Artbastarden

Zusammenfassung Es werden Beispiele für die Fraktionierung des Protoplasmas der Blätter vonPhaseolus vulgaris, Phaseolus coccineus undPhaseolus vulgaris ()×Phaseolus coccineus () mitgeteilt. Die Zahlen lassebn keine sicheren Unterschiede zwischen den entsprechenden partiklären und Grundplasmafraktionen der Elternarten und Bastarde erkennen, doch zeigen sich Differenzen, wenn die Partikel- und Grundplasmafraktionen jeweils zusammengefaßt und die Quotienten Partikel-Nucleinsäure/Grundplasma-Nucleinsäure (NS_P/NS_G) und Partikel-Eiweiß/Grundplasma-Eiweiß (E_P/E_G) gebildet werden. Diese Quotienten liegen beiPhaseolus vulgaris niedriger als beiPhaseolus coccineus, und bei den nichtgestörten Bastarden stimmt der Quotient E_P/E_G praktisch mit dem vonPhaseolus coccineus überein, wähert ist. Die gestörten Bastarde ähneln im Nucleinsäuregehalt den Elternarten und den normalen Bastarden, doch ist in allen Fraktionen, besonders stark in den Chloroplasten, der Eiweißanteil bezogen auf Frischsubstanz und Nucleinsäure vermindert.—Nucleinsäure und Eiweiß nehmen mit der Entwicklung der Blätter ab, dabei wird das Verhältnis Eiweiß/Nucleinsäure, eine Fraktion ausgenommen, stark zugungsten des Eiweißes verschoben, ferner findet eine Verschiebung der Quotienten NS_P/NS_G und E_P/E_G zugunsten der partikeln statt. Eine Abhängigkeit der Quotienten vom Gesamteiweiß oder der Gesamtnucleinsäure, die beide in den einzelnen Versuchen stark variieren, ist nicht festzustellen. Die Befunde zeigen, daß die in den Bastarden enthaltenen Kerngene vonPhaseolus coccineus das Verhältnis der Plasmakomponenten der Mutter, das bei völliger Unabhängigkeit und Selbständigkeit mit dem vonPhaseolus vulgaris übereinstimmen müßte, wesentlich beeinflussen. Sie werden unter dem Gesichtspunkt der Konkurrenzbeziehungen zwischen den Plasmakomponenten, deren Zusammenspiel den Stoffwechsel der Zellen ergibt, diskutiert.     

Ecological and geological processes impacting speciation modes drive the formation of wide-range disjunctions within tribe Putorieae (Rubiaceae)

Wide-range geographically discontinuous distributions have long intrigued scientists. We explore the role of ecology, geology, and dispersal in the formation of these large-scale disjunctions, using the angiosperm tribe Putorieae (Rubiaceae) as a case study. From DNA sequences of nuclear ITS and six plastid markers, we inferred a phylogeny with 65% of all known Putorieae species. Divergence times, ancestral ranges, and diversification rate shifts were then estimated using Bayesian inference. We further explored species climatic tolerances and performed ancestral niche reconstruction to discriminate among alternative speciation modes, including geographical and ecological vicariance, and ecogeographical, ecological, and dispersal-mediated speciation. As a result, we identified seven major clades in Putorieae, some of which exhibit striking geographical disjunctions, matching the Rand Flora pattern, with sister species in the Canary Islands andeastern and southern Africa. Initial diversification within the tribe occurred in the early Miocene, coincident with a period of climate warming; however, most clades diverged within the last 10 Myr. Aridification and high extinction rates, coupled with ecological vicariance, explain the oldest disjunctions. Adaptation to new environmental conditions, after allopatry, is observed in several clades. Dispersal, either long-distance or via corridors made available by mountain uplift, is behind the most recent disjunctions. Some of these events were followed by ecological speciation and rapid diversification, with species becoming adapted to xeric or increasingly colder continental climates. We show that an integrative approach may help discriminate among speciation modes invoked to explain disjunctions at macroevolutionary time scales, even when extinction has erased the signature of past events.     

Interactions between peptidyl tRNA hydrolase homologs and the ribosomal release factor Mrf1 in S. pombe mitochondria

Mitochondrial translation synthesizes key subunits of the respiratory complexes. In Schizosaccharomyces pombe, strains lacking Mrf1, the mitochondrial stop codon recognition factor, are viable, suggesting that other factors can play a role in translation termination. S. pombe contains four predicted peptidyl tRNA hydrolases, two of which (Pth3 and Pth4), have a GGQ motif that is conserved in class I release factors. We show that high dosage of Pth4 can compensate for the absence of Mrf1 and loss of Pth4 exacerbates the lack of Mrf1. Also Pth4 is a component of the mitochondrial ribosome, suggesting that it could help recycling stalled ribosomes.     

Avoidance conditioning in bamboo sharks (Chiloscyllium griseum and C. punctatum): behavioral and neuroanatomical aspects

Animals face different threats; to survive, they have to anticipate how to react or how to avoid these. It has already been shown in teleosts that selected regions in the telencephalon, i.e., the medial pallium, are involved in avoidance learning strategies. No such study exists for any chondrichthyan. In nature, an avoidance reaction may vary, ranging from a ‘freeze’ reaction to a startling response and quick escape. This study investigated whether elasmobranchs (Chiloscyllium griseum and C. punctatum) can be conditioned in an aversive classical conditioning paradigm. Upon successful conditioning, the dorsal, medial and lateral pallium were removed (group 1) and performance tested again. In a second group, the same operation was performed prior to training. While conditioning was successful in individuals of both groups, no escape responses were observed. Post-operative performance was assessed and compared between individual and groups to reveal if the neural substrates governing avoidance behavior or tasks learned in a classical conditioning paradigm are located within the telencephalon, as has been shown for teleosts such as goldfish.