Early conception factor lateral flow assays for pregnancy in the mare

The ECF™ lateral flow assay test is marketed to detect non-pregnancy in mares. The objectives of the present study were to determine the accuracy of the ECF test, the accuracy of the electronic reader accompanying the ECF test, and agreement between two human readers and the electronic reader. Serum samples were collected from anestrus, cycling but not inseminated, and inseminated mares, and were evaluated with the ECF™ test (EDP Biotech Company, Knoxville, TN, USA) at The Ohio State University and at the EDP Biotech Laboratory. Specificity ranged from 0.07 to 0.16, the negative predictive value ranged from 0.15 to 0.33, and accuracy ranged from 0.43 to 0.52. The electronic reader did not add improve the accuracy or predictive values of the test. Based on the electronic reader, 80.0% of the serum samples collected from the anestrus mares were false positives; Readers 1 and 2 had 60.0 and 33.3% false positives, respectively. For samples collected during the estrous cycle, 83.9% were false positives by the electronic reader, whereas Readers 1 and 2 had 43.7 and 26.4% false positives. We concluded that, regardless of whether the test strips were evaluated by a human or electronic reader, this assay was not accurate for determination of the non-pregnant mare.     

Herbicide effects on planktonic systems of different complexity

Bioassays of different complexity were compared with respect to their capability to predict the environmental impact of the herbicide atrazine in aquatic systems. Acute toxicity tests with Daphnia did not yield meaningful results. Sublethal tests with Daphnia (feeding inhibition, reduction of growth and reproduction) were more sensitive, but effective concentrations of atrazine were still rather high (2 mg/L). A relatively complicated artificial food chain system that incorporated direct and indirect effects on Daphnia yielded significant reduction of daphnid population growth at 0.1 mg/L. Enclosure experiments with natural communities were by far the most sensitive tools. Community responses could be measured at concentrations as low as 1 µg/L and 0.1 µg atrazine/L. At the lowest concentration, however, communities recovered after three weeks. We conclude that in complex systems indirect effects can be more important than direct effects, so that, contrary to the conditions in simple tests, non-target organisms may be the better indicators of herbicide stress to natural communities.     

Amino acid sequence of Manduca sexta adipokinetic hormone elucidated by combined fast atom bombardment (FAB)/tandem mass spectrometry

Combination of Fast Atom Bombardment Tandem Mass Spectrometry with Amino Acid Analysis assigns the amino acid sequence of the Manduca sexta adipokinetic hormone as pGlu-Leu-Thr-Phe-Thr-Ser-Ser-Trp-GlyNH2. Similarities and differences with other invertebrate hormones and with mammalian glucagon are discussed.     

Fluorescent energy transfer measurements on fluorescein isothiocyanate modified cytochrome P-450 LM2

The distance between the heme iron and the N-terminus of cytochrome P-450 LM2 was determined by fluorescence energy transfer measurements. Fluorescein isothiocyanate which was covalently bound to the N-terminal methionine was used as donor chromophor. The Ro value between fluorescein isothiocyanate and the heme was calculated to be 3.98 nm. The distance between the nitrogen of the N-terminal methionine and the heme was estimated with 2.84 +/- 0.23 nm excluding most likely the N-terminal amino acid of cytochrome P-450 LM2 to participate in the electron transfer to the heme iron. A cytochrome P-450 LM2 membrane model is proposed.     

Sterols in species of Pythium

Summary Analysis by gas chromatography revealed the presence of small amounts of squalene, but not lanosterol nor ergosterol in Pythium paroecandrum, P. ultimum, P. graminicola, and P. arrhenomonas. However, when acetate-¹⁴C was used as a precursor for sterols, even squalene was not found in P. graminicola. The deficiency in the sterol synthesizing mechanism may therefore be at or before the squalene forming step. Both squalene and ergosterol were present in the mycelium of Rhizoctonia solani, as shown by both gas chromatography and by the incorporation of acetate-¹⁴C into ergosterol. The absence of ergosterol in Pythium and its presence in Rhizoctonia is consistant with the resistance to the antibiotic filipin of Pythium species and the sensitivity of R. solani.     

The effect of sterols on the metabolism of Pythium species

Summary The growth of several Pythium species is increased between 65 and 100% if cholesterol is added to the growth medium. The optimum concentration is 15 mcg per ml. Mycelium of Pythium ultimum, in which cholesterol is present, incorporates glucose-U-¹⁴C and releases ¹⁴CO₂ at a faster rate than the corresponding sterol free mycelium. In sterol containing cells, more ¹⁴CO₂ is produced from a given amount of absorbed glucose-U-¹⁴C than in sterol free cells, there is thus in sterol containing hyphae a higher level of energy production. This condition can account for the increase in growth due to cholesterol. Only if sterols are present in the cellular membranes of Pythium species is the optimum synthetic capacity reached.     

Über die gesteigerte Peroxydaseaktivität in gestörtenPhaseolus-Artbastarden

Ohne ZusammenfassungMit 3 Textabbildungen     

Untersuchungen über die Ursachen der Peroxydasevermehrung in gestörtenPhaseolus-Artbastarden

Zusammenfassung Um Aufschluß darüber zu erlangen, wie die Vermehrung der Peroxydase in gestörtenPhaseolus-Artbastarden (Phaseolus vulgaris x Phaseolus coccineus) zustande kommt, wurde die Fähigkeit der Bastarde zur Bildung von Peroxydaseapoenzym und Peroxydasecoenzym (=Hämatin) geprüft. Diese Prüfung wurde auf Grund des Befundes vonTheorell u. Mitarb., daß sich Peroxydaseapo- und Peroxydasecoenzym beiph-Werten um 7 spontan zur aktiven Peroxydase vereinigen, vorgenommen.Zusatz von Peroxydaseapoenzym zu Blatthomogenaten normaler und gestörter Pflanzen beeinflußt in keinem Fall die Peroxydasereaktion. Coenzymzusatz bleibt wirkungslos bei normalen, führt aber zu einem starken Anstieg der Peroxydasereaktion bei gestörten Bastarden. Wie der Chlorophyllgehalt ist auch der Gesamthämatingehalt bei den gestörten Bastarden stark vermindert.Aus den Befunden darf geschlossen werden, daß normale und gestörte Bastarde kein freies Hämatin enthalten und daß freies Apoenzym den normalen Bastarden fehlt, bei den gestörten Bastarden aber in größerer Menge vorhanden ist. Bei den normalen Bastarden sind Apound Coenzymproduktion aufeinander abgestimmt, während bei den gestörten Bastarden diese Koordination fehlt. Der begrenzende Faktor für die Peroxydasebildung ist bei den letzteren das Coenzym. Trotz des niedrigeren Gesamthämatingehaltes ist wesentlich mehr Hämatin in Form von Peroxydase festgelegt als bei den normalen Bastarden.Die Ergebnisse werden mit den Befunden über die Peroxydasevermehrung im alternden und im verdunkelten Blatt in Verbindung gebracht und diskutiert.Herrn Prof. Dr.W. Rudorf zum 70. Geburtstag gewidmet.     

Über die Fraktionierung des Protoplasmas vonPhaseolus-Arten undPhaseolus-Artbastarden

Zusammenfassung Es werden Beispiele für die Fraktionierung des Protoplasmas der Blätter vonPhaseolus vulgaris, Phaseolus coccineus undPhaseolus vulgaris ()×Phaseolus coccineus () mitgeteilt. Die Zahlen lassebn keine sicheren Unterschiede zwischen den entsprechenden partiklären und Grundplasmafraktionen der Elternarten und Bastarde erkennen, doch zeigen sich Differenzen, wenn die Partikel- und Grundplasmafraktionen jeweils zusammengefaßt und die Quotienten Partikel-Nucleinsäure/Grundplasma-Nucleinsäure (NS_P/NS_G) und Partikel-Eiweiß/Grundplasma-Eiweiß (E_P/E_G) gebildet werden. Diese Quotienten liegen beiPhaseolus vulgaris niedriger als beiPhaseolus coccineus, und bei den nichtgestörten Bastarden stimmt der Quotient E_P/E_G praktisch mit dem vonPhaseolus coccineus überein, wähert ist. Die gestörten Bastarde ähneln im Nucleinsäuregehalt den Elternarten und den normalen Bastarden, doch ist in allen Fraktionen, besonders stark in den Chloroplasten, der Eiweißanteil bezogen auf Frischsubstanz und Nucleinsäure vermindert.—Nucleinsäure und Eiweiß nehmen mit der Entwicklung der Blätter ab, dabei wird das Verhältnis Eiweiß/Nucleinsäure, eine Fraktion ausgenommen, stark zugungsten des Eiweißes verschoben, ferner findet eine Verschiebung der Quotienten NS_P/NS_G und E_P/E_G zugunsten der partikeln statt. Eine Abhängigkeit der Quotienten vom Gesamteiweiß oder der Gesamtnucleinsäure, die beide in den einzelnen Versuchen stark variieren, ist nicht festzustellen. Die Befunde zeigen, daß die in den Bastarden enthaltenen Kerngene vonPhaseolus coccineus das Verhältnis der Plasmakomponenten der Mutter, das bei völliger Unabhängigkeit und Selbständigkeit mit dem vonPhaseolus vulgaris übereinstimmen müßte, wesentlich beeinflussen. Sie werden unter dem Gesichtspunkt der Konkurrenzbeziehungen zwischen den Plasmakomponenten, deren Zusammenspiel den Stoffwechsel der Zellen ergibt, diskutiert.