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目的 研究严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)膜蛋白对宿主细胞mRNA前体(pre-mRNA)3"非翻译区(UTR)加工的影响。方法 本研究以人肺上皮细胞系A549为模型,利用瞬时转染在细胞内过表达SARS-CoV-2膜蛋白;利用RNA-Seq测序技术及生物信息学分析方法,系统性描绘宿主细胞选择性多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)事件;Metascape数据库对发生显著APA变化的基因进行功能富集分析;RT-qPCR验证靶基因3"UTR长度变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测目的蛋白表达水平。结果 SARS-CoV-2膜蛋白外源表达后宿主细胞内共813个基因发生显著APA变化。GO和KEGG分析显示,差异APA基因广泛参与有丝分裂细胞周期、调节细胞应激等生物过程,涉及病毒感染和蛋白质加工等。从中进一步筛选出AKT1基因,在IGV软件中显示3"UTR延长;RT-qPCR验证AKT1基因的3"UTR长度变化趋势;Western blot结果显示AKT1蛋白磷酸化水平增加。结论 SARS-CoV-2膜蛋白潜在影响宿主pre-mRNA的3"UTR加工,其中参与多种病毒性生物过程的AKT1基因 3"UTR延长,且其编码的蛋白质功能在细胞内被激活。 相似文献
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T Tobe S Minoshima S Yamase N H Choi M Tomita N Shimizu 《Cytogenetics and cell genetics》1991,57(4):193-195
SP-40,40 is a serum glycoprotein consisting of two different subunits (alpha and beta) assembled into a dimer by disulfide bonds. Northern blot hybridization, using total RNA from several cell lines, showed that SP-40,40 is expressed in glioblastoma and testicular tumor cells, as well as hepatoma cells. Spot blot hybridization of flow-sorted human chromosomes, using a SP-40,40 cDNA fragment as a probe, localized the gene for SP-40,40 to human chromosome 8. This gene has been given the designation CLI, for complement lysis inhibitor, by the Human Gene Nomenclature Committee. 相似文献
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An NMR and nuclear Overhauser effect (NOE) analysis of Thermus thermophilus tRNAIle1a is presented. This species contains modifications including s2T54 and s4U8 [Horie, N., Hara-Yokoyama, M., Yokoyama, S., Watanabe, K., Kuchino, Y., Nishimura, S., & Miyazawa, T. (1985) Biochemistry 24, 5711-5715]. All the expected secondary and reverse Hoogsteen AU pairs were identified, with one possible exception. The general geometry of the T psi C loop is the same as the Escherichia coli species, and there is NOE evidence for an A9-UA12 triple. Preliminary measurements of solvent exchange rates of internally hydrogen-bonded bases suggest that this tRNA is more stable than previously studied E. coli and yeast tRNAs. 相似文献