奶牛ZFX+ZFY基因片段的克隆、测序及PCR对奶牛性别鉴定灵敏度研究

奶牛胚胎的性别鉴定是多年来奶牛业研究和探素的问题,尤其在体外授精。胚胎分割冷冻,保存及胚胎移植一系列生物科学高技术发展和应用的今天,这一问题的解决显得更加重要和迫切。用分子杂交的方法也可对胚胎进行早期性别鉴定,但这一方法必须要有大量的样品DNA,而且所需时间长,并受到实验条件的限制,很难在基层和生产中推广应用。 pCR方法除了有前述特点外,还同时具有所需设备简单,操作方便,易于在生产中推广应用。为此．我们对奶牛的ZFX及ZFY基因片段进行克隆、测序。并以此设计出分别对ZFX及ZFY具特异的引物,以奶牛血液DNA为模板进行PCR护增对奶牛性别鉴定灵敏度试验。     

肝片吸虫精子发生中的合体群团方式

本文从细胞形态学和超微结构等方面研究肝片吸虫Fasciola sp.精子发生的合体群团方式。结果表明:精巢直接涂片,经细胞培养、染色体观察和定向切片电镜观察,均证实肝片吸虫精子发生从B型精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞直到精子排出前的最后阶段等各期生殖细胞均以由细胞间桥连接的合体群团方式存在。有倍性群团和非倍性群团两种。未见到子细胞数目超过32的群团,非倍性群团应是部分精母细胞和精细胞退化的结果。无脊椎动物肝片吸虫合体群团超微结构与前人在哺乳类中的观察相似。表明精子发生中各子细胞间是否具有由细胞间桥连接而形成的合体群团,是动物生殖细胞发生与体细胞增殖的重要区别,似是有性生殖的一种功能适应。     

奶牛ZFY、ZFX基因片段的克隆及测序

奶牛的早期胚胎性别鉴定是奶牛胚胎分割及移植技术产生较大经济效益的前提,用PCR技术进行早期胚胎性别鉴定具有准确、快速、灵敏度高的特点.利用人和鼠的性别分化相关的DNA序列ZFY、ZFX基因序列设计的引物对公牛和母牛的染色体DNA、PCR扩增,将扩增产物定向克隆到pUC118上,获得ZFY、ZFX转化子,并测定了ZFY、ZFX基因的序列,发现两者同源性达88.2%,以此为基础可设计引物和探针,以PCR方法进行高灵敏度的奶牛性别鉴定.