广西岩溶区烟草黑胫病拮抗细菌的筛选鉴定及其抗病机理

从广西岩溶区靖西县优质烟叶生产区分离烟草黑胫病病原及土壤细菌,通过拮抗试验、离体及田间抗病能力测试等方法筛选拮抗细菌;利用形态观察、生理生化测试和16SrDNA序列分析三种方法相结合,对抗病效果良好的菌株进行分类鉴定;并对拮抗菌抗黑胫病机理进行初步研究。结果表明:从8份土壤样品中,共分离出土壤细菌340株,获得抗黑胫病效果良好的拮抗细菌3株,编号为8-23、6-70和13,它们分别属芽孢杆菌属、溶菌杆属和假单胞杆菌属细菌;三个拮抗细菌的抗黑胫病机理是通过胞外分泌一些可溶解病原菌细胞壁的酶或其它化学物质,破坏菌丝的细胞壁和细胞膜等生理结构,使细胞质渗漏、凝集,从而导致病原死亡;其中,菌株8-23和13的抗病活性物质主要为蛋白质类化合物;而菌株6-70除蛋白质外,还有其它一些非蛋白因子起作用。     

亚稀褶黑菇的化学成分

从剧毒蘑菇─亚稀褶黑菇(Russula subnigricans Hongo)子实体中分离出5个已知化合物,经波谱分析鉴定为4个麦角甾醇(22E,24R)-ergosta-7,22-diene-3β,5α,6α,9α-tetraol(1)、(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,5α,9α-trihydroxy-6-one(2)、(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,5α,6β-triol(3)、(22E,24R)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(4)和神经酰胺(2S,3S,4R,2′R)-2-(2′-hydroxytetracosanoylamino)octadecane-1,3,4-triol(5)。     

亚稀褶黑菇和稀褶黑菇的ITS序列分析

对亚稀褶黑菇和稀褶黑菇的ITS全序列进行了测定和比较,首次报道了亚稀褶黑菇的ITS1和5.8S区域。在ITS区域中,不同采集地的亚稀褶黑菇与稀褶黑菇的5.8S rDNA具有100%的同源性,而两侧ITS之间表现出种内和种间的多态性,种内的差异均不超过5%,种间的差异达10%左右。ITS序列分析方法可以作为两者的鉴定方法。     

三种毒菌的化学成分研究

本文对三种毒菌的化学成分进行了研究。从光盖伞(Psilocybe spp)分离鉴定了4个化合物,经波谱分析鉴定为:(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β-十八烷酸酯(1)、β-胡萝卜苷(2)、(22E,24R)-5α,6α-环氧麦角甾-8,22-二烯-3β,7α-二醇(3)、色氨酸(4);从假褐云斑鹅膏(Amanita pseudoporphyria)分离鉴定了4个化合物:(22E,24R)-3β-羟基-5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯(5)、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(6)、1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(2S,3R,4E,8E,2′R)-2-N-(2′-羟基棕榈酰)-9-甲基-4,8-脱氢鞘氨醇(7)、1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(2S,3R,4E,8E,2′R)-2-N-(2′-羟基十八烷酰)-9-甲基-4,8-脱氢鞘氨醇(8);大青褶伞(Chlorophyllum molybdites)发酵菌丝体分离鉴定了4个化合物:5、6、(22E,24R)-5α,6α-环氧麦角甾-8(14),22-二烯-3β,7α-二醇(9)、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(10)。除化合物9外其它化合物均为首次从以上相应毒菌中分离得到。     

芦竹的组培快繁技术研究

该研究以从匈牙利引进的良种芦竹带腋芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过设计不同的生长调节剂配比,对芦竹腋芽诱导、继代增殖及生根培养基进行了研究。结果表明:良种芦竹初代诱导最佳培养基为MS+6-BA 4.0 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),萌发率为90.0%;继代增殖最佳培养基为MS+6-BA 8.0 mg·L~(-1)+IBA 0.8 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),芽健壮均匀,增殖系数为4.3/30 d,基部保留3~5个芽作为继代培养物增殖效果最佳;选择高度5.0 cm以上的植株进行生根,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg·L~(-1)+蔗糖20.0 g·L~(-1)+活性碳1.0 g·L~(-1),不添加琼脂,培养1周生根率为100.0%,平均生根4条,根长2.0~4.0 cm;将所得生根苗炼苗1周,以河沙、黄泥或腐质土作为栽培基质,移栽于阴蔽度70的大棚中,1个月后移栽成活率≥98.0%;移栽于实验田中,按常规方式进行管理,当年亩产量约为5 500.0 kg。该研究结果为良种芦竹的大规模产业化应用提供了技术支撑。     

马尾松中的抗氧化成分

从马尾松(Pinus massoniana)枝条中分离得到21个已知化合物,经波谱学方法将其结构鉴定为7,13,15-abietatrien-18-oic acid (1),12-methoxy-7,13-abietadien-18-oic acid (2),15-methoxy-7,13-abietadien-18-oic acid methyl ester(3),12-hydroxydehydroabietic acid(4),dehydroabietic acid(5),15-hydroxydehydroabietic acid methyl ester (6),3β-methoxyserrat-14-en-21-one (7),3β-methoxy-30-hydroxyserrat-14-en-21-one(8),β-sitosterol (9),(±)-pinoresinol(10),(±)-matairesinol(11),(-)-nortrachelogenin(12),balanophonin (13),cedrusin (14),pinocembin (15),5-methoxypinosylvin (16),pinosylvin (17),1,2-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-propane-l,3-diol(18),cleistophostaudin(19),lignoceryl ferulate(20)和coniferaldehyde (21).其中化合物12,14,18和21在DPPH抗氧化模型上显示一定的抗氧化活性,其EC50值分别为11.36,6.76,14.07和13.33 μg· mL-1.化合物2～4,6～8,10,11,13,15～21均是从该植物中首次分离得到.     

青钱柳的快速繁殖技术

该文以青钱柳幼嫩茎段为外植体,研究其种苗快速繁殖技术。结果表明:青钱柳最佳采样时间为4月—6月,最佳外植体为轻微木质化茎段;最佳的外植体表面消毒方法为用0.1%HgCl_2浸泡5～7 min,消毒成功率54.1%,无菌外植体存活率88.7%;初代芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1),芽诱导率80.5%,培养21 d初代芽苗平均高度3.0 cm;最佳继代增殖培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+IBA 0.05 mg·L~(-1)+TIBA 0.02 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1),培养35 d,增殖系数7.0/35 d,平均苗高4.5cm,芽苗健壮且无玻璃化;生根前的壮苗培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+IBA 0.05 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1),培养35 d,长出的芽苗高大健壮,平均苗高6.0 cm;生根培养基为1/2WPM+IBA 1.5 mg·L~(-1)+5-NGS 4.5mg·L~(-1)+蔗糖20.0 g·L~(-1),培养40 d,最高生根率83.3%;生根苗较适合的移栽基质为泥碳土,较好的移栽季节为3月—5月和10月—11月,移栽后在遮光度70%的大棚中培养40 d,移栽成活率为54.3%～65.6%。该研究为其优良无性系的规模化繁育奠定基础。     

SPME-GC/MS 联用分析六堡茶茶花香气成分

该研究采用顶空固相微萃取—气相色谱/质谱联用技术,对六堡本地三种茶树花的香气成分进行了分析。结果表明：大叶种茶树花中共鉴定出香气成分37种,主要为苯乙酮、4-甲基-1,5-庚二烯、苯甲酸甲酯、愈创木二烯、顺式芳樟醇氧化物、雪松烯、水杨酸甲酯、D-杜松烯、1-氨基-环戊醇、除虫菊酮,占总相对含量的89.48％;中叶种共鉴定出32种成分,主要为苯乙酮、紫苏烯、顺式-3-蒈烯、顺式α-榄香烯、苯甲酸乙酯、塞瑟尔烯、α-蒎烯、新丁香三环烯、衣兰烯、顺式芳樟醇氧化物,占总相对含量的83.88％;小叶种的茶树花中共鉴定出45种香气成分,主要为苯乙酮、紫苏烯、罗勒烯、顺式α-榄香烯、2-异丙基-5-甲基-9-亚甲基-二环[4.4.0]癸-1-烯、荜澄茄油烯醇、α-菖蒲二烯、α-红没药烯、衣兰烯、苯甲酸乙酯、白菖油萜和α-杜松烯,占总相对含量的82.34％。苯乙酮为三种茶树花共有的主要成分,分别占总相对含量的60.70％、42.46％和39.91％,这成分与其他成分一起构成了3个品种明显不同的茶树花花香。该研究结果为六堡茶树花的深加工提供了依据。     

亚稀褶黑菇和稀褶黑菇的ITS序列分析

对亚稀褶黑菇和稀褶黑菇的ITS全序列进行了测定和比较,首次报道了亚稀褶黑菇的ITS1和5.8S区域.在ITS区域中,不同采集地的亚稀褶黑菇与稀褶黑菇的5.8S rDNA具有100%的同源性,而两侧ITS之间表现出种内和种间的多态性,种内的差异均不超过5%,种间的差异达10%左右.ITS序列分析方法可以作为两者的鉴定方法.     

三种植物生长调节物质对白及幼苗假鳞茎生长发育的影响

该研究以一年生白及幼苗为材料,通过测定生物量、氨基酸含量、蛋白质及多糖含量的变化,研究不同浓度的芸苔素内酯(BR)、萘乙酸(NAA)和茉莉酸甲酯(Me-JA)喷施对白及幼苗假鳞茎快速生长发育影响。结果表明:1.6×10~(-4)mmol·L~(-1)的BR处理组,假鳞茎鲜重达3.39 g/株,高于其他处理组,分别是清水对照(CK1)和沼气肥对照组(CK2)的1.19倍和1.25倍;单个假鳞茎(单株)的新生萌芽数也高于其他处理,达到2.17个,说明生产效益至少可提高19%。把两个对照组和三种植物生长调节物质处理后假鳞茎产量最高的处理组(即1.6×10~(-4)mmol·L~(-1)的BR、0.5 mmol·L~(-1)的NAA和0.25 mmol·L~(-1)的Me-JA)进一步测定假鳞茎氨基酸、蛋白质和多糖含量,发现CK2氨基酸含量最高,高达8.58%,而CK1含量最低,仅为5.21%,三种植物生长调节物质处理组分别是7.26%、7.53%和5.69%。蛋白质含量由高到低依次是沼气肥对照组、1.6×10~(-4)mmol·L~(-1)BR、0.5 mmol·L~(-1)NAA、0.25 mmol·L~(-1)ME-JA和清水对照组,它们的含量分别是11.6%、11.0%、10.5%、9.14%、7.72%,这说明与氨基酸含量基本一致。三种植物生长调节物质处理后白及多糖含量分别为24.2%、26.5%、26.5%,均远高于清水对照(19.3%)和沼气肥对照(21.8%)。综合分析认为,1.6×10~(-4)mmol·L~(-1)的BR能同时提高白及假鳞茎的产量和质量。该研究结果对于白及规模化种植栽培具有重要指导意义。