MTT法快速测定TNF活性

肿瘤坏死因子(TNF)能特异地杀伤肿瘤细胞,对正常组织无明显的毒性作用,因而受到人们的普遍关注。近年来的研究发现,TNF还具有抗病毒、兔疫调节、伤口愈合等作用,同时临床研究也表明,体内TNF量异常与肿瘤、感染、自身免疫等均有关系。因此,建立一个简易、快速、稳定的TNF检测方法对基础理论的研究,尤其是临床上的普及应用是非常必须的。     

反相高压液相色谱折叠重组人白细胞介素-2

重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ２）基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在,经过菌体发酵和收集、超声破菌、包涵体抽提、稀释透析初步复性、反相高压液相色谱纯化,终产物纯度大于９９％。反相高压液相色谱不仅可以纯化ｒｈＩＬ２,且使产物的总活性提高７９～９倍,比活性提高１４～１８倍,达到１５×１０７ｕ／ｍｇ蛋白质,蛋白得率为５０％～５６％。结果表明,反相高压液相色谱具有纯化和显著提高ｒｈＩＬ２折叠效率的双重功效,为非ＳＤＳ变复性法生产ｒｈＩＬ２提供了简便有效的方法     

大肠杆菌表达的重组肿瘤坏死因子的纯化

采用离子交换层析分离纯化大肠杆菌表达的重组人肿瘤坏死因子（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α,ｒｈＴＮＦ－α）,通过分步洗脱得到了含ｒｈＴＮＦ－α单一条带的色谱峰,比活达２．４×１０８Ｕ／ｍｇ,回收率为７７．２％,为ｒｈＴＮＦ－α的大规模制备及临床应用奠定了基础。