中国家蚕抗菌肽基因CBM1全长cDNA序列测定及其基因结构分析

用大肠杆菌感染中国家蚕（Bombyx mori）蛹,从中提取总RNA,用RT-PCR方法获得蚕抗菌肽基因CBM1 cDNA部分片段并克隆测序,以此蚕抗菌肽基因CBM1的部分片段,设计特异性引物,用3’、5’RACE的方法,获得蚕抗菌肽基因CBM1 cDNA的全长序列;用PCR的方法,从中国家蚕蛹基因组DNA获得抗菌肽CBM1基因的700bp、1100bp左右的2个片段,初步证实中国家蚕抗菌肽基因在单倍体染色体中至少存在2个拷贝。     

血清CEA、CCR3、CXCL16与Ⅰ期非小细胞肺癌术后复发转移的关系

摘要 目的：探讨血清癌胚抗原（CEA）、C-C基序趋化因子受体3（CCR3）、C-X-C趋化因子配体16（CXCL16）与Ⅰ期非小细胞肺癌（NSCLC）术后复发转移的关系。方法：选取2015年1月～2017年6月南京医科大学附属南京医院收治的186例接受手术切除的Ⅰ期NSCLC患者为NSCLC组,根据术后是否发生复发转移分为复发转移组和未复发转移组,另选取60名健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清CEA、CCR3和CXCL16水平,分析其与Ⅰ期NSCLC患者病理特征的关系。采用多因素Cox回归分析Ⅰ期NSCLC患者术后复发转移的影响因素,采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清CEA、CCR3和CXCL16对Ⅰ期NSCLC患者术后复发转移的预测价值。结果：与对照组比较,NSCLC组血清CEA、CCR3和CXCL16水平升高（P＜0.05）。血清CEA、CCR3和CXCL16水平与Ⅰ期NSCLC患者肿瘤直径、分化程度和TNM分期有关（P＜0.05）。随访5年,失访5例,181例Ⅰ期NSCLC患者术后复发转移为20.99%。多因素Cox回归分析显示,肿瘤直径≥2 cm、低分化、TNM分期ⅠB期和CEA、CCR3、CXCL16升高为Ⅰ期NSCLC患者术后复发转移的独立危险因素（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,血清CEA、CCR3和CXCL16联合预测Ⅰ期NSCLC患者术后复发转移的曲线下面积（AUC）大于CEA、CCR3和CXCL16单独预测。结论：血清CEA、CCR3和CXCL16水平升高与Ⅰ期NSCLC患者术后复发转移独立相关,血清CEA、CCR3、CXCL16联合预测Ⅰ期NSCLC患者术后复发转移的价值较高。     

地下矿藏的“侦察兵”——指示植物

有一类植物很特别,它们的生长与某种矿产资源的分布有密切的关系。或是在一个矿区数量很多而且生长得特别好,而在其他地质环境下很少见或不存在;或是在通常条件下可以普遍生     

指示植物一览

经过地质学家多年的努力,现今研究已经比较成熟的、能够在找矿活动中发挥重要作用的指示植物主要有以下几类。在我国东北大兴安岭北部森林覆盖区内,普遍分布着一种白桦树。白桦树的树皮(包括内、外     

中国家蚕抗菌肽CBM1、CBM2的克隆和表达研究

根据所测定的中国产家蚕CBM1和CBM2 cDNA序列,设计成熟肽的特异性引物,将此基因与凝血因子Xa（FXa）的切割序列以PCR方法连接起来,克隆至pGEX—KG表达质粒中。该载体为改进的GST融合表达质粒,所携带的6个Gly有助于提高FXa的切割效率。克隆得到的融合载体在大肠杆菌JM109中扩增和筛选。经DNA测序,证实为含有正确序列的乙酰化的pGEX—KG—FXa—NCBM1（pKG—FXa—NCBM1）、非乙酰化的pGEX—KG—FXa—CBM1（pKG—FXa—CBM1）和乙酰化的pGEX—KG—FXa—NCBM2（pKG—FXa—NCBM2）、非乙酰化的pGEX—KG—FXa—CBM2（pKG—FXa—CBM2）。将该载体在BL21中诱导表达,得到GST-FXa切割位点NCBM1、CBM1、NCBM2、CBM2等4种融合蛋白。经SDS—PAGE,考马斯亮兰染色后,Lab—Work扫描,其表达产物达到15％～20％,每升培养液平均可得20mg融合蛋白。菌体总蛋白经GST-亲和层析柱得到纯的GST—FXa—NCBM1、GST—FXa—CBM1、GST—FXa—NCBM2、GST—FXa—CBM2融合蛋白,再经FXa酶切后,透析过柱得到重组的NCBM1和CBM1。平板抑菌试验证明,4种融合蛋白均有明显的生物学活性,且没有显著的差异。     

指示植物一览

经过地质学家多年的努力，现今研究已经比较成熟的、能够在找矿活动中发挥重要作用的指示植物主要有以下几类。