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(连载第十七卷第三期 )6.2.4胰蛋白酶(Trypsin) :扩散激发的 pH跳跃测定有序的催化溶剂结构Singer等人(1993)的研究表明通过仔细选择一个特异的底物有可能改变一个多步反应的动力学轨迹 ;pH跳跃能提供一个有效的 ,依赖于扩散的方法在整个晶体范围内触发一个慢催化事件。在这个例子中 ,丝氨酸蛋白酶胰蛋白酶在亲核反应残基Ser195处被 p-胍基苯甲酸(GB)酰化。这个底物很容易形成一个酰基化酶中间物 ,但进行水解和再生游离酶却很慢。GB结合的胰蛋白酶单晶在 pH5.5下装在流槽中 ,在5秒钟内 ,…  相似文献   
2.
近年来,人们对古老的劳埃衍射技术重产生了浓厚的兴趣,这主要是因为世界各地新的同步辐射光源的建成;各种先进的插入件,诸如波形器(wiggler)、波荡器(undulator)的飞速发展;以及利用这类光源通过时间分辨晶体学来研究分子研究动态变化的前景,在过去的十年中,理论研究已经阐明了多波长衍射几何学的特征,在很大幅度上加深了我们对劳埃法的认识。劳埃数据处理方法及其软件开发也因此有所创新。曾在相当长的时间内限制这项技术应用的劳埃数据处理中的大部分问题存在已经得到解决;同步辐射光源,束线光学器件及X射线探测器等方面也都取得了显著的进步。表态劳埃实验得到的结构因子振幅在质量上已同单波长数据相当。晶体中反应易于启动的时间分辨劳埃实验已经开始在一系列生物分子体系中得到成功的实践,由此得到的关于结构动力学的信息是任何其它传统的衍射方法所无能为力的。这些静态的及时间分辨的实验说明了劳埃已经开始走向成熟,并指明了今后发展的方向, 即对晶体的镶嵌度和劳埃衍射点的相应能量宽度的正确处理、扩散散射的考虑,时间分辨实验中低浓度瞬态中间物结构的测定等等。  相似文献   
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