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噬菌体表面显示肽库研究进展韩照中苏国富黄翠芬(军事医学科学院生物工程研究所,北京100071)关键词噬菌体表面显示肽库1990年,Scot首次将随机序列肽与丝状噬菌体的表面蛋白gll融合,并呈现在噬菌体表面,建立噬菌体表面显示肽库(pep-tides... 相似文献
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CS3菌毛抗原和霍乱毒素B亚基在人伤寒菌中的表达 总被引:4,自引:2,他引:4
通过体内外重组的方法,构建了人伤寒菌流行株Ty2的△aroA,△aroC和asd^-基因缺失突变体(RS417)作为抗原载体菌:同时,构建包含asd基因的表达质粒pYX102,与RS417一起,构成宿主-载全平衡致死系统,用于在没有抗生素条件选择的情况下,稳定表达克隆在表达质粒上的外源抗原基因,将肠毒素性大肠杆菌的菌毛抗原III(CS3)基因和霍乱弧菌毒素B亚基(CTB)基因分别克隆至pYX102 相似文献
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利用噬菌体表面显示技术,将蛋白质或短肽分子在噬菌体表面表达,可以对抗原表位及蛋白质的相互作用位点进行定位与模拟,并用于蛋白质的体外亲和力优化以及新基因的克隆,在小分子药物的设计和筛选中也具有重要的作用。环肽结构的设计以及筛选策略和方法的改进,逐步推动着噬菌体表面显示技术在免疫学、基因工程药物及基础生物医学研究等研究领域中的成功应用 相似文献
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肠毒素性大肠杆菌CS3纤毛抗原在痢疾菌中的表达及其免疫效果研究 总被引:3,自引:0,他引:3
首先通过体内外重组的方法,构建了福氏2a痢疾菌T32asd基因缺陷的突变体FaD,作为抗原载体菌;同时,构建包含asd基因的表达质粒pYX102,与FaD一起,构成宿主-载体平衡致死系统,用于在没有抗生素条件选择的情况下,稳定表达克隆在表达质粒上的外源抗原基因.将肠毒素性大肠杆菌的CS3菌毛抗原基因克隆至pYX102,构建成重组表达质粒pYX103,ELISA检测结果证实CS3在痢疾菌中可以很好地表达.免疫小鼠后可诱生相应的抗体,虽然口服免疫和注射免疫产生的CS3抗体效价有一定差别,但对痢疾菌的毒株攻击均可提供较好保护.该结果为细菌性腹泻疫苗的研制提供了候选株. 相似文献
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细菌作为肿瘤基因治疗载体的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
营养缺陷型细菌能够侵袭肿瘤细胞并外源基因的特性提示我们可以将其设计成新型的肿瘤基因治疗载体。本文综述了细菌作了肿瘤基因治疗载体的历史与现状、机制以及存在的问题。 相似文献
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从噬菌体表面展示肽库中筛选志贺毒素受体结合抑制剂 总被引:1,自引:0,他引:1
利用抗体捕获法 ,从表面展示随机肽序列的噬菌体文库中筛选到与志贺毒素B亚基 (StxB)结合 ,并能抑制志贺毒素细胞毒效应的噬菌体克隆 ;依据其中 1个克隆序列 (A12 )合成的肽可以与志贺毒素的受体Gb3竞争结合StxB ,并抑制志贺毒素(Stx)的细胞毒和肠毒活性 ;抑制 5×CD50 剂量的Stx细胞毒效应需 2 2 .7μmol的A12合成肽 .筛选得到的 2个噬菌体克隆 (A3 ,A12 )编码的氨基酸序列不同 ,但能竞争结合StxB ,推测它们形成相同或相似的空间结构 .为志贺毒素抑制剂进一步研究打下基础 ,对其他相关药物的研制亦有参考价值 . 相似文献
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营养缺陷型细菌能够侵袭肿瘤细胞并呈递外源基因的特性提示我们可以将其设计成新型的肿瘤基因治疗载体。本文综述了细菌作为肿瘤基因治疗载体的历史与现状、机制以及存在的问题。 相似文献
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肠毒素性大肠杆菌CS6菌毛抗原与霍乱毒素B亚基在痢疾菌中的表达及其免疫学效果 总被引:5,自引:0,他引:5
构建了携带asd、霍乱毒素B亚基(CTB)基因的表达质粒pYX201,与福氏2a痢疾菌T32的△asd突变株FaD构成宿主质粒平衡致死系统,用于在没有抗生素选择压力的情况下,稳定表达CTB抗原基因。以此为基础,构建了单独表达肠毒素性大肠杆菌CS26菌毛抗原基因的重组质粒pYX202,以及同时表达CS6和CTB的共表达质粒pYX203。Western blotting和ELISA检测结果证实CS6及CTB在痢疾菌FaD中可以有效表达。重组菌免疫家兔后可诱生相应的血清抗体,特别是CTB的抗体效价较高,并持续较长时间。本研究为细菌性腹泻疫苗的研究提供了候选株。 相似文献
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志贺氏毒素B亚单位的分离纯化及其多克隆抗体的制备 总被引:1,自引:0,他引:1
从高效表达志贺氏毒素B亚单位(StxB)的工程菌株DH5α/pSU108分离纯化了StxB,并用它制备了多克隆抗体。ELISA试验表明抗StxB抗血清的滴度达1×104。Westernblot结果显示该抗血清能与StxB发生特异反应。这为研究志贺氏毒素B亚单位的免疫保护作用和痢疾志贺氏Ⅰ型菌苗的研制打下了基础 相似文献