中华绒螯蟹多倍体的诱导研究 : Ⅱ.热休克诱导中华绒螯蟹三倍体胚胎和四倍体 状幼体

采用热休克方法对中华绒螯蟹进行了三倍体、四倍体的人工诱导研究。结果表明,在卵子受精后（发育水温２０±１℃）１０～２５分钟,用３８～４１℃的高温处理１～２分钟,三倍体的平均诱导率为１０％～５０％,而对受精后３０分钟的卵子进行诱导,或在４０℃下处理超过２５分钟和处理温度高于４２℃诱导１５分钟的各试验组,均未检测到有三倍体胚胎。依据诱导三倍体的适宜诱导温度和处理时间,将受精后８１／２～９５／６小时的卵子用４０℃热休克处理１５分钟,均获得了一定比例的四倍体胚胎,其中四倍体最高诱导率为５２９６％。检查卵受精后８５／６小时经热休克处理所孵得的氵蚤状幼体,其四倍体的出现频率约为１９７％。讨论了热休克处理促使第一极体保留生产三倍体和抑制第一次卵裂诱导四倍体的条件和技术关键,以及诱导参数与胚胎发育、胚胎存活的相互关系等问题。     

绿咖啡豆中低咖啡因绿原酸的提取分离研究

建立高效液相色谱—双波长同时检测咖啡豆提取物中绿原酸和咖啡因含量的方法。咖啡因和绿原酸在0.2～1.0 mg·mL-1范围内,峰面积与浓度呈现良好的线性关系。咖啡因：Y＝44077X＋227.78,R＝0.9997,RSD＝0.78%;绿原酸：Y＝34896X＋289.96,R＝0.9995, RSD＝0.93%。以绿原酸含量为指标,在单因素试验基础上建立正交试验,确定从绿咖啡豆中提取绿原酸的最佳条件为乙醇浓度20%,液料比6∶1,提取时间60 min,提取温度70 ℃。以咖啡因和绿原酸含量为指标,通过萃取试验,确定最佳脱咖啡因萃取剂为环己烷-三氯甲烷-丙酮混合溶剂,萃取工艺为1.5倍体积萃取剂萃取3次,产物中咖啡因含量由(3.52±0.08)%下降至(0.47±0.11)%。