肠上皮细胞Tlr4特异性敲除基因鼠鉴定及免疫学特征观察

目的 鉴定肠上皮Tlr4特异性敲除(Tlr4^f/f cre T)鼠,评价其免疫学特征。方法 应用CRISPR/Cas9技术构建Tlr4^f/f cre T基因鼠,PCR和免疫荧光鉴定Tlr4^f/f cre T基因鼠基因型,观察基因鼠的一般生物学特征、繁殖能力和子代存活率。HE染色、流式细胞术及ELISA比较基因鼠和野生型小鼠免疫器官结构、肠黏膜免疫细胞比例及细胞因子分泌水平差异。结果 从基因和蛋白水平验证Tlr4^f/fcre T基因鼠的建立。与野生型鼠比,Tlr4^f/f cre T基因鼠的一般生物学特征无明显差异、子代存活率> 90%;胸腺、脾及肝生理结构无显著性差异;脾淋巴细胞增殖能力、血清及肠黏膜细胞因子分泌水平无显著性差异;但CD4⁺T和γδT细胞显著减少。结论 成功构建了肠上皮Tlr4特异性敲除小鼠(Tlr4^f/f cre T),为研究肠上皮Tlr4基因在肠道疾病、肿瘤及代谢性疾病中的作用提供实验手段。