双拷贝人α型心钠素基因的组建及大肠杆菌分泌型克隆与表达

将单拷贝人α心钠素基因3′端用Ban Ⅱ酶解除去包括终止密码在内的36个碱基对,代之以人工合成的含Glu-Lys-Phe-Glu连接片段与另一单拷贝人α心钠素基因的5′端串连成编码60肽的双拷贝心钠素基因,克隆于大肠杆菌分泌型表达载体pIN-Ⅲ-OmpA_2质粒中,表达生成60肽的双拷贝人α型心钠素衍生物,在信号肽的作用下分泌至胞膜间质并自动切割为60肽的外源基因产物。分子量约8K的表达产物用分子筛或超滤膜分离后再经HPLC纯化,表达产物具有明显的心钠素放免活性和舒张血管活性。     

基因定点诱变删除及天然α型心钠素的分泌型表达

用基因定点诱变技术,删除了pO_1α ANF表达质粒中的33对碱基,使人α型心钠素结构基因直接与大肠杆菌分泌型表达质粒pIN-Ⅲ-OmPA中的信号肽酶切位点编码区相连,构成天然人α型心钠素的表达质粒pANF,在IPTG诱导下表达28肽的天然人α型心钠素。纯化后的表达产物具有天然心钠素的放免活性和很强的舒张血管的生物活性。     

在体内有内源性抗鸦片物质吗?

自从1975年Hughes从脑内发现有内源性鸦片样物质以来,有许多作者相继报道从体内分离出许多具有吗啡或鸦片样活性的物质,主要有亮啡肽、甲啡肽,β-内啡肽,α-内啡肽,γ-内啡肽、垂体吗啡样物质,快泳动性吗啡样物质和非肽类的吗啡样物质等近10种。它们总称为内啡素(endorphins)或内源性鸦片样物质(endogenous opiate like substances,OLS)。     

脑内的肾素-血管紧张素系统

近年来发现,在脑内存在着一个独立的肾素-血管紧张素系统,具有升高血压、引起烦渴、促进饮水、调节垂体激素分泌等作用。在高血压的发病过程中亦具有一定意义。     

快速鉴定重组质粒菌落的新方法

快速鉴定重组质粒菌落的新方法董北阎锡蕴（康奈尔大学医学院医学系,纽约）（中国科学院微生物研究所,北京１０００８０）筛选含重组质粒菌落常用的方法有探针杂交、小规模制备质粒ＤＮＡ进行限制酶切鉴定、。互补及插人失活。我们在此介绍一种新方法,即半菌落ＰＣＲ扩...     

人免疫缺陷病毒Ⅰ型膜糖蛋白gp160人单链抗体

人获得性免疫缺陷综合症（ＡｃｑｕｉｒｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙＳｙｎｄｒｏｍｅ,简称ＡＩＤＳ）主要是由人免疫缺陷病毒Ⅰ型（ＨＩＶ１）引起的严重危害人类健康的传染病。ＨＩＶ研究的最新进展揭示了膜糖蛋白ｇｐ１２０与其受体和中和抗体复合物晶体结...     

抗肿瘤血管三结构域单链抗体VH/L的构建与表达

以本室研制的一株抗肿瘤血管单克隆抗体AA98为基础,采用PCR扩增抗体AA98基因的重链可变区(V_H)和轻链(L),以重链恒定区1(C_H1)5′端12个氨基酸的序列作为连接肽,并将连接肽中的Lys突变为Ser,构建VH连接肽-L三结构域单链抗体。重组VH/L单链抗体在大肠杆菌中得到了高效表达,其表达量占菌体总蛋白质的20%。表达的蛋白质在菌内形成包含体,经凝胶过滤法复性,获得了有抗原结合活性的V_H/L。该三结构域单链抗体的成功构建和复性,为重组抗体片段的研制提供了借鉴。     

Production and characterization of a human single-chain Fv to collagenase IV

Ｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓａｒｅｔｈｅｍｏｓｔｉｍｐｏｒｔａｎｔｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｍａｌｉｇｎａｎｔｔｕｍｏｒ.ＴｈｅｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｉｎｃｒｅａｓｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅＩＶｉｎｔｕｍｏｒｔｉｓｓｕｅｓｈａｖｅｂｅｅｎｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄａｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍａｉｎｆａｃｔｏｒｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｕｍｏｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓ[1].ＩｔｈａｓｂｅｅｎｔｈｏｕｇｈｔｔｈａｔｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅＩ…     

球囊拉伤兔髂动脉内膜的组织形态变化的研究

球囊拉伤血管内膜是目前研究血管内膜增厚,管腔狭窄的方便而切实的模型。因此,对其演变过程的形态学研究是必要的。方法：应用ＰＴＣＡ球囊导管拉伤兔髂动脉,用光镜、电镜和扫描电镜观察拉伤后不同时间的动态变化。结果：拉伤后各期变化不同,拉伤后１周内,以血细胞沉积为主,１周后,内膜开始增生,２至４周增生最快。增生活跃的内膜平滑肌细胞来自活化的中膜平滑肌细胞。内皮细胞增生极慢,４周内未见内膜内皮化,呈虫食样改变。结论：球囊拉伤兔髂动脉内膜,可引起血栓形成,炎症反应,平滑肌细胞增生和细胞外基质堆积,导致血管腔狭窄。此研究为今后的工作提供一定的客观依据