显微分光光度计测量细胞内物质含量的两种方法——双区法和双波法的比较

一、前言根据显微分光光度计测得被测物质的透射光、反射光、荧光等的光强可确定物质的含量。其中透射法的原理是基于朗伯-比尔定律。此定律在被测物质均匀分布的情况下才能成立。化学样品很易满足这一条件。但生物样品,特别是细胞样品由于其所含物质的不均匀分布及其形状不规则,满足不了此种条件,测量结果必然产生误差。为消除这一误差,人们引入了双区法、双波法和扫描法。本文只就前两种方法     

全国第十二次酒精技术协作会议

1984年11月15日至20日在江苏徐州市召开了全国第12次酒精技术协作会。与会代表220。人会上徐州酿酒总厂等二十个单位介绍了企业管理、节能、节水新技术和增加酒精产量和酒精废水处理等方面先进经验。     

从叶片中提取ATP方法的比较

根据前人和我们的工作结果研制的发光光度计和荧光素酶测ATP的技术在固氮,光合作用,植物激素,海洋生物量,植物种子,医学等研究领域中得到了广泛地应用,除了顾增辉等从植物种子提取ATP以外,而关于该技术的方法学研究则不多。目前一般都采用组织破碎法从叶中提取ATP,但这种方法存在一些缺     

外消旋薄荷醇对映选择性酶促酯化中酸酐与羧酸的比较研究

利用脂肪酶在有机溶剂中催化对映选择性酯化反应对外消旋薄荷醇进行了有效的光学拆分。对分别使用酸酐和相应的游离羧酸作酰基给体时的反应性能进行了比较。发现酸酐的反应性远高于对应的游离羧酸,但在酶的催化作用下酸酐易水解成为游离羧酸;在微水系统中使用过高浓度的酸酐会导致酶缺水而失活,同时会促进手性醇的非选择性酯化,从而降低产物的光学纯度。然而,在连续流加丙酸酐的半批式反应系统中,所有这些缺点均可有效地克服。与使用游离丙酸的批式反应系统相比,ｄｌ-薄荷醇的反应时间缩短了一半,酶的稳定性大幅度提高,而产物ｌ薄荷醇酯的光学纯度不相上下（＞９８％ｅ）。     

东亚大都市学生头型的比较研究

为了研讨居住区域的气候条件和社会经济环境对头型的影响,采用国际通用的人体测量法,调查测量了东亚三个国家四个集团３４７２名６－１７岁学生的头长和头宽,经统计学处理求得其平均值、头指数,回归方程,并作性差和地区差检验,其结果表明：中国大连学生为特圆头型,菲律宾马尼拉学生为圆头型,地理位置在大连和马尼拉之间的日本东京的学生的头型也位于二者之间,生活富裕集团的头长和头宽明显大于生活贫穷集团的学生,但头型二     

简易的无氧柱层析方法

柱层析(离子交换,吸附和凝胶过滤)是分离纯化蛋白质,酶和其他一些生物活性物质的重要手段。国外已有各种型号的成套装置作为商品出售,但是遇到对氧敏感的样品,必须设法在整个操作过程中,保持无氧状态。几年来我们在固氮酶的研究中,逐步掌握了一些简单而行之有效,且在一般实验室条件下都能办到的无氧柱层析方法。现在扼要介绍如下,以供有关工作参考。一、应用器皿中气体的抽换首先要把实验中所用的贮液瓶及收集瓶中的空气都换成惰性气体(如氮、氩等)。根据需要可选用不同容积的抽滤瓶盛装洗脱液。抽滤瓶口的橡皮塞中插入一玻璃管,管口配以尺寸合适的盐水瓶塞,如图1所示。     

人单核细胞系中HIV-1前病毒转录调节新型研究模型的建立

【目的】抗反转录病毒疗法(ART)能够有效控制人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus-1,HIV-1)的复制,但是不能将其完全清除。至2012年底,全球仍有3 500万HIV-1感染者,同年约160万人死于艾滋病(Acquired immune deficiency syndrome,AIDS)及其相关疾病。HIV-1感染难以根治的主要原因之一是机体内HIV-1潜伏储存库(Reservoir)的存在。HIV-1潜伏储存库主要由CD4+T细胞和单核巨噬细胞构成,与CD4+T细胞相比,目前研究者对单核巨噬系细胞中HIV-1病毒复制机制尚不明了,且缺乏适宜的研究体系。因此,为探讨单核细胞活化或分化信号对HIV-1复制的影响,我们建立了旨在研究HIV-1前病毒转录调控机制的人单核巨噬细胞系模型。【方法】构建env区域移码突变和nef区域携带EGFP或Nano Luc报告基因的HIV-1 NLn GFP-Kp或NLn Nano Luc-Kp重组病毒,分别感染2种人单核细胞系THP-1或U937细胞。通过有限稀释法制备单克隆细胞系,利用流式细胞术或Nano Luc荧光素酶活性分析检测报告基因的表达。筛选EGFP或Nano Luc阴性表达的细胞克隆,经激活剂佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)刺激后鉴定潜伏感染的细胞克隆。【结果】研究中鉴定了4个HIV-1潜伏感染的细胞克隆。其中2个是表达EGFP的THP-1克隆,2个是以Nano Luc为报告基因的U937克隆。这些克隆在PMA刺激处理后皆有报告基因的表达,而在恒态条件下未检测到报告基因的表达。【结论】成功建立了4个HIV-1潜伏感染的人单核细胞系克隆,该模型有助于理解单核巨噬系细胞的HIV-1病毒复制机制,可能成为进一步研究HIV-1前病毒转录调控机制的有力工具。     

水分胁迫下臭柏（Sabina vulgaris Ant.）光合特性和色素组成的季节变化

在室内砾耕栽培条件下,通过培养液中加入PEG(Polyethylene glycol 分子量为6000)以调节溶液渗透势,设置对照、弱水分胁迫和强水分胁迫3种处理 (培养液渗透势分别为0.02,-0.1,-0.34 MPa), 从1997年开始对臭柏进行长期干旱胁迫模拟实验.2003年测定了臭柏叶片光合色素和光合特性的季节变化.结果表明:对照区气孔导度季节变化在5月和9月份形成了典型的双峰曲线.尽管对照区的气孔导度明显高于其他两个处理,但日光合量却低于弱水分胁迫区.3个处理Chl a/b的比值在11月至翌年3月的低温期内均升高,以强水分胁迫区的增幅最大,其它月份该比值在3个处理之间没有显著的差异.3个处理的叶绿素总量(Chl a+b)在生长季的5～9月份均有不同程度的上升,但其中以强水分胁迫区增幅最小.在11月至翌年3月的低温期,各处理均大幅提高叶黄素总量(V+A+Z)和热耗散色素比例(A+Z)/(V+A+Z) (V:紫黄质、A:单环氧玉米黄质、Z:玉米黄质);在5～7月份的生长高峰期,各处理则明显降低了叶黄素总量和热耗散色素比例.这种趋势在强水分胁迫区表现的更为显著.