枯草杆菌Ki—2—132株中degUS基因的遗传效应

利用基因同源重组和基因割裂的方法,研究了枯草杆菌ｋｉ－２－１３２中ｄｅｇＵＳ基因的作用。发现此基因对菌株的蛋白酶产生、感受态的形成、细胞运动、葡萄糖对产酶的抑制等系列表型都有影响,是一个多效基因。通过对此基因的割裂分析,发现单纯ｄｅｇＵＳ阅读框对菌生长时的细胞形态及表达载体上ａｐｒＥ的表达有明显的影响,而对其他表型的影响不明显     

猪瘟病毒NS2-3抗原集中区基因的原核表达及鉴定

为获得猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV) NS2-3抗原集中区蛋白,并建立CSFV抗体快速检测方法.本研究以CSFV全长基因组质粒为模板,PCR扩增NS2-3抗原表位集中区,利用扩增片段和克隆载体,构建重组表达质粒,命名为pET32a-NS2-3-1.重组表达质粒转化Rosetta (DE3)细胞,利用IPTG诱导表达, SDS-PAGE电泳和Western-blot鉴定重组表达产物.结果表明,重组质粒pET32a-NS2-3-1在28℃诱导5 h得到高效表达,重组蛋白能够与兔抗CSFV阳性血清发生反应.获得CSFV NS2-3抗原集中区蛋白,并且获得的重组蛋白具有抗原性,能够作为CSFV抗体检测的抗原.