水合溶菌酶的H-D交换与分子活动性

应用红外吸收光谱研究不同含水量的溶菌酶膜的H-D交换动力学,以期阐明水合对溶菌酶分子活动性的影响。 酰胺Ⅱ带与酰胺Ⅰ带峰高之比A_Ⅱ/A_Ⅰ随交换时间延长成指数下降,它反映处于不同状态的质子交换速率。在一定水合范围内交换速率与水合溶菌酶水含量有关。分别在交换10分钟及5小时后的A_Ⅱ/A_Ⅰ测量表明,在R<0.2范围内,交换的质子数随水含量同步增大。R≥0.2交换质子数不再进一步增大。最初10分钟内交换的反应速度常数K_f随水含量的改变亦遵循定律。R≈0.2为一临界水含量,是溶菌酶分子维持其晶体和溶液中的空间结构及表现其活性所必需。低于此值时,溶菌酶分子的活动性随水含量而改变。     

工程菌噬菌体T7溶菌酶的纯化和性质

用崔道珊等构建的噬菌体T7溶菌酶工程菌株,培养物经超声破碎和DE52,CM52柱层析纯化,我们得到电泳纯的T7溶菌酶,分子量为17000,最适反应pH为8.0.其热稳定性欠佳,保温37℃,5min即丧失酶活21%.     

用激光拉曼探讨不同相对湿度下聚赖氨酸分子的二级结构

本文报导了聚赖氨酸分子的二级结构因其含水量变化而变化.用T.L Lippert等人提出的方法对不同含水量下的聚赖氨酸分子的激光拉曼光谱进行了定量计算.结果表明分子二级结构中的x螺旋、β折叠及无规卷曲成份有明显差异.当分子中相对湿度在0～33%时它的二级结构主要为无规卷曲成份;当湿度在90%-75%时分子的主键盘方式以α螺旋为主;而当湿度小于75%大于40%范围时分子的二级结构改变以β折叠和无规卷曲的肽链构象.     

水合诱导的多肽二级结构变化—红外光谱法研究

在不同相对湿度(R.H.)下,用红外光谱法研究了聚赖氨酸(PLys,MW14000)、聚赖氨酸溴化氢结合物(PLvs-HBr,MW55000)和聚谷氨酸钠(PGA-Na,MW80000)的二级结构随时间的变化.在R.H.=60%下,三种多肽由无规卷曲向β-结构转变的时间相近,约需9分钟;而由α-向β-结构转变时,PGA-Na所需时间约为PLas和PLys-HBr的二倍.然而在R.H.=90%左右下,由β-向α-结构转变时,PLys和PLys-HBr所需时间反为PGA-Na的二倍.在R.H.=90%左右下由无规卷曲向α-结构转变时,PLys和PLys-HBr出现β-折叠结构,而PGA-Na则无.实验表明了在不同水合度下侧链基团对构象变化的影响.     

溶菌酶中水分子的红外吸收光谱

本文报导了不同水含量的溶菌酶中水的红外吸收光谱的测量结果.室温下,在远离纯水OH带及OD带的两侧分别出现高频与低频带,峰的位移大小随水含量的不同而改变.低温下,当R(克水/克蛋白)>0.2后,比值A./A.随水含量增大而增大.本文对室温下高频及低频峰的可能原因及与水的冻结过程的联系进行了讨论.     

用激光拉曼探讨不同相对湿度下聚赖氨酸分子的二级结构

本文报导了聚赖氨酸分子的二级结构因其含水量变化而变化.用T.L Lippert等人提出的方法对不同含水量下的聚赖氨酸分子的激光拉曼光谱进行了定量计算.结果表明分子二级结构中的x螺旋、β折叠及无规卷曲成份有明显差异.当分子中相对湿度在0～33%时它的二级结构主要为无规卷曲成份;当湿度在90%-75%时分子的主键盘方式以α螺旋为主;而当湿度小于75%大于40%范围时分子的二级结构改变以β折叠和无规卷曲的肽链构象.     

聚赖氨酸和它的溴化氢结合物结构变化的红外光谱研究

聚赖氨酸(PLys)和它的溴化氢结合物(PLys-HBr)在不同的相对湿度(R.H.)下,用红外光谱仪测得它们的结构变化.固态PLys-HBr(平均分子量(MW)55000)在40%R.H.以下能保持无规卷曲结构,在40—70%R.H.之间为β-折叠,70%R.H.以上为α-螺旋.PLys由于它们的平均分子量不同,结构变化差别较大.PLys(MW 55000)在各种相对湿度下保持α-螺旋,直至96%R.H.才出现β-折叠.PLys(MW 14000)在40%R.H.以下能保持无规卷曲结构,在40—85%R.H.之间主要为β-折叠,85%R.H.以上为α-螺旋.