利用HPLC建立对比筛选法测定红花中色素金橙Ⅱ

利用高效液相色谱法,分别检测并对比红花药材中羟基红花黄色素A和金橙Ⅱ的浓度,从而建立对比筛选红花样品中金橙Ⅱ的方法。结果在46个红花样品中,推测有26个可疑阳性样品;而通过对比筛选法能将可疑阳性样品数减至2个。经HPLC-MS法确证了对比筛选法的结果。检测羟基红花黄色素A(HSYA)的色谱条件为:甲醇-乙腈-0.01%磷酸溶液(体积比为26∶2∶72)为流动相。检测金橙Ⅱ的色谱条件为:乙腈-0.025 mol/L溶液(40∶60)为流动相。此法相比于常规只检测红花中金橙Ⅱ的方法,筛选效率与精确度更高,并且更经济、适应性更广。     

干扰素α-2bHis89/His159的分子获得及性能分析

目的：通过结构分析和定点突变,构建干扰素α-2bHis89/His159(IFNα-2bHis89/His159),以期获得高性能干扰素突变体。方法：采用PCR体外定点突变技术,使干扰素α-2b基因的第89位密码子由编码酪氨酸的TAC突变为编码组氨酸的CAC,第159位密码子由编码谷氨酸的GAA突变为编码组氨酸的CAC。将扩增片段克隆入pET23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。表达的IFNα-2bHis89/His159经包涵体变性、复性、DEAE层析和CM层析纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定。以SD大鼠进行初步药代动力学研究。结果：IFNα-2bHis89/His159主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的40%以上。纯化后,IFNα-2bHis89/His159的纯度大于95%,比活性大于2.8×108IU/mg。相对于IFNα-2b较短的消除半衰期,IFNα-2bHis89/His159的消除半衰期得到延长,为2.34±0.27h。结论：构建了IFNα-2bHis89/His159的重组表达载体,并成功地在大肠杆菌中实现了高效表达,建立了IFNα-2bHis89/His159的纯化工艺,获得了体外活性增高并且体内稳定性得到改善的新型干扰素α-2b突变体。     

人胚胎干细胞优化培养的进展

人胚胎干细胞(humanembryonicstemcell,hEScell)是来源于着床前人囊胚内细胞团(innercellmass,ICM)的、具有自我更新能力和分化全能性的细胞。由于hES细胞能在一定条件下分化成三个胚层来源的各种细胞,所以它具有重要的基础研究价值和巨大的临床应用前景,可应用于人早期胚胎发育过程的研究、药物毒物筛选、细胞移植治疗、基因治疗等领域。目前,世界上已经建立了多株hES细胞系,最早建立的hES细胞系是生长在小鼠胚胎成纤维(mouseembryonicfibroblast,MEF)细胞上的,培养体系中含血清等动物源性成分,这些成分可能引起动物源性病原体或支原体的污染,从而限制了hES细胞的临床应用。近年来,科学家们在优化hES细胞的体外培养体系方面做出了很大的努力并取得了长足进展,已经开始采用无血清、无饲养层细胞、无外源性蛋白、成分明确的培养体系进行hES细胞建系及培养,从而在一定程度上解决了上述问题。本文主要从饲养层细胞、无饲养层培养体系、培养基质、细胞因子等方面综述了hES细胞建系和维持其未分化状态的优化培养所取得的最新进展和存在的问题。     

奎尼丁能竞争性阻断α_1及α_2肾上腺素类受体

奎尼丁是一种历史悠久的抗心律失常药。早在50多年前,人们即已发现它除了对心肌的兴奋性、传导速度及收缩力等有直接作用外,对心血管系统还有抗胆碱能及抗肾上腺素能的间接作用,但其作用机制尚未充分阐明。进入八十年代以来,Mirro等首先证明奎尼丁对心脏的抗胆碱能作用是通过阻断M-受体而引起的。最近,Motulsky等又应用标记的选择性α_1阻断剂[~3H]-哌唑嗪([~3H]-prazosin)、α_2阻断剂[~3H]-育亨宾([~3H]-yohimbine)分别在大白鼠心脏、肾脏及人的血小板等膜制备证明奎尼丁能竞争性地阻断这些放射     

优质服务对结肠癌手术患者早期康复治疗的效果及满意度调查

目的:探讨优质护理服务对结肠癌患者术后恢复的临床效果,为提高临床护理质量提供参考。方法:选取2011年4月-2013年9月在我院胃肠外科接受手术治疗并住院观察的患者76例,随机分为优质服务组和常规护理组,每组38例。优质服务组患者接受心理护理、饮食管理及健康教育等优质护理服务,而常规护理组则接受基本的护理方法。比较两组患者术后的临床疗效,并对护理服务的满意度进行问卷调查。结果:优质护理服务组患者术后拔管时间、排气时间、下床活动时间及住院时间均显著优于常规护理组,且并发症的发生率较低,差异具有统计学意义(P0.05)。优质护理服务组患者对心理护理、饮食管理、健康教育、护患沟通、服务态度及专业技能的满意度评分明显高于常规护理组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:优质护理对结肠癌患者术后的早期康复治疗具有良好的效果,充分满足患者的合理需求,提高了护理质量及患者满意度,值得推广采用。     

一种从富含多糖的玉米幼穗中提取RNA的方法

介绍了一种大量提取玉米(Zeamays L.)幼穗总RNA的有效方法。由于玉米幼穗富含多糖,用普通的RNA提取方法和Trizol很难获得高质量的RNA。在热酚法提取RNA的基础上,通过在提取缓冲液中加入低pH值的醋酸钾来去除多糖。所得到的RNA获得率高,质量好,条带完整,实验证明可直接用于RT-PCR、微阵列等各项后续分子生物学实验。     

调控胚胎干细胞自我更新的关键转录因子研究进展

胚胎干细胞（embryonic stem cells,ES细胞）具有自我更新和发育多能性的特点,在再生医学研究中有着广泛的应用前景。ES细胞多能性和自我更新的维持受到复杂的调控,涉及到转录调控、信号转导以及表观遗传调控等多个方面。转录因子Oct4、Sox2、Nanog在其中扮演着非常重要的角色,对干细胞特性的维持必不可少。本文着重讨论了这些关键转录因子的研究进展。这些研究促进了对ES细胞自我更新机制的深入理解,并为进一步的临床研究提供了理论基础。